黄精丸对学习记忆障碍小鼠的信号分子机制的影响

作     者：杨晶莹 肖移生 高萌 左爱仁 熊浩仲 姜劼琳 

作者机构：江西中医药大学 江西中医药大学中医学院 

出 版 物：《中国实验方剂学杂志》 (Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae)

年 卷 期：2021年

核心收录：

学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

基　　金：江西省卫生健康委2020年度科技计划项目（20203772) 2019年度江西省教育厅科技项目（GJJ190638) 2018年江西省卫生健康委中医药科研计划课题项目（2018B014） 江西省“双一流”学科（中医学）建设项目 

主　　题：RNA干扰 黄精丸 阿尔茨海默病 Wnt/β-catenin信号通路 

摘      要：目的：用侧脑室β-catenin RNA干扰（RNA interference, RNAi）黄精丸（Huangjingwan）治疗D-半乳糖联合东莨菪碱模拟的阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease, AD）小鼠，以探讨HW防治AD的神经保护信号分子机制。方法：81只雄性昆明小鼠随机分成（A） 正常对照组、（B） 假造模对照组、（C） AD模型组、（D） 多奈哌齐组、（E） 黄精丸+β-catenin/scrambled组（即β-catenin RNA干扰对照组）、（F）黄精丸+β-catenin/RNAi组、（G） 黄精丸组，D和G组每组小鼠8只，其余各组每组13只。连续5周采用D-半乳糖联合东莨菪碱注射法给后5组的各小鼠制作AD模型。造模后第4周第一天，给F组各小鼠右侧脑室一次性注射0.75μL聚乙烯亚胺（PEI-LMW）/β-catenin siRNAs纳米络合物以脑内β-catenin RNA干扰处理，E组各小鼠右侧脑室一次性注射0.75μL PEI-LMW/β-catenin crambled siRNAs络合复合物以作β-catenin干扰对照，B组各小鼠侧脑室内注射0.75μL生理盐水。侧脑室注射2周后，经确认小鼠β-catenin RNAi成功，再给D组小鼠灌胃多奈哌齐(6.5×10;g·kg;·d;)，给E、F、G组各小鼠灌胃黄精丸(2.5 g·kg;·d;)，持续4周。灌胃结束后，采用跳台实验评价各小鼠的学习记忆能力差异；尼氏染色计数各组小鼠大脑皮层S1Tr区及海马CA1、CA3区神经元数量差异；RT-qPCR检测各组小鼠大脑Wnt1、DVL2、GSK-3β、β-catenin、CyclinD1 mRNA表达水平变化；Western blot检测各组小鼠大脑Wnt1、DVL2、GSK-3β、β-catenin、CyclinD1蛋白表达水平变化。结果：①AD小鼠侧脑室内β-catenin RNAi可明显抑制其脑内β-catenin表达，可成功实现目的基因沉默。②与正常对照组比较，AD模型组小鼠学习与记忆成绩明显下降，跳台的错误次数增多（均P0.05），β-catenin、CyclinD1 mRNA及蛋白表达水平均明显下降（分别P0.01）。结论：黄精丸可通过激活Wnt/β-catenin信号通路转导发挥治疗AD作用。