miRNA-499a-5p靶向CD38对过氧化氢诱导的心肌细胞损伤的影响及其机制研究

作     者：孙蓓 马萍萍 赵岚 徐辉 鲍金伟 Sun Bei;Ma Pingping;Zhao Lan;Xu Hui;Bao Jinwei

作者机构：烟台市烟台山医院心血管内科264000 

出 版 物：《中华微生物学和免疫学杂志》 (Chinese Journal of Microbiology and Immunology)

年 卷 期：2020年第40卷第11期

页      面：838-843页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

主　　题：miRNA-499a-5p CD38基因 H2O2 心肌细胞损伤 

摘      要：目的探讨miRNA-499a-5p靶向CD38对过氧化氢(H2O2)诱导的心肌细胞损伤的影响及作用机制。方法体外培养H9c2心肌细胞,采用H2O2诱导心肌细胞损伤模型。实验分为对照组、H2O2组、H2O2+阴性对照(NC)组和H2O2+miRNA-499a-5p组。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)法分别检测心肌细胞中miRNA-499a-5p和CD38的表达,噻唑蓝(MTT)法检测心肌细胞存活率,试剂盒检测活性氧簇(ROS)水平和乳酸脱氢酶(LDH)活性,Annexin V-FITC/PI双染法检测心肌细胞凋亡率,Western blot检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、磷酸肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(Akt)和磷酸化Akt(p-Akt)的表达量。双荧光素酶报告基因试验检测miRNA-499a-5p和CD38的靶向关系。结果H2O2组心肌细胞中miRNA-499a-5p、Bcl-2、p-PI3K、p-Akt的表达水平及心肌细胞存活率与对照组相比均明显降低(P0.05),而CD38和Bax的表达水平、ROS水平、LDH活性及细胞凋亡率均明显升高(P0.05)。H2O2+miRNA-499a-5p组心肌细胞中miRNA-499a-5p、Bcl-2、p-PI3K、p-Akt的表达水平及心肌细胞存活率与H2O2组相比均明显升高(P0.05),而CD38和Bax的表达水平、ROS水平、LDH活性及细胞凋亡率均明显降低(P0.05)。双荧光素酶报告基因试验证实了CD38是miRNA-499a-5p的靶基因。结论miRNA-499a-5p能够通过抑制CD38的表达减轻H2O2诱导的心肌细胞损伤,该作用机制可能与PI3K/Akt信号通路有关。