补肾化瘀生新方对缺血缺氧微环境下骨髓间充质干细胞生存率及凋亡率的影响

作     者：王诗琦 惠小珊 张金生 袁书章 薛珂 WANG Shi-qi;HUI Xiao-shan;ZHANG Jin-sheng;YUAN Shu-zhang;XUE Ke

作者机构：河南中医药大学郑州450046 中国中医科学院广安门医院北京100053 河南中医药大学第三附属医院郑州450008 

出 版 物：《中国中医基础医学杂志》 (JOURNAL OF BASIC CHINESE MEDICINE)

年 卷 期：2021年第27卷第8期

页      面：1259-1265页

学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

基　　金：河南科技发展计划(192102310158)-补肾化瘀生新方影响不同诱导微环境在延缓骨髓间充质干细胞衰老中的应用 河南省中医药研究专项课题(2017ZY2065)-药物后处理对大鼠脑缺血再灌注损伤后源性神经干细胞存活率和分化率的影响。 

主　　题：缺血缺氧微环境 补肾化瘀生新方 骨髓间充质干细胞 生存率 凋亡率 

摘      要：目的:观察补肾化瘀生新方对骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)在缺血缺氧微环境下生存率、凋亡率、活性氧水平的影响。方法:采用无血清的DMEM(dulbecco s modified eagle medium)培养基及低氧工作站,观察6 h、12 h、24 h、36 h、40 h、44 h、48 h、60 h 8个时间点各组BMSCs的生存率、凋亡率和氧化应激水平。CCK-8法检测细胞生存率(cell viability rate),流式细胞仪检测BMSCs凋亡率及细胞内ROS(reactive oxygen species)含量变化,倒置荧光显微镜观察胞内ROS荧光强度改变,以探究BMSCs缺血缺氧模型成功最佳时间点。继以补肾化瘀生新方含药血清干预BMSCs,测定其对缺血缺氧微环境的调控及细胞生存率、凋亡率的影响。结果:与正常组比较,缺血缺氧组随着时间增加生存率降低,凋亡率升高,40 h时BMSCs生存率最低、凋亡率最高(P0.05),胞内ROS荧光表达增强,60 h细胞大量死亡(P0.05);与缺血缺氧组比较,补肾化瘀生新方组BMSCs生存率明显提升,细胞凋亡率和胞内ROS表达下降(P0.05)。结论:BMSCs缺血缺氧模型建立成功的最佳时间点为40 h,补肾化瘀生新方可提高BMSCs在缺血缺氧微环境下的生存率,延缓细胞凋亡进程。