5/7型猪细小病毒双重PCR检测方法的建立

作     者：王茂鹏 王伟伟 李笨 李乐天 鲁会军 金宁一 韩硕 米志强 李昌 WANG Maopeng;WANG Weiwei;LI Ben;LI Letian;LU Huijun;JIN Ningyi;HAN Shuo;MI Zhiqiang;LI Chang

作者机构：温州大学病毒学研究所浙江温州325035 军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所中国医学科学院人兽共患病毒病防控关键技术研究创新单元吉林长春130122 辽宁省农业发展服务中心辽宁沈阳110031 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所北京100071 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2021年第41卷第8期

页      面：1458-1463页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(31802224) 国家重点研发计划资助项目(2017YFF0108605,2018YFC160025) 温州市基础科学研究资助项目(S2020010) 

主　　题：猪细小病毒5型 猪细小病毒7型 双重PCR 

摘      要：猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)是引起猪呼吸和繁殖障碍的重要病原体,感染比例逐年上升,现有PPV5和PPV7的检测效率低,故建立针对PPV5/7的多重检测方法,可增加样品利用率,提高检测效率。本研究根据2种病原的保守序列,设计特异性引物,通过对反应条件和体系优化,建立快速检测PPV5和PPV7双重PCR方法,并对该方法的灵敏性、特异性进行验证。结果显示,建立的双重PCR方法仅对PPV5、PPV7的基因组DNA有特异性扩增,对猫细小病毒(FPV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的核酸均无特异性扩增;对病原核酸混合模板的检出下限为10拷贝/μL,与单一PCR检测结果一致。本研究建立一种特异性强、敏感性高的多型PPV双重检测方法,为调查PPV5和PPV7在猪群中的感染情况提供快速检测方法。