龙胆苦苷通过ERK1/2介导的线粒体需氧呼吸障碍诱导结肠癌SW620细胞凋亡

作     者：张新春 屈海涛 程留慧 苑军正 安永康 

作者机构：河南中医药大学第三附属医院肛肠科 河南中医药大学第一附属医院肛肠病诊疗中心 河南中医药大学第一附属医院放射科 河南中医药大学第一附属医院普外二区 

出 版 物：《重庆医科大学学报》 (Journal of Chongqing Medical University)

年 卷 期：2021年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：河南省科技厅科技攻关资助项目(编号:162102310109) 

主　　题：龙胆苦苷 ERK1/2 线粒体需氧呼吸障碍 结肠癌 细胞凋亡 

摘      要：目的:研究龙胆苦苷(gentiopicroside,GP)对结肠癌SW620细胞凋亡的作用及机制。方法:将SW620细胞分为对照(Control)组,GP 10、20、40 mol/L组,顺铂(cisplatin,Cis)10 mol/L组,ERK1/2抑制剂(U0126)组,U0126+GP 40 mol/L组。按照分组,SW620细胞分别用GP 10、20、40 mol/L或Cis 10 mol/L或U0126 5 mol/L处理24 h。MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测胱天蛋白酶3、Bax/Bcl-2表达水平及ERK1/2蛋白磷酸化,Seahorse XF24细胞代谢分析仪检测线粒体呼吸,线粒体呼吸复合物Ⅲ试剂盒检测细胞线粒体呼吸复合物Ⅲ的相对活性,Cell Titer-Glo发光法检测细胞ATP水平。结果:GP对SW620细胞活力呈剂量依赖性抑制(P0.05,P0.01),IC50为GP 20 mol/L。GP明显增加SW620细胞凋亡率,明显上调活化的胱天蛋白酶3和Bax/Bcl-2蛋白表达水平,明显降低SW620细胞氧消耗率(oxygen consumption rate,OCR)、线粒体复合物Ⅲ活性、细胞ATP水平,明显下调SW620细胞ERK1/2磷酸化(P0.05,P0.01)。ERK1/2抑制剂U0126明显下调SW620细胞ERK1/2磷酸化水平、OCR、线粒体复合物Ⅲ活性、细胞ATP水平(P0.01),但GP并不能改变ERK1/2抑制剂U0126处理的SW620细胞OCR、线粒体复合物Ⅲ活性、细胞ATP水平。结论:龙胆苦苷通过ERK1/2介导的线粒体需氧呼吸障碍诱导结肠癌SW620细胞凋亡。