人肺腺癌细胞A549低温保存优化研究

作     者：杜羽琨 周新丽 DU Yukun;ZHOU Xinli

作者机构：上海理工大学医疗器械与食品学院上海200093 

出 版 物：《上海理工大学学报》 (Journal of University of Shanghai For Science and Technology)

年 卷 期：2021年第43卷第2期

页      面：156-162页

学科分类：080705[工学-制冷及低温工程] 08[工学] 0807[工学-动力工程及工程热物理] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(51376132) 

主　　题：非接触置核 低温保护剂 肺癌细胞 

摘      要：人肺腺癌A549细胞广泛用于体外肺癌发病基因筛查、药物筛选等临床研究,低温保存是保持样本库中的A549细胞高质量的有效方法。本文针对A549细胞低温保存方法,通过使用非接触置核慢速降温程序减小降温过程中溶液的过冷度,并在此基础上优化保护剂乙二醇(ethylene glycol,EG)、二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,Me_(2)SO)以及海藻糖的最佳浓度,通过检测复苏后肺腺癌细胞的回收率、细胞凋亡情况以及凋亡相关基因表达,对保存效果进行评估。实验结果表明,非接触置核慢速降温程序相比传统慢速降温程序可有效降低低温保护剂过冷度,并提高了细胞回收率。优化后最佳低温保护剂组合为7.5%(体积分数)Me_(2)SO+2.5%(体积分数)EG+200 mmol海藻糖,使用该保护剂低温保存复苏后的细胞回收率(91.59±1.51%)高于使用传统低温保护剂10%(体积分数)Me_(2)SO的细胞回收率(86.72±1.86%),而且正常细胞比例高,可以很好地抑制细胞凋亡。