血府逐瘀汤通过影响BMP9表达抑制Notch信号通路调节髓核细胞增殖的机制

作     者：郭义 林俊 

作者机构：萍乡市中医院骨科江西萍乡337000 

出 版 物：《中国老年学杂志》 (Chinese Journal of Gerontology)

年 卷 期：2021年第41卷第2期

页      面：365-368页

学科分类：1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 100401[医学-流行病与卫生统计学] 10[医学] 

基　　金：江西省卫生计生委中医药科研课题(2018A280)。 

主　　题：血府逐瘀汤 BMP 髓核细胞 Notch信号通路 病毒转染 

摘      要：目的探讨血府逐瘀汤通过影响骨形态发生蛋白(BMP)9表达抑制Notch信号通路调节髓核细胞增殖的机制。方法雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠(6~8周龄,体重190~220 g),并随机分为3组:对照组(正常饲养的大鼠,n=12)。诱导模型组(椎间盘退变诱导,通过腹膜内注射10%水合氯醛给大鼠施用麻醉然后将它们置于具有固定肢体的俯卧位。使用脱毛剂制备背部皮肤上4 cm×8 cm的区域。然后将灭菌的覆盖片放在大鼠上,沿着后腰的棘突切割中线切口。切割皮肤后,进行骨膜下剥离以充分暴露棘突,关节突和椎板。咬骨钳用于去除棘突,关节突,棘上韧带和棘突间韧带。双侧竖脊肌切开。然后将皮下筋膜和皮肤逐层缝合回来,n=24),血府逐瘀汤组(在诱导模型组的12只大鼠中,腹腔注射50 mg/kg血府逐瘀汤,连续注射3 w,n=12)。通过电子显微镜(EM)检查各组大鼠椎间盘组织;通过qRT-RCR检测各组培养细胞中BMP9、Notch信号通路相关因子的mRNA相对表达;通过Western印迹检测髓核细胞中细胞外基质(ECM)蛋白的表达;通过CCK8测定不同组髓核细胞的增殖影响;通过TUNEL检测髓核细胞的凋亡情况。结果诱导模型组与对照组相比BMP9 mRNA表达低。与诱导模型组相比血府逐瘀汤组BMP9 mRNA表达明显升高(P0.05)。诱导模型组与对照组相比,髓核细胞的含量明显降低。而血府逐瘀汤组较诱导模型组髓核细胞的含量明显升高(P0.05)。BMP9抑制转染组较培养细胞组,Notch信号通路相关因子Notch1、DLL1 mRNA表达明显升高,BMP9 mRNA表达明显降低(P0.05)。BMP9抑制转染组较培养细胞组细胞凋亡率明显升高,细胞活力明显下降(P0.05),BMP9转染组较BMP9抑制转染组凋亡率明显下降,细胞活力明显升高(P0.05)。结论血府逐瘀汤通过影响BMP9表达抑制Notch信号通路调节髓核细胞增殖。