兔骨髓间充质干细胞的生物学特征及原代培养

作     者：杨俊丽 韩霞 孙明启 李云霞 Yang Jun-li;Han Xia;Sun Ming-qi;Li Yun-xia

作者机构：内蒙古医科大学附属医院保健所内蒙古自治区呼和浩特市010000 内蒙古医科大学附属医院干细胞实验室内蒙古自治区呼和浩特市010000 内蒙古医科大学第二附属医院创伤科内蒙古自治区呼和浩特市010000 

出 版 物：《中国组织工程研究》 (Chinese Journal of Tissue Engineering Research)

年 卷 期：2015年第19卷第50期

页      面：8043-8047页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 071007[理学-遗传学] 

基　　金：内蒙古医科大学青年创新基金(YKD2014QNCX014) 

主　　题：间充质干细胞 细胞分离 细胞培养技术 组织工程 干细胞 骨髓干细胞 骨髓间充质干细胞 细胞培养 原代培养 生物学特征 表面标志物 兔 

摘      要：背景:兔来源的骨髓间充质干细胞是具有较强的体外增殖和多系统分化潜能的成体干细胞,在组织工程及生物治疗领域蕴藏着巨大的潜能。目的:体外培养扩增、鉴定兔骨髓间充质干细胞,观察骨髓间充质干细胞的生物学特征。方法:无菌条件下抽取兔骨髓,分别运用全骨髓贴壁法和Percoll密度梯度离心法体外分离骨髓间充质干细胞,利用差速贴壁原理对细胞进行纯化扩增。在显微镜下观察细胞形态特征及生长规律,流式细胞技术检测细胞表面抗原标记物的表达。结果与结论:兔骨髓间充质干细胞贴壁时间短,增殖快,经过细胞传代后能够获得进一步纯化的细胞,杂质细胞减少。原代细胞形态即呈现三角形、长梭形、纺锤形的贴壁细胞特征。第5代骨髓间充质干细胞呈典型的极性漩涡状生长,形态单一均匀,不具有表达造血前体细胞表面标志抗原CD34和白细胞表面标志抗原CD45的表面标记物功能,但是具有能够表达出整合素家族的成员CD29及黏附分子CD44的特点。说明经全骨髓贴壁法和Percoll密度梯度离心法体体外分离培养的细胞在形态学、细胞表面标志物表达和多向分化能力方面具有干细胞生物学特性,经流式细胞分析鉴定为兔骨髓间充质干细胞。