Lmo4基因对骨髓间充质干细胞成骨分化的调控作用

作     者：姜娜娜 曹怡玮 陈园杏 徐书琴 王富华 凌世烽 张伟 刘培 夏学春 郭熙志 Jiang Nana;Cao Yiwei;Chen Yuanxing;Xu Shuqin;Wang Fuhua;Ling Shifeng;Zhang Wei;Liu Pei;Xia Xuechun;Guo Xizhi

作者机构：上海交通大学生命科学技术学院上海200240 

出 版 物：《基因组学与应用生物学》 (Genomics and Applied Biology)

年 卷 期：2020年第39卷第11期

页      面：5326-5332页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 10[医学] 

基　　金：国家自然基金重点项目培育项目(91749103) 国家973重大科学研究计划项目(2014CB942902)共同资助 

主　　题：Lmo4 骨髓间充质干细胞 成骨分化 CRISPR/Cas9 

摘      要：为了探讨Lmo4基因对骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的调控作用。转录调节因子Lmo4与细胞的成骨分化有着密切的联系,本实验通过包装靶向Lmo4的sg RNA慢病毒转染表达Cas9蛋白的骨髓间充质干细胞,运用CRISPR/Cas9技术敲除Lmo4,同时设置sg RNA空载体病毒作为阴性对照;包装Lmo4的pMSCV逆转录病毒转染野生型骨髓间充质干细胞,过表达Lmo4,同时以pMSCV空载体病毒作为阴性对照。对病毒转染后的细胞进行成骨诱导分化,采用碱性磷酸酶染色和茜素红S染色两种方法对各组细胞进行染色,并运用实时荧光定量PCR技术对细胞的Lmo4基因,以及成骨分化相关基因Runx2、ALP、Col1a1、Osteocalcin的表达水平进行定量分析,比较各组细胞成骨能力的差异。结果显示,Lmo4敲除组与对照组相比,两种染色明显加深,Lmo4的表达量明显下降,成骨分化相关基因Runx2、ALP、Col1a1、Osteocalcin的表达量明显上升。相反,Lmo4过表达的细胞与对照组相比,两种染色明显变浅,Lmo4的表达量明显上升,成骨分化相关基因的表达量明显下降。说明Lmo4能够抑制骨髓间充质干细胞的成骨分化。本研究发现了一个新的骨发育与分化的调控因子。