甲醛固定石蜡包埋食管鳞状细胞癌组织蛋白提取方法的比较

作     者：焦叶林 赵云岗 刘其伟 阮豪杰 高社干 齐义军 JIAO Ye-lin;ZHAO Yun-gang;LIU Qi-wei;RUAN Hao-jie;GAO She-gan;QI Yi-jun

作者机构：河南科技大学医学院临床医学院第一附属医院肿瘤医院河南省肿瘤表观遗传重点实验室河南洛阳471003 洛阳市第一人民医院病理科河南洛阳471003 长治市妇幼保健院医学遗传科山西长治046011 许昌学院解剖学教研室河南许昌461000 

出 版 物：《解剖学报》 (Acta Anatomica Sinica)

年 卷 期：2021年第52卷第1期

页      面：141-145页

核心收录：

学科分类：10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81872037 U1604191)。 

主　　题：甲醛固定 石蜡包埋 蛋白提取 蛋白纯化 免疫印迹法 

摘      要：目的探讨从甲醛固定石蜡包埋(FFPE)食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中高效率提取蛋白质的方法。方法6种裂解液和100℃、105℃两种条件分别提取8例甲醛固定石蜡包埋食管鳞状细胞癌组织蛋白,Bradford法测定蛋白浓度、十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、Western blotting和免疫组织化学评价各方法提取组织蛋白的效率和质量,不同蛋白沉淀方法纯化提取蛋白。结果Laemmli裂解液(4号)100℃处理提取癌组织蛋白效率最高,Western blotting检测癌组织中14-3-3σ蛋白表达与免疫组织化学检测结果一致;2倍体积乙腈(含0.1%三氟乙酸)沉淀FFPE提取蛋白能够降低蛋白电泳背景。结论Laemmli裂解液100℃处理可高效提取的甲醛固定石蜡包埋组织蛋白且适用于Western blotting检测蛋白标志物分子,乙腈蛋白沉淀法能够进一步去除残余的交联蛋白质分子。