非洲猪瘟病毒p35蛋白作为诊断抗原的抗原性比较

作     者：施磊 田占成 杨吉飞 高闪电 独军政 赵亚茹 刘志杰 关贵全 刘光远 罗建勋 殷宏 Lei Shi;Zhancheng Tian;Jifei Yang;Shandian Gao;Junzheng Du;Yaru Zhao;ZhijieLiu;Guiquan Guan;Guangyuan Liu;Jianxun Luo;Hong Yin

作者机构：中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 

出 版 物：《生物工程学报》 (Chinese Journal of Biotechnology)

年 卷 期：2021年第37卷第1期

页      面：187-195页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 090601[农学-基础兽医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 0836[工学-生物工程] 

基　　金：甘肃省重点研发计划(No.18YF1WA131) 中国农业科学院农业科技创新工程项目(No.CAAS-ASTIP-2016-LVRI) 中国农业科学院基本科研业务费专项(No.Y2019YJ07-02)资助 

主　　题：非洲猪瘟病毒 p35蛋白 p30蛋白 抗原性 间接ELISA 

摘      要：为了筛选出酶联免疫吸附测定(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)反应性最佳的非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)诊断抗原,通过建立ELISA方法,以杆状病毒昆虫细胞表达系统表达的ASFV p30蛋白诊断抗原为参照,首次探讨原核表达系统表达的ASFVp35蛋白作为诊断抗原的抗原性和潜力。免疫印迹和免疫荧光结果表明,获得了40 kDa的重组p35蛋白和30 kDa的p30蛋白,两种蛋白与ASFV阳性血清均具有较好的免疫反应原性。采用重组p30和p35蛋白作为诊断抗原分别建立ELISA方法,并验证其敏感性、稳定性以及与进口试剂盒的符合率。结果显示,尽管p35-ELISA方法的检测敏感性稍低于p30-ELISA方法,但其敏感性仍可达95.8%,且p35-ELISA方法和p30-ELISA方法的批内和批间变异系数均小于10%。p35-ELISA方法与进口试剂盒比较,符合率达97.2%。结果表明建立的p35-ELISA方法敏感性高且稳定性好,可应用于ASFV感染血清的检测。