兔骨髓间充质干细胞体外向肝样细胞的诱导分化

作     者：李德强 王人颢 

作者机构：江苏大学附属医院(徐州市第三人民医院)肝胆外科江苏省徐州市221000 徐州医学院附属医院肝胆外科江苏省徐州市221000 

出 版 物：《中国组织工程研究》 (Chinese Journal of Tissue Engineering Research)

年 卷 期：2012年第16卷第49期

页      面：9128-9133页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 071007[理学-遗传学] 

基　　金：徐州市科技局社会发展基金项目(XM09B093) 

主　　题：肝样细胞 骨髓间充质干细胞 肝细胞生长因子 表皮生长因子 肝硬化 干细胞 

摘      要：背景:研究表明,应用四氯化碳建造的重型肝衰竭小鼠模型中移植骨髓间充质干细胞后能够明显改善肝功能,促进肝再生。目的:观察骨髓间充质干细胞移植后动物模型肝功能及肝硬化程度等指标的变化情况。方法:采用密度梯度离心法和贴壁培养法获取兔骨髓间充质干细胞。取传代培养至3代的兔骨髓间充质干细胞,添加肝细胞生长因子和表皮生长因子,诱导21d后进行BrdU标记。建立肝硬化兔模型,实验组兔将收集的BrdU标记过的肝样细胞悬液注入门静脉,对照组注入相同体积生理盐水。细胞移植后21d麻醉下处死试验兔,观察肝硬化兔肝脏内分布及肝功能与对照组变化情况。结果与结论:兔骨髓间充质干细胞在体外经肝细胞生长因子、表皮生长因子的诱导条件下,于21d发现细胞呈类圆形,细胞染色显示,甲胎蛋白、血清白蛋白和糖原表达均呈阳性表达。肝样细胞经门静脉移植后,实验组兔肝生化指标与对照组相比较显著改善(P0.05)。BrdU免疫组织化学染色显示:在汇管区和肝索肝窦内均可见BrdU阳性细胞分布。说明兔骨髓间充质干细胞能够向肝样细胞分化,经门静脉移植诱导后的肝样细胞可以改善肝硬化兔的肝功能,促进兔肝细胞再生。