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NF-kB与Slug在非小细胞肺癌中的表达及其在上皮间质转化中的作用

NF-kB与Slug在非小细胞肺癌中的表达及其在上皮间质转化中的作用

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作者：徐沙沙青岛大学

学位级别：硕士

目的：研究核因子NF-kB与锌指蛋白因子Slug在非小细胞肺癌（NSCLC）及癌旁相应正常肺组织中的表达并探讨其与肺癌上皮间质转化（EMT）的关系,为寻找非小细胞肺癌的分子治疗靶点提供理论基础。方法：（1）采用免疫组织化学PV9000二... 详细信息

目的：研究核因子NF-kB与锌指蛋白因子Slug在非小细胞肺癌（NSCLC）及癌旁相应正常肺组织中的表达并探讨其与肺癌上皮间质转化（EMT）的关系,为寻找非小细胞肺癌的分子治疗靶点提供理论基础。方法：（1）采用免疫组织化学PV9000二步法测定50例NSCLC及相应20例癌旁正常肺组织中NF-kBP65、slug、E-cadherin及Vimentin蛋白表达情况。（2）采用逆转录聚合酶链反应法（RT-PCR）测定其中新鲜的25例NSCLC及10例癌旁相应正常肺组织中NF-kBP65、slug的mRNA表达。结果：（1）免疫组织化学结果：NF-kBP65蛋白在NSCLC组织中阳性表达率78%（39/50）及阳性强度分别明显高于癌旁正常肺组织中的阳性表达率20%（4/20）及阳性强度（χ2=20.28,P＜0.01;Z=-2.370,P＜0.05）;Slug蛋白在NSCLC组织中阳性表达率82%（41/50）及阳性强度亦分别明显高于癌旁相应正常肺组织的阳性表达率30%（6/20）及阳性强度（χ2=17.51,P＜0.01;Z=-4.443,P＜0.01）;50例NSCLC组织中,NF-kBP65阳性癌组织中E-cadherin蛋白阳性表达率（17/39,43.6%）明显低于NF-kBP65阴性癌组织中E-cadherin蛋白阳性表达率（9/11,81.8%）,差异有统计学意义（Z=5.024,P＜0.05）;50例NSCLC组织中,NF-kBP65阳性癌组织中Vimentin蛋白阳性表达率（25/39,64.1%）明显高于NF-kBP65阴性癌组织Vimentin蛋白阳性表达率（3/11,27.3%）,差异有统计学意义（Z=4.723,P＜0.05）。NSCLC组织中,Slug性癌组织中E-cadherin蛋白阳性表达率（18/41,43.9%）明显低于Slug阴性癌组织中E-cadherin蛋白阳性表达率（8/9,88.9%）,差异有统计学意义（χ=5.984,P＜0.05）;Slug阳性癌组织中Vimentin蛋白阳性表达率（26/41,63.4%）明显高于Slug阴性癌组织中Vimentin阳性表达率（2/9,22.2%）,差异有统计学意义（#=5.028,P＜0.05）。另外,NSCLC组织中,NF-kB在高中分化组的阳性表达率明显低于低分化组的阳性表达率（χ2=5.024,P＜0.05）,在淋巴结无转移组的阳性表达率明显低于淋巴结有转移组的阳性表达率（）c2=7.933,P＜0.01),在Ⅰ-Ⅱ期阳性表达率明显低于Ⅲ-Ⅳ期阳性表达率（χ2=5.614,P＜0.05）,NF-kB与性别、年龄、组织类型均无明显相关性（P＞0.05）;Slug在淋巴结无转移组的阳性表达率明显低于淋巴结有转移组的阳性表达率（χ2=6.174,P＜0.05）,在Ⅰ-Ⅱ期阳性表达率明显低于Ⅲ-Ⅳ期阳性表达率（χ2=7.317,P＜0.01）,Slug与性别、年龄、组织类型、分化程度均无明显相关性（P＞0.05）。NF-kBP65蛋白与Slug蛋白呈极显著正相关性（r=0.443,P＜0.01）。（2）RT-PCR 结果：NF-kBP65mRNA及SlugmRNA在NSCLC组织中的表达量均明显高于癌旁相应正常肺组织（t=4.967,6.483;P＜0.01）;两者表达量亦呈显著正相关性（r=0.439,P＜0.05）。结论：NF-kB及Slug可能均与NSCLC的发生、进展及转移关系密切;NF-kB阳性癌组织中E-cadherin表达降低,Vimentin表达升高,说明NF-kB能够抑制E-cadherin的表达,促进Vimentin的表达,在NSCLC的EMT中发挥重要作用;Slug阳性癌组织中E-cadherin表达降低,Vimentin表达升高,提示Slug同样能够抑制E-cadherin的表达,促进Vimentin的表达,在NSCLC的EMT中发挥重要作用;NF-kB与Slug在基因及蛋白水平表达均呈显著正相关性,提示NF-kB和Slug可能协同促进NSCLC的发生,协同抑制E-cadherin的表达、促进Vimentin的表达,共同诱使NSCLC的EMT发生,从而为进一步研究NSCLC的EMT提供理论依据。

关键词： NF-kB Slug 上皮间质转化 NSCLC

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非小细胞肺癌上皮间质转化与化疗耐药性的相关性探讨

非小细胞肺癌上皮间质转化与化疗耐药性的相关性探讨

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作者：李敏青岛大学

学位级别：硕士

目的：体外实验发现肿瘤细胞多药耐药现象与上皮-间质转化密切相关,本研究通过观察非小细胞肺癌组织中上皮间质转化与肿瘤细胞耐药蛋自表达情况,从组织学角度探讨非小细胞肺癌化疗耐药性与上皮间质转化之间的关系。方法：收集非小细胞... 详细信息

目的：体外实验发现肿瘤细胞多药耐药现象与上皮-间质转化密切相关,本研究通过观察非小细胞肺癌组织中上皮间质转化与肿瘤细胞耐药蛋自表达情况,从组织学角度探讨非小细胞肺癌化疗耐药性与上皮间质转化之间的关系。方法：收集非小细胞肺癌新辅助化疗后手术标本和单纯手术后标本各40例,采用免疫组织化学方法检测各组标本中耐药蛋白-ERCC1,以及上皮间质转化标记物E-cadherin和(?)vimentin的表达情况,同时制作连续切片观察相同区域内的周边癌组织上述抗体的表达情况。结果：新辅助化疗组vimentin和(?) ERCCI的表达呈显著性正相关(r=0.482,P0.05)。新辅助化疗组和单纯手术组中低分化癌ERCCI及vimentin的表达强度均高于中分化癌,淋巴结有转移者均高于淋巴结无转移者,差异均有统计学意义(Z=-2.242～-2.031,P<0.05),而E-cadherin表达强度在中分化癌或无淋巴结转移者均高于低分化癌或有淋巴结转移者,其差异具有统计学意义(Z=-2.283～-1.976,P<0.05);连续切片免疫组化染色显示：E-cadherin表达减少或消失的癌细胞巢区,vimentin的表达多相应增多或增强,而ERCCI的表达也多有不同程度增多或增强。结论：1.新辅助化疗组及单纯手术组vimentin和ERCCI二者表达呈正相关,E-cadherin和ERCCI二者表达呈负相关,提示EMI与肺癌细胞的耐药性有关;2.连续切片免疫组化染色显示E-cadherin表达减少或消失的癌细胞巢区,vimentin的表达多相应增多或增强,而ERCCI的表达也多有不同程度增多或增强,进一步提示EMT与肺癌细胞的耐药性有内在联系;3E-cadherin、vimentin不(?) ERCCI (?)勺表达强度与肺癌细胞分化程度及有无淋巴结转移有关,提示可作为预后评估的参考指标。

关键词：癌非小细胞肺上皮间质转化化学疗法耐药性

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KIF3A在人胃腺癌中的表达及其对细胞转移能力影响的体外实验研究

KIF3A在人胃腺癌中的表达及其对细胞转移能力影响的体外实验研究

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作者：李海艳青岛大学

学位级别：硕士

目的检测KIF3A蛋白在不同病变胃组织中的表达,并分析其与进展期胃腺癌患者临床病理特征及术后生存时间的关系;检测KIF3A对体外培养的胃腺癌细胞迁移侵袭和增殖能力的影响,初步探讨KIF3A对胃腺癌发生、发展及预后的意义。方法应用免疫组... 详细信息

目的检测KIF3A蛋白在不同病变胃组织中的表达,并分析其与进展期胃腺癌患者临床病理特征及术后生存时间的关系;检测KIF3A对体外培养的胃腺癌细胞迁移侵袭和增殖能力的影响,初步探讨KIF3A对胃腺癌发生、发展及预后的意义。方法应用免疫组织化学技术检测118对胃腺癌组织及其癌旁非瘤组织、其中的39例进展期胃腺癌相应淋巴结转移组织、12例低级别上皮内瘤变、12例高级别上皮内瘤变组织中KIF3A的表达水平,分析KIF3A的表达水平与胃腺癌的发生、进展期胃腺癌患者临床病理特征及预后的关系;应用Western blot检测16对新鲜胃腺癌组织及其癌旁非瘤组织中KIF3A的表达水平并比较表达差异;构建慢病毒载体HBLV-h-sh KIF3A,沉默胃腺癌细胞SGC-7901,BGC-823,MGC-803中KIF3A的表达,光学显微镜观察KIF3A对胃腺癌细胞形态的影响,划痕实验及Transwell迁移侵袭实验检测KIF3A对胃腺癌细胞迁移侵袭能力的影响,MTT及平板克隆形成实验检测KIF3A对胃腺癌细胞增殖能力的影响;应用Western blot检测E-cadherin、vimentin、MMP2、MMP9及PCNA表达水平的变化。结果Western blot示新鲜胃腺癌组织中KIF3A蛋白表达水平升高(P0.05)。结论KIF3A可能与胃腺癌的发生有关,并可以促进胃腺癌的侵袭转移;KIF3A可作为判断胃腺癌患者预后的新的潜在标记物;沉默KIF3A的表达在体外可抑制胃腺癌细胞的迁移侵袭和增殖能力,并可能通过调控MMP9、MMP2的表达影响胃腺癌细胞的迁移侵袭能力,而对上皮-间质转化过程可能没有明显作用,促增殖机制尚待今后进一步深入研究。

关键词： KIF3A 胃腺癌预后转移增殖

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FHIT、Survivin基因在胃癌中的表达及其与幽门螺杆菌感染的关系

FHIT、Survivin基因在胃癌中的表达及其与幽门螺杆菌感染的关系

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作者：朱淑珍青岛大学

学位级别：硕士

目的:探讨FHIT、Survivin mRNA及相应蛋白在胃癌组织中的表达及其与临床病理参数的关系,同时分析两者与幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)感染的关系。方法:应用免疫组化和RT-PCR方法分别检测62例胃癌、癌旁及远癌组织中FHIT、Survivi... 详细信息

目的:探讨FHIT、Survivin mRNA及相应蛋白在胃癌组织中的表达及其与临床病理参数的关系,同时分析两者与幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)感染的关系。方法:应用免疫组化和RT-PCR方法分别检测62例胃癌、癌旁及远癌组织中FHIT、Survivin蛋白及mRNA的表达情况,应用硼酸亚甲蓝染色法检测HP。结果:(1)免疫组化及RT-PCR结果均显示,FHIT在胃癌、癌旁及远癌组织中的表达均有显著性差异(q=2.994～9.176,P＜0.05),其在上述三组中的表达逐渐增强;FHIT在胃癌组织中的表达均与肿瘤的大小、浸润深度、TNM分期及淋巴结转移有关(Z/t=-3.460～5.725,P均＜0.05)。(2)免疫组化及RT-PCR结果均显示,Survivin在胃癌组中呈高表达,癌旁组织中表达较弱,而远癌组织中未发现Survivin表达,经两两比较分析显示,Survivin在三组中的表达均有显著性差异(q=3.212～16.881,P＜0.05);Survivin在胃癌组织中的表达均与肿瘤的浸润深度、TNM分期及淋巴结转移有关(Z/t=-6.457～3.798,P均＜0.05)。(3)胃癌组织中FHIT与Survivin在mRNA和蛋白水平的表达均呈极显著性负相关(r=-0.557、-0.484,P均＜0.01)。(4)胃癌组织中FHIT与Survivin在mRNA和蛋白水平上的表达均与HP感染相关(r=-0.553～0.393,P均＜0.05),伴随HP感染程度的加重,FHIT表达逐渐减弱,而Survivin表达逐渐增强;癌旁组织中的FHIT mRNA表达亦与HP感染有关(r=-0.295,P＜0.05);Survivin在癌旁及远癌组织中的表达均与HP感染无相关性(r=-0.234～1,P均＜0.05)。结论:(1)胃癌组织中FHIT表达缺失或下降,而Survivin呈高表达,提示两者均与胃癌的发生有关。(2)FHIT与Survivin的表达均与胃癌的浸润深度、TNM分期及淋巴结转移有关,提示两者在胃癌的演化进展中发挥一定的作用。(3)胃癌组织中FHIT与Survivin的表达呈负相关,提示两者在胃癌的发生发展中可能具有拮抗作用。(4)HP感染可能参与了胃癌组织中FHIT、Survivin的异常表达。

关键词：胃癌 FHIT Survivin 幽门螺杆菌免疫组织化学逆转录聚合酶链反应

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肺癌VEGF、MMP2的表达与临床病理的关系

肺癌VEGF、MMP2的表达与临床病理的关系

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作者：孙迪文青岛大学

学位级别：硕士

目的：探讨血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor，VEGF)、基质金属蛋白酶Ⅱ(matrix metalloproteinase Ⅱ，MMP)在肺癌中的表达与临床病理的关系。方法：应用75例经手术切除并具有完整随访记录的人体肺癌标本(术前均... 详细信息

目的：探讨血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor，VEGF)、基质金属蛋白酶Ⅱ(matrix metalloproteinase Ⅱ，MMP)在肺癌中的表达与临床病理的关系。方法：应用75例经手术切除并具有完整随访记录的人体肺癌标本(术前均未行放、化疗)，采用免疫组化PowerVision-PV9000法检测VEGF、MMP的表达。结果：1．46例肺癌组织中VEGF呈阳性表达(低级28例，高级18例)。阳性率为61.33％。VEGF的表达强度与肺癌细胞分化程度有关(x=17.019，P=0.000)：随组织学分级的降低，其阳性表达强度增加;低分化组(Ⅲ级)、中分化组(Ⅱ级)及高分化组(Ⅰ级)间的差异均具有显著性意义(Ⅰ、Ⅱ级，Ⅱ、Ⅲ级，Ⅲ、Ⅰ级：P=0.038，0.001，0.000)。VEGF的表达增强亦与肺癌易发生淋巴结转移、预后不良有关。淋巴结有转移组的表达强度显著高于淋巴结无转移组(Z=3.319，P=0.001);年内死亡(X≤1年)组及1至5年(1年＜X＜5年=组VEGF的表达强度显著高于5年生存(X≥5年)组(P=0.000，0.001)。VEGF在肺癌组织中的表达与病人年龄、性别、原发瘤大小及组织病理类型均无关。2．49例肺癌组织中MMP呈阳性表达(弱阳性28例，强阳性21例)，阳性率为65.33％。MMP的表达强度与肺癌细胞分化程度有关(Hc=10.69，P=0.009)：高分化组(Ⅰ级)与中低分化组(Ⅱ、Ⅲ级)有显著性差异(Hc=2.184，P=0.029);MMP的表达增强亦与肺癌易发生淋巴结转移、预后不良有关。淋巴结有转移组MMP的表达强度显著高于淋巴结无转移组(Hc=2.450，P=0.014);年内死亡(X≤1年)组、1至5年(1年＜X＜5年)组及5年生存(X≥5年)组间的差异均有显著意义(Hc=10.650，P=0.009)。MMP在肺癌组织中的表达与病人年龄、性别、原发瘤大小及组织病理类型亦均无关。***与MMP在肺癌组织中的表达具有相似性，且呈极显著正相关(X=15.676，P＜0.001;spearman:r=0.457，P＜0.001)。结论：***、MMP在肺癌组织中的表达均与肺癌细胞分化程度、淋巴结转移及病人生存期有关，而与病人年龄、性别、原发瘤大小及组织病理类型无关。***与MMP在肺癌组织中的表达具有相似性，且呈极显著正相关。3．两者联合检测，可作为评估肺癌淋巴结转移及预后的重要参数。

关键词：肺肿瘤 vEGF MMPZ 病理学临床

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消化系统神经内分泌瘤G3与神经内分泌癌鉴别的临床病理意义探讨

消化系统神经内分泌瘤G3与神经内分泌癌鉴别的临床病理意义探讨

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作者：宋京芝青岛大学

学位级别：硕士

目的:探讨鉴别消化系统神经内分泌癌(neuroendocrine carcinoma,NEC)和神经内分泌瘤G3(neuroendocrine tumor,NET G3)的临床病理意义,为患者的预后评估及精准治疗提供一定的科学依据。方法:收集2010年08月-2020年08月青岛大学附属医院... 详细信息

目的:探讨鉴别消化系统神经内分泌癌(neuroendocrine carcinoma,NEC)和神经内分泌瘤G3(neuroendocrine tumor,NET G3)的临床病理意义,为患者的预后评估及精准治疗提供一定的科学依据。方法:收集2010年08月-2020年08月青岛大学附属医院病理诊断为消化系统NEC(93例)及“高增殖活性NET”(4例)的手术标本共97例及12例NEC对应的活检标本病例,依据2019年第5版《世界卫生组织(World Health Organization,WHO)消化系统肿瘤分类》诊断标准及“2020版中国胃肠胰神经内分泌肿瘤病理诊断共识”进行复核并结合补充检测的相应免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)指标(p53、Rb、ATRX),重新归类NET G3及NEC病例,比较两者的组织病理学特点;用Kaplan-Meier法进行生存分析,初步探讨两者的预后异同;运用卡方检验及Fisher确切概率法探讨p53及Rb的IHC表达与NEC患者临床病理特征的关系;单因素和多因素Cox回归分析探讨临床病理特征及IHC指标与NEC患者的预后关系。应用SPSS 23.0软件对数据进行统计分析。结果:组织病理学观察并结合补充检测的p53、Rb、ATRX指标复核,最终明确了91例NEC及6例NET G3的手术标本病例和12例NEC手术标本病例对应的活检标本病例。在复检的93例原诊断为NEC的手术标本病例中,最终有5例被重新归类为NET G3;在复检的4例原诊断为“高增殖活性NET”的手术标本病例中,最终有3例被重新归类为NEC,1例归类为NET G3。组织病理学仔细观察可以发现NET G3存在分化良好的肿瘤区域,其Ki-67阳性指数表达范围20%-60%;而NEC中肿瘤分化较差,其Ki-67阳性指数表达范围40%-90%。12例活检标本病例与对应手术标本病例的组织病理学表现及IHC检测结果大致相同,活检标本在组织病理学观察范围方面具有一定的局限性。活检标本病例与对应手术标本病例的P53及Rb异常表达率均无显著性差异(P>0.05)。手术标本病例的IHC检测结果显示,91例NEC患者中p53和(或)Rb异常表达者占89.0%,均无ATRX异常表达。6例NET G3患者中3例有ATRX异常表达,均无p53及Rb异常表达。91例NEC患者中,组织学类型为小细胞型(P=0.016)、肿瘤直径>2cm(P=0.048)以及Ki-67阳性指数>55%(P=0.019)的NEC患者p53异常表达率更高。Ki-67阳性指数>55%(P=0.023)的NEC患者Rb异常表达率更高。p53异常表达与性别、年龄、脉管癌栓、淋巴结转移、神经侵犯无关(P均>0.05)。Rb异常表达与性别、年龄、组织学类型、肿瘤直径、脉管癌栓、淋巴结转移、神经侵犯无关(P均>0.05)。单因素分析提示,组织学类型、脉管癌栓、淋巴结转移、Ki-67阳性指数、p53异常表达、p53+Rb的双异常表达是NEC患者术后总生存期(overall survival,OS)及无病生存期(disease-free survival,DFS)的影响因素(P均55%、p53异常表达、p53+Rb双异常表达是影响NEC患者术后OS和DFS的独立危险因素(P均2cm以及Ki-67阳性指数>55%的NEC患者,更应进行相应检测;本文多项指标是NEC患者预后的独立危险因素,提示可应用于患者预后评估;NEC较NET G3患者预后差,提示正确鉴别两者具有重要的临床意义。

关键词：消化系统神经内分泌肿瘤鉴别诊断临床病理免疫组织化学

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子宫内膜癌中FHIT及Survivin表达的临床意义及相关性研究

子宫内膜癌中FHIT及Survivin表达的临床意义及相关性研究

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作者：张娜青岛大学

学位级别：硕士

目的:探讨脆性组氨酸三联体基因(FHIT)蛋白和survivin蛋白在子宫内膜癌(Endometrial carcinoma,EC)中的表达,分析这两种蛋白和EC临床病理参数之间的关系及相关性。方法:用免疫组化SP法检测20例正常子宫内膜,20例单纯性增生子宫内膜、20... 详细信息

目的:探讨脆性组氨酸三联体基因(FHIT)蛋白和survivin蛋白在子宫内膜癌(Endometrial carcinoma,EC)中的表达,分析这两种蛋白和EC临床病理参数之间的关系及相关性。方法:用免疫组化SP法检测20例正常子宫内膜,20例单纯性增生子宫内膜、20例非典型性增生子宫内膜和60例子宫内膜癌(包括子宫内膜腺癌50例,浆液性乳头状癌6例,透明细胞癌4例)组织中FHIT蛋白、Survivin蛋白的表达情况。结果:(1)FHIT蛋白及survivin蛋白均表达于细胞浆或细胞核内。(2)FHIT蛋白在子宫内膜癌组织中的阳性表达强度明显低于非典型性增生子宫内膜、单纯性增生子宫内膜、正常子宫内膜(Hc=19.048,P0.05)。(3)Survivin蛋白在子宫内膜癌组织中的阳性表达程度明显高于非典型性增生子宫内膜、单纯性增生子宫内膜、正常子宫内膜(Hc=28.241,P0.05)。(4)在子宫内膜癌组织中,FHIT和survivin蛋白的表达强度经相关分析显示二者呈极显著性负相关(r=-0.336,P<0.01)。结论:***蛋白表达下调或缺失可能参与了子宫内膜癌的发生过程,与子宫内膜癌的发展及侵袭转移有关。***蛋白表达增强与子宫内膜癌的发生、发展及侵袭转移有关。可能对子宫内膜癌的早期诊断具有一定的指导意义。***与FHIT蛋白表达呈负相关,提示在子宫内膜癌的发生和发展过程中发挥拮抗作用。

关键词：子宫内膜癌 fhit蛋白 survivin蛋白免疫组织化学

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Kif2a、β-catenin、MMP-1在人胎盘中表达的临床意义

Kif2a、β-catenin、MMP-1在人胎盘中表达的临床意义

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作者：刘建美青岛大学

学位级别：硕士

目的:检测人胎盘组织中Kif2a、β-catenin、MMP-1的表达,分析其与妊娠期高血压疾病发生的相关性,探索Kif2a、β-catenin、MMP-1在妊娠期高血压疾病的风险评估、诊断和预后方面的价值。方法:选取潍坊市妇幼保健院82例产妇的胎盘作为研究... 详细信息

目的:检测人胎盘组织中Kif2a、β-catenin、MMP-1的表达,分析其与妊娠期高血压疾病发生的相关性,探索Kif2a、β-catenin、MMP-1在妊娠期高血压疾病的风险评估、诊断和预后方面的价值。方法:选取潍坊市妇幼保健院82例产妇的胎盘作为研究对象,其中正常妊娠27例,妊娠期高血压28例,子痫前期27例。所有均排除糖尿病、原发性高血压、恶性肿瘤、心脏病及肾、肝、血管等疾病。常规检测研究对象血压和身体体质指数(Body Mass Index,BMI)。采用免疫组化法检测Kif2a、β-catenin、MMP-1在胎盘组织中的表达。结果:(1)Kif2a蛋白主要表达于合体滋养细胞细胞质或细胞核中,在正常妊娠组、妊娠期高血压组和子痫前期组胎盘组织中的表达率分别为85.19%、53.57%、37.04%;子痫前期组和妊娠期高血压组胎盘组织中的Kif2a蛋白阳性率及平均光密度值明显低于正常妊娠组(P<0.05),其在子痫前期组胎盘组织中表达低于妊娠期高血压组(P<0.05)。β-catenin主要表达在胎盘合体滋养层细胞膜上,在正常妊娠组、妊娠期高血压组和子痫前期组胎盘组织中的表达率分别为85.19%、57.14%、25.93%;与正常妊娠组中β-catenin的表达相比,妊娠期高血压组和子痫前期组胎盘组织中β-catenin蛋白阳性率及平均光密度值明显降低(P<0.05),且子痫前期组胎盘组织中其表达低于妊娠期高血压组(P<0.05)。MMP-1表达于合体滋养叶细胞及间质细胞的细胞浆中,血管内皮细胞胞浆中也少量表达。MMP-1在正常妊娠组、妊娠期高血压组以及子痫前期组患者胎盘组织中的表达率分别为88.89%、50.00%、29.63%。与正常妊娠组相比,MMP-1在妊娠期高血压组和子痫前期组患者胎盘组织中的阳性率及平均光密度值明显降低(P<0.05),其在子痫前期组胎盘组织中表达低于妊娠期高血压组(P<0.05)。(2)将妊娠期高血压疾病患者(包括妊娠期高血压组及子痫前期组)中以Kif2a、β-catenin表达阳性率的中位数为界,将患者分为Kif2a low组(n=27),Kif2a high组(n=27);以及β-catenin low组(n=27),β-catenin high组(n=27)。结果显示Kif2a low组中血压和身体质量指数均低于Kif2a high组(P=0.0077,P=0.0463)。β-catenin low组中血压和身体质量指数均低于β-catenin high组(P=0.026,P=0.0042)。(3)在妊娠期高血压疾病患者中,Kif2a与β-catenin的表达之间呈显著正相关(r=0.392,P<0.01);β-catenin与MMP-1的表达之间呈显著正相关(r=0.349,P<0.01);Kif2a与MMP-1的表达之间呈显著正相关(r=0.367,P<0.05)。结论:1.人胎盘组织中Kif2a、β-catenin、MMP-1的表达降低与妊娠期高血压疾病关系密切,三者在妊娠期高血压疾病发病中可能发挥重要作用。2.妊娠期高血压组和子痫前期组患者胎盘中Kif2a、β-catenin的高表达与患者血压高、身体质量指数高(不良)有关。3.妊娠期高血压疾病病人胎盘中Kif2a、β-catenin、MMP-1的表达呈正相关,提示这三种蛋白在妊娠期高血压疾病发病中具有协同性。

关键词：妊娠期高血压疾病 Kif2a β-catenin MMP-1 体质指数

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探讨肿瘤转移抑制基因TMSG-1蛋白转录新功能

探讨肿瘤转移抑制基因TMSG-1蛋白转录新功能

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作者：夏岩青岛大学

学位级别：硕士

目的肿瘤转移抑制基因TMSG-1的肿瘤转移抑制和神经酰胺合成功能方面已经做过大量研究,但其转录功能研究甚少。本研究通过构建含有TMSG-1蛋白不同功能域的真核重组质粒并观察各重组质粒在亚细胞的定位,以确定基因内部的核定位信号,探索TM... 详细信息

目的肿瘤转移抑制基因TMSG-1的肿瘤转移抑制和神经酰胺合成功能方面已经做过大量研究,但其转录功能研究甚少。本研究通过构建含有TMSG-1蛋白不同功能域的真核重组质粒并观察各重组质粒在亚细胞的定位,以确定基因内部的核定位信号,探索TMSG-1蛋白作为转录因子的新功能。方法以TMSG-1真核表达载体为模板,聚合酶链式反应(PCR)扩增TMSG-1基因全长和不同截断体片段,与带有Flag标签的真核表达载体pcDNA3连接,转化感受态细胞DH5a,经氨苄青霉素筛选阳性克隆,菌液提取质进行粒酶切初步鉴定,后由上海生物工程公司测序鉴定。将序列正确的各重组质粒转染Hela细胞,Western bloting鉴定蛋白表达。免疫荧光检测各个截断体亚细胞定位。通过TMSG-1基因结构分析,对预测的核定位序列进行缺失研究,构建QST5重组质粒并观察亚细胞定位改变;结果PCR成功扩增得到目的基因片段,并构建得至TMSG-1全长及不同截断片段T1(aal29-aa380)、T2(aa71-aa380、T3(aal-aal28)、T4(aa1-aa70)、T5(aa71-aal28)和核定位信号缺失体QST5(aa71-aa118)的真核表达质粒,经酶切初步鉴定及基因测序鉴定,各重组质粒基因序列全部正确,Western bloting检测结果表明各重组的真核表达载体均有预期长度的蛋白表达。免疫荧光结果表明,含有Homeodomain结构域的截断体T2、T3及T5能够入核,其中T2在核内弥漫分布,而T3及T5主要定位于细胞核的核仁部位,缺失预测核定位信号(NLS)序列的QST5仍定位于细胞核,但其荧光信号不集中在核仁。不含Homeodomain结构域的T1和T4定位于细胞浆。结论成功构建TMSG-1全长及不同截断片段的真核表达载体并成功表达,确定TMSG-1蛋白含有Homeodomain结构域的截断体能够入核,而缺失Homeodomain结构域中预测的核定位序列的截断体能定位于细胞核,却不再集中于核仁,初步确定其核定位信号很有可能为核仁定位信号,具有转录因子活性引导基因进入核仁,为研究TMSG-1蛋白转录功能奠定基础,并为肿瘤的基因治疗提供新的思路。

关键词：基因肿瘤抑制亚细胞定位核定位信号肿瘤转移

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VEGF、HIF-1α和Ki-67在肺癌中的表达及与转移、预后的关系

VEGF、HIF-1α和Ki-67在肺癌中的表达及与转移、预后的关系

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作者：杨东霞青岛大学

学位级别：硕士

目的：探讨血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor，VEGF)、缺氧诱导因子-1α(Hypoxia-inducible Factor-1α，HIF-1α)及Ki-67三者在肺癌中的表达及与转移、预后的关系。方法：应用75例经手术切除并具有完整随访记录的... 详细信息

目的：探讨血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor，VEGF)、缺氧诱导因子-1α(Hypoxia-inducible Factor-1α，HIF-1α)及Ki-67三者在肺癌中的表达及与转移、预后的关系。方法：应用75例经手术切除并具有完整随访记录的人体肺癌标本(术前均未行放、化疗)，采用免疫组化PicTure-PV9000法检测VEGF、HIF-1α及Ki-67的表达。结果：1．46例肺癌组织中VEGF呈阳性表达(低级，高级：28，18例)。VEGF的表达强度与肺癌细胞分化程度有关(x=17.019，P=0.000)：随组织学分级的升高，其阳性表达强度增加，低分化组(Ⅲ级)(阴性，低级，高级;1，2，8例)、中分化组(Ⅱ级)(11，19，6例)及高分化组(Ⅰ级)(13，5，0例)间的差异均具有显著性意义(Ⅰ、Ⅱ级，Ⅱ、Ⅲ级，Ⅲ、Ⅰ级;P=0.038，0.001，0.000)。VEGF的表达强度亦与肺癌易发生淋巴结转移、预后不良有关。淋巴结有转移组VEGF的表达强度(7，15，12例)显著高于淋巴结无转移组(22，13，6例)(Z=3.319，P=0.001)。年内死亡(X≤1年)组(5，10，12例)及1至5年(1年＜X＜5年)组(8，12，5例)VEGF的表达强度显著高于5年生存(X≥5年)组(16，6，1例)(P=0.000，0.001)，而5年生存组与1至5年组的差异无显著性意义(P=0.376)。VEGF在肺癌组织中的表达与病人年龄、性别、原发瘤大小及组织病理类型均无关。2．75例肺癌组织中HIF-1α的表达强度为-～++++;34，8，15，11，7例。在不同组织病理类型间，以小细胞肺癌的表达强度(0，0，1，3，3例)最高，与鳞、腺癌(27，3，3，2，0例;24，1，4，1，0例)间的差异均有非常显著性意义(P=0.000，0.012);而鳞、腺癌间的表达差异无显著性意义(P=0.113)。与VEGF的表达相似，肺癌组织中HIF-1α的阳性强度增加也与肺癌细胞恶性程度、易发生淋巴结转移及预后不良有关。随组织学分级的增加，其表达的强度逐渐增强。Ⅲ级(0，3，4，3例)HIF-1α的表达强度显著高于Ⅰ级(3，2，0，0例)及Ⅱ级(5，9，2，1例)(P=0.000，0.000)，Ⅰ、Ⅱ级间的表达差异亦有显著性意义(P=0.010)。淋巴结有转移组(4，13，9，6例)与淋巴结中文摘要无转移组(4，2，2，1例)HIF一la的表达差异有非常显著性意义(Z=2.576，尸=0.010)。随HIF一la阳性强度的增加，病人生存期明显缩短。年内死亡组(2，9，9，5例) 及1至5年组(4，5，2，2例)HIF一1。的表达强度均显著高于5年生存组(2，1， 0，0例)(尸二0.000，0.007)，5年生存组与1至5年组间的差异亦有显著性意义(尸 =0.043)。肺癌组织中H正一la的表达与病人年龄、性别及原发瘤大小均无关。3.75 例肺癌组织幻一67指数(Ki一67 Index，心)的中位数(M)为21.00%(范围为0一98.00%)。 KI与肺癌组织病理类型、分级及病人术后生存期有关。小细胞肺癌的KI(42.00%) 最大，显著高于鳞癌(20.00%)及腺癌(17.50%)(尸=0.000，0.000)，而鳞、腺癌间的差异无显著性意义(尸=0.489)。随组织学分级的增加，肺癌细胞增殖活性明显升高(x，=17.卿;尸一0.000):I(12.500，0)、11(21.000，0)、111(45.000，0)级间的差异亦均有显著性意义(I、11级，11、111级，111、I级;p=0.001，0.025， 0.000)。肺癌细胞增殖活性与病人术后生存期有关(尹=24.865;尸二0.000):5年生存组、年内死亡组(分别为14.00%，40.00%)间的差异有非常显著性意义(尸=0.000)， 1至5年组(23、00%)与年内死亡组及5年生存组之间的差异亦均有显著性意义(尸 =0.007，0.002)。4.75例肺癌组织中vEGF及HIF一la的表达强度呈非常显著性正相关(:=0.564，尸=0.000)，肺癌组织中VEGF的表达强度与肺癌细胞增殖活性无关(rs一0.077，尸二0.513)，而HIF一la在肺癌中的表达强度与肺癌细胞增殖活性呈高度正相关(rs=0.501，尸=0.000)。结论:***在肺癌组织中的表达与肺癌细胞分化程度、淋巴结转移及病人生存期有关，而与病人年龄、性别、原发瘤大小及组织病理类型无关。2.小细胞肺癌中HIF一1a的表达最高，显著高于非小细胞肺癌;肺癌组织中HIF一la的表达与肺癌组织学分级、淋巴结转移及病人存活

关键词：肺肿瘤 VEGF HIF-lα Ki-67 转移预后

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