硝酸镧诱导SK-N-SH细胞氧化应激和自噬的作用

作     者：来丽叶 智翠娜 傅娟玲 赵鹏 姚碧云 LAI Li-ye;ZHI Cui-na;FU Juan-ling;ZHAO Peng;YAO Bi-yun

作者机构：北京大学公共卫生学院毒理学系食品安全毒理学研究与评价北京市重点实验室北京100191 

出 版 物：《中国药理学与毒理学杂志》 (Chinese Journal of Pharmacology and Toxicology)

年 卷 期：2020年第34卷第10期

页      面：750-755页

学科分类：100405[医学-卫生毒理学] 1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基　　金：国家重点研发计划(2017YFC1600203) 

主　　题：硝酸镧 SK-N-SH细胞 氧化应激 线粒体膜电位 自噬 

摘      要：目的研究硝酸镧〔La(NO3)3〕在引起人神经母细胞瘤(SK-N-SH)细胞毒性中氧化应激和自噬的作用机制。方法 La(NO3)30.125,0.25,0.5,1.0,2.0和4.0 mmol·L^-1处理SK-N-SH细胞24 h,MTT法检测细胞存活率。La(NO3)3 0.5,1.0和2.0 mmol·L^-1处理细胞24 h,流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)含量和线粒体膜电位,激光共聚焦显微镜检测细胞自噬体数量,Western印迹法检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ/Ⅰ比值,P62,Parkin和PTEN诱导假定激酶1(PINK1)蛋白表达水平。结果 MTT结果显示,与细胞对照组相比,La(NO3)3≤0.5 mmol·L^-1对细胞存活率无显著影响,La(NO3)31.0,2.0和4.0 mmol·L^-1组细胞存活率均显著降低(P0.05,P0.01)。流式细胞术结果显示,与细胞对照组相比,La(NO_3)_30.5 mmol·L^-1组细胞ROS含量无明显差异,La(NO3)31.0和2.0 mmol·L^-1组细胞ROS含量均显著升高(P0.05,P0.01),La(NO3)30.5,1.0和2.0 mmol·L^-1组线粒体膜电位均显著降低(P0.05,P0.01)。激光共聚焦结果显示,与细胞对照组相比,La(NO3)30.5,1.0和2.0 mmol·L^-1组细胞自噬体数量均显著增加(P0.05,P0.01)。Western印迹结果显示,与细胞对照组相比,La(NO3)30.5,1.0和2.0 mmol·L^-1组LC3-Ⅱ/Ⅰ比值、Parkin和PINK1蛋白表达均显著升高(P0.05),P62蛋白表达均显著降低(P0.05)。结论La(NO3)3可诱导SK-N-SH细胞发生氧化应激、线粒体功能障碍,同时可诱导SK-N-SH细胞产生细胞自噬和线粒体自噬。