荧光定量PCR测定粗品肝素钠DNA提取液中反刍基因及猪基因的浓度
Determination of Concentration of Ruminant Gene and Porcine Gene in DNA Extract of Crude Heparin Sodium by Fluorescence Quantitative PCR作者机构:华北制药集团新药研究开发有限责任公司微生物药物国家工程研究中心河北省工业微生物药物代谢工程技术中心河北石家庄050015 华北制药华坤河北生物技术有限公司河北石家庄050000
出 版 物:《化学与生物工程》 (Chemistry & Bioengineering)
年 卷 期:2021年第38卷第1期
页 面:65-68页
学科分类:1010[医学-医学技术(可授医学、理学学位)] 10[医学]
摘 要:采用细胞裂解和蛋白酶K消化技术,结合DNA制备柱选择性吸附DNA的方法提取粗品肝素钠中的动物DNA,将DNA标准溶液、粗品肝素钠DNA提取液分别与相应的PCR试剂混合,进行PCR扩增,测定粗品肝素钠DNA提取液中反刍基因及猪基因浓度。结果表明,反刍基因浓度在0.01~1000 pg·μL-1范围内线性关系良好,猪基因浓度在0.1~10000 pg·μL-1范围内线性关系良好。该方法具有良好的专属性、准确度、精密度,适用于粗品肝素钠动物来源的种属鉴别。