嗜水气单胞菌LAMP的快速检测方法研究

作     者：喻蔚 周颖 周有祥 林蠡 周洋 YU Wei;ZHOU Ying;ZHOU You-xiang;LIN Li;ZHOU Yang

作者机构：华中农业大学水产学院武汉430070 华中农业大学食品科技学院武汉430070 湖北省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所武汉430064 

出 版 物：《湖北农业科学》 (Hubei Agricultural Sciences)

年 卷 期：2015年第54卷第20期

页      面：5125-5128页

学科分类：0908[农学-水产] 09[农学] 

基　　金：国家自然科学基金青年项目(31402341) 博士后科学基金面上项目(2014M550400) 淡水生态与生物技术国家重点实验室开放基金项目(2015FB05) 珠江所农业部渔用药物创制重点实验室开放基金项目(201306) 

主　　题：嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila) 环介导等温扩增技术(LAMP) tbp A基因 快速检测 

摘      要：利用环介导等温扩增技术(LAMP)建立了一种对嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)进行快速检测的方法。基于嗜水气单胞菌tbp A基因,设计了一套引物,并优化了反应体系的温度、时间和Mg2+浓度,分析了该方法的特异性与灵敏度。结果表明,在59℃条件下,LAMP的最适扩增时间为40 min,能有效检测到1 pg/μL核酸浓度,且检测出嗜水气单胞菌为阳性,其他菌株为阴性,该方法耗时短,灵敏度高,特异性好,适合嗜水气单胞菌的快速检测。