绿豆实时荧光定量PCR内参基因的筛选与验证
Selection and validation of reference genes for real-time fluorescence quantitative PCR in mung beans作者机构:南京农业大学生命科学学院生物学实验教学中心南京210095
出 版 物:《植物生理学报》 (Plant Physiology Journal)
年 卷 期:2021年第57卷第11期
页 面:2203-2212页
核心收录:
基 金:2020年江苏高校品牌专业建设工程二期(生物科学专业)项目 南京农业大学大学生创新创业训练专项(S20190002和202010307028Z)
摘 要:实时荧光定量PCR作为研究基因表达的重要手段,在操作过程中需要内参基因作校正与标准化。本文以绿豆(Vigna radiata)野生型‘苏绿1号’(苏绿)及其突变体08(08)为材料,采用实时荧光定量PCR技术分析6个候选内参基因(EF1α、TUA、TUB、CHS、GADPH、Actin)在不同品种、不同部位(根、茎、叶)及镉诱导前后的表达趋势,继而利用geNorm、NormFinder和BestKeeper这三款软件对候选内参基因的表达稳定性进行综合分析,最后利用目的基因Nramp5进行验证。实验结果表明,Actin与TUA是所有样品中表达最稳定的内参基因,CHS表达稳定性最差。本研究为将来绿豆基因表达分析的相关研究提供了参考。