流式细胞术和LDH释放法检测NK细胞杀伤效能的实用性比较

作     者：阳莉 丘秀生 胡元 陈晓燕 陈伟材 卢建溪 Yang Li;Qiu Xiusheng;Hu Yuan;Chen Xiaoyan;Chen Weicai;Lu Jianxi

作者机构：中山大学附属第三医院生物治疗中心广州510000 中山大学附属第三医院疫苗研究所广州510000 东莞长安港湾医院内科东莞523000 

出 版 物：《中国组织化学与细胞化学杂志》 (Chinese Journal of Histochemistry and Cytochemistry)

年 卷 期：2021年第30卷第1期

页      面：27-32页

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

主　　题：流式细胞术 LDH释放法 自然杀伤细胞 细胞毒 

摘      要：目的流式细胞术和乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测自然杀伤细胞(natural killer cell,NK细胞)体外杀伤功能的比较和优化。方法以人外周血PBMCS经体外诱导扩增的NK细胞为效应细胞,K562细胞作为靶细胞,按5:1、10:1、20:1、40:1效靶细胞比共培养,分别采用LDH法和流式细胞术检测靶细胞死亡率。结果在4个效靶细胞比实验组中,5:1效靶细胞比条件下LDH释放法检测的靶细胞死亡率显著低于CFSE/PI标记法,其他3个效靶细胞比组的两种方法检测结果无显著性差异。高效靶比、细胞毒作用较强时,LDH释放法的结果误差较大,可重复性不强。结论流式细胞术和LDH释放法检测NK细胞体外杀伤效能的最佳效靶细胞比为10:1。流式细胞术比LDH法灵敏度更高,稳定性更好;在效靶细胞比为10:1的实验条件下,LDH法可作为流式细胞术的替代方法。