H因子结合蛋白单克隆抗体的制备及ELISA法含量检测初探

作     者：苏桂民 冀颖 纪国存 龙静 郭通 申卫家 张宇 朱卫华 杜琳 SU Gui-min;JI Ying;JI Guo-cun;LONG Jing;GUO Tong;SHEN Wei-jia;ZHANG Yu;ZHU Wei-hua;DU Lin

作者机构：北京市细菌性疫苗工程技术研究中心北京100176 北京智飞绿竹生物制药有限公司北京100176 

出 版 物：《中国新药杂志》 (Chinese Journal of New Drugs)

年 卷 期：2021年第30卷第10期

页      面：921-928页

核心收录：

学科分类：100702[医学-药剂学] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主　　题：H因子结合蛋白 单克隆抗体 ELISA B群脑膜炎球菌 

摘      要：目的:制备B群脑膜炎球菌H因子结合蛋白A(fHBP A)和H因子结合蛋白B(fHBP B)亚家族的单克隆抗体,建立检测fHBP抗原含量的ELISA方法。方法:重组表达并纯化fHBP A(His)和fHBP B(His)标签蛋白免疫小鼠,将小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,筛选3株稳定分泌抗fHBP单克隆抗体的细胞株A,B和AB。以抗AB为一抗,辣根过氧化物酶标记抗A、抗B为二抗,分别建立检测fHBP A和fHBP B的双抗夹心ELISA方法。结果:3种单抗效价均在4.4×10^(5)~8.8×10^(5),Western Blot及ELISA显示3种抗体均有结合特异性,且单抗AB和A,B对应不同的抗原识别位点,相互独立。双抗夹心ELISA方法灵敏度达到10 ng·mL^(-1),变异系数10%。结论:采用单克隆抗体检测fHBP抗原的ELISA方法特异性和适用性良好,为进一步建立快速灵敏检测和鉴定fHBP抗原的方法奠定了基础。