cAMP-PKA参与辐射诱导p27^(Kip1)蛋白的表达调控
Involvement of cAMP-PKA in regulation of p27^(Kip1) expression induced by ionizing radiation作者机构:北京放射医学研究所100850
出 版 物:《中华放射医学与防护杂志》 (Chinese Journal of Radiological Medicine and Protection)
年 卷 期:2004年第24卷第5期
页 面:393-395页
核心收录:
学科分类:1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 10[医学]
基 金:国家自然科学基金资助项目 ( 3 0 0 70 2 3 9 3 0 170 2 91)
主 题:p27^kip1蛋白 PKA 磷酸化 电离辐射诱导 表达调控 GSTS 特异性抑制剂 AMP IPTG 诱导表达
摘 要:目的 研究电离辐射反应中p2 7Kip1 表达调控机理。方法 将p2 7Kip1 蛋白编码全长基因克隆导入原核表达载体pGEX4T 2 ,经异丙基硫代 β D 半乳糖苷 (IPTG)诱导表达后再经GST Sephrose 4B柱亲和层析、纯化 ,获取的GST p2 7Kip1 融合蛋白作为磷酸化底物 ,并进行体外磷酸化检测。结果 PKA具有磷酸化p2 7Kip1 蛋白的功能 ,该反应能被PKA的特异性抑制剂H89所抑制 ;照射后细胞内源性的PKA对p2 7Kip1 的磷酸化程度减弱。结论 cAMP PKA在电离辐射诱导细胞周期检查点蛋白p2 7Kip1