基于短小芽孢杆菌转录组的强启动子鉴定

作     者：姚动邦 张康 朱昫飏 吴敬 YAO Dongbang;ZHANG Kang;ZHU Xuyang;WU Jing

作者机构：食品科学与技术国家重点实验室(江南大学)江苏无锡214122 工业生物技术教育部重点实验室(江南大学)江苏无锡214122 

出 版 物：《食品与发酵工业》 (Food and Fermentation Industries)

年 卷 期：2021年第47卷第18期

页      面：15-22页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家重点研发项目(2019YFA0706900) 国家自然科学基金(31901633,31730067) 江苏省研究生培养创新工程(KYCX19_1837) 

主　　题：短小芽孢杆菌 α-淀粉酶 RNA测序 启动子 3 L罐发酵 

摘      要：短小芽孢杆菌(Brevibacillus choshinensis)是一种潜在的高效表达系统,但由于高效强启动子的缺乏严重限制了该表达系统的应用。该研究的主要目的是为***表达系统提供更多新高效强启动子。在该研究中,首先通过转录组测序技术获得***的转录组数据。然后基于基因的转录水平及功能,筛选高表达目的基因。基于筛选到的目的基因的启动子序列,以α-淀粉酶为报告蛋白构建了强启动子筛选文库。将含有不同启动子的重组菌摇瓶发酵后,以胞外α-淀粉酶活性为筛选指标,获得了内源性强启动子PE和PF,对应的重组菌BCWES和BCWFS胞外α-淀粉酶活性分别是常用的强启动子P2介导的对照菌BCWPS胞外α-淀粉酶活性的2.3和1.3倍。最后以蔗糖异构酶和角质酶为新的报告蛋白证明了PE启动子具有通用性,且经3 L罐发酵进一步验证了重组菌BCWES高分泌生产α-淀粉酶的能力。该研究丰富了可用于***表达系统的强启动子数量,促进了***作为一种新高效表达系统的开发与应用。