猪附红细胞体双抗体夹心ELISA检测方法的建立和应用

作     者：李月梅 金雪梅 张守发 许应天 闫可心 相思宇 薛书江 金东春 LI Yuemei;JIN Xuemei;ZHANG Shoufa;XU Yingtian;YAN Kexin;XIANG Siyu;XUE Shujiang;JIN Dongchun

作者机构：延边大学农学院延吉133002 长春市九台区职业技术教育中心九台130500 延边大学附属医院药学部延吉133000 

出 版 物：《中国动物传染病学报》 (Chinese Journal of Animal Infectious Diseases)

年 卷 期：2021年第29卷第3期

页      面：42-46页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(31460657) 吉林省教育厅“十三五”科学技术项目(JJKH20191134KJ) 

主　　题：猪附红细胞体 双抗体夹心ELISA 应用 

摘      要：为建立猪附红细胞体双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)检测方法,本研究以抗猪附红细胞体单克隆抗体为捕获抗体,兔抗猪附红细胞体多克隆抗体为检测抗体,优化工作条件,建立猪附红细胞体DAS-ELISA检测方法。结果显示:该方法的最佳工作条件为:捕获抗体包被浓度为5.42 g/mL,检测抗体浓度为6.84 g/mL,酶标二抗的稀释倍数为1∶2000;判定标准为:当检测样品OD4920.290为阳性;该方法与弓形虫、猪链球菌、猪肺炎支原体和猪繁殖与呼吸综合症病毒等常见猪病原微生物均无交叉反应,特异性好,敏感度可达3.25 mg/L,其重复性变异系数均小于10%;平行检测68份猪临床样品,DAS-ELISA检测的阳性率为29.4%,比血涂片染色镜检阳性率(19.1%)高10.3%。本研究所建立的猪附红细胞体DAS-ELISA检测方法可以作为猪附红细胞体的快速检测方法。