香草酸通过诱导自噬缓解HepG2细胞脂肪变性

作     者：陈倩 伊力亚斯・艾萨 雷秀英 张瑜 冯学召 西仁阿依•西热甫 米娜 CHEN Qian;YILIYASI・Ai-sa;LEI Xiu-ying;ZHANG Yu;FENG Xue-zhao;XIRENAYI・Xi-re-fu;MI Na

作者机构：新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆维吾尔自治区乌鲁木齐830011 新疆医科大学药学院药理学教研室新疆维吾尔自治区乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院生物学教研室新疆维吾尔自治区乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院病理与病理生物学教研室新疆维吾尔自治区乌鲁木齐830011 新疆医科大学药学院生药学教研室新疆维吾尔自治区乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院新疆维吾尔自治区乌鲁木齐830011 

出 版 物：《中国临床药理学杂志》 (The Chinese Journal of Clinical Pharmacology)

年 卷 期：2021年第37卷第19期

页      面：2622-2626页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：新疆地产中药民族药新药研发培育基金资助项目(2017-02-04) 

主　　题：香草酸 棕榈酸 脂肪变性 细胞自噬 

摘      要：目的研究自噬在香草酸(VA)缓解肝细胞脂肪变性中的作用。方法将HepG2细胞分为空白组(不含药物的完全培养基)、阳性对照组(50 nmol·L^(-1)西罗莫司)和低、中、高剂量实验组(25,50,100μmol·L^(-1)VA),作用时间12 h。用蛋白质印迹法检测微管相关蛋白1轻链3B(LC3Ⅱ)和泛素结合蛋白P62(P62)表达水平的变化,探究VA诱导自噬的作用。用VA单独或联合100 nmol·L^(-1)巴弗洛霉素A1(BafA1)处理Hep G2细胞12 h,实验分为空白组(不含药物的完全培养基)、对照A组(100 nmol·L^(-1)BafA1)、对照B组(50μmol·L^(-1)VA)和实验组(50μmol·L^(-1)VA+100 nmol·L^(-1)Baf A1)。用蛋白质印迹法检测LC3Ⅱ蛋白表达水平的变化,探究VA对自噬流的影响。用VA单独或联合3-甲基腺嘌呤(3-MA)干预棕榈酸(PA)诱导的HepG2细胞脂肪变性模型,将细胞分为空白组(不含药物的完全培养基)、模型组(100μmol·L^(-1)PA)、对照组(100μmol·L^(-1)PA+50μmol·L^(-1)VA)和实验组(100μmol·L^(-1)PA+50μmol·L^(-1)VA+5 mmol·L^(-1)3-MA),作用时间24 h。用比色法检测细胞内三酰甘油(TG)的含量,用蛋白质印迹法检测脂滴包被蛋白3(Perilipin3)表达水平的变化。结果在探究VA诱导自噬的研究中,空白组、阳性对照组和低、中、高剂量实验组的LC3Ⅱ蛋白相对表达量分别为0.53±0.08,0.93±0.31,0.89±0.22,0.96±0.24和0.92±0.14,P62蛋白相对表达量分别为1.47±0.16,0.96±0.17,1.07±0.06,0.76±0.07和0.63±0.12;空白组的上述指标与中、高剂量实验组比较,差异均有统计学意义(均P0.05)。在探究VA对自噬流的影响中,空白组、对照A组、对照B组和实验组LC3Ⅱ蛋白相对表达量分别为0.40±0.12,0.87±0.14,0.67±0.07和1.13±0.11;实验组与对照A组、对照B组的上述指标和空白组比较,差异均有统计学意义(均P0.05)。在脂肪变性模型中,空白组、模型组、对照组和实验组细胞中TG相对含量分别为0.70±0.16,1.34±0.11,1.07±0.03和1.33±0.14,Perilipin3蛋白相对表达量分别为0.61±0.14,1.24±0.19,0.72±0.03和1.03±0.21;模型组的上述指标与空白组和对照组比较,或实验组的上述指标与对照组比较,差异均有统计学意义(均P0.05)。结论香草酸通过诱导自噬,从而缓解PA诱导的HepG2细胞脂肪变性。