截短适配体-荧光法检测水中双酚A研究

作     者：薛晨晨 朱光平 白洁 吴南翔 范宏亮 XUE Chenchen;ZHU Guangping;BAI Jie;WU Nanxiang;FAN Hongliang

作者机构：杭州医学院公共卫生学院浙江杭州310013 

出 版 物：《预防医学》 (CHINA PREVENTIVE MEDICINE JOURNAL)

年 卷 期：2021年第33卷第11期

页      面：1086-1090页

学科分类：1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 100402[医学-劳动卫生与环境卫生学] 10[医学] 

基　　金：国家自然基金青年基金(21904118) 浙江省自然科学基金(LY17B050008) 

主　　题：截短适配体 荧光法 检测 双酚A 

摘      要：目的建立截短适配体-荧光法测定水中双酚A。方法选择包含38个碱基的双酚A截短适配体为双酚A识别元件,在截短适配体的5’端修饰荧光基团6-FAM,在互补序列c DNA的3’端修饰淬灭基团DABCYL,配制双酚A及干扰物标准溶液,优化互补序列c DNA的碱基个数、截短适配体与互补序列cDNA的浓度比、孵育温度、孵育时间和缓冲液pH值,建立截短适配体-荧光法检测体系,进行特异性与回收率实验。结果当互补序列cDNA包含9个碱基,截短适配体与互补序列cDNA的浓度比为1∶1.5,缓冲溶液p H值为7.5,55℃孵育60 min时,10~75 pmol/L浓度范围内,双酚A的线性关系较好,线性回归方程为y=2 230.7x+110 825,相关系数为0.926,检出限为3.3 pmol/L。四溴双酚A、雌二醇、雌三醇和双酚S等4种干扰物与双酚A的荧光强度差值区别较明显,对检测结果未造成明显干扰。当加标浓度为20.0、40.0和60.0 pmol/L时,回收率分别为97.8%、98.8%和102.3%,相对标准偏差分别为4.4%、2.1%和2.6%。结论建立的截短适配体-荧光法操作简便,灵敏度高,特异性强,可用于检测水中双酚A。