甘草酸对TGF-β1诱导的NRK-49F细胞活化及分泌细胞外基质的影响

作     者：邸黎明 张澜 申萌萌 贺双双 李彧 Di Liming;Zhang Lan;Shen Mengmeng;He Shuangshuang;Li Yu

作者机构：北京中医药大学中医学院北京100029 

出 版 物：《北京中医药大学学报》 (Journal of Beijing University of Traditional Chinese Medicine)

年 卷 期：2021年第44卷第5期

页      面：421-427页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.81573716) 北京中医药大学科研创新团队项目(No.2019-JYB-TD-006) 

主　　题：甘草酸 转化生长因子β1 Ⅰ型胶原 Ⅲ型胶原 α-平滑肌肌动蛋白 大鼠肾间质成纤维细胞 

摘      要：目的探讨甘草酸对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的大鼠肾间质成纤维细胞(NRK-49F)中纤维化相关因子表达的影响。方法体外培养NRK-49F细胞,不同浓度甘草酸干预细胞48 h后,CCK-8法检测其对细胞增殖的影响,确定对细胞活性无显著影响的作用浓度。以10μg/L TGF-β1刺激NRK-49F细胞构建肾间质纤维化细胞模型,加入不同浓度甘草酸进行干预,免疫荧光法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(COL1)表达情况。实时荧光定量PCR、Western Blot法检测纤维化相关因子α-SMA、COL1、Ⅲ型胶原(COL3)mRNA及蛋白表达情况,以评价甘草酸对成纤维细胞活化及细胞外基质分泌的影响。结果CCK-8结果显示甘草酸在100~600μmol/L浓度范围内对NRK-49F细胞活性无影响。免疫荧光结果表明,加入甘草酸后可抑制α-SMA表达及COL1分泌,随甘草酸浓度增加,抑制作用增强。Western Blot结果显示,与模型组相比,甘草酸干预可下调α-SMA、COL1、COL3的蛋白表达,其中甘草酸150μmol/L组COL1的蛋白表达水平降低(P0.01),甘草酸200μmol/L组COL1、COL3表达均降低(P0.01)。RT-PCR结果表明,与模型组相比,甘草酸干预可下调α-SMA、COL1、COL3表达,甘草酸150μmol/L组COL1 mRNA的表达水平降低(P0.01),甘草酸200μmol/L组COL1、COL3 mRNA表达均降低(P0.01)。结论甘草酸能够有效抑制TGF-β1诱导的NRK-49F细胞中α-SMA、COL1、COL3的mRNA及蛋白表达,其作用机制有待进一步探讨。