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作者：黄勇西北农林科技大学

学位级别：硕士

猪喘气病是由猪肺炎支原体感染引起的高度接触性、慢性传染病,严重影响猪的正常生长,对养猪业的危害极大。该病由呼吸道被感染猪肺炎支原体引起,在任何季节均可发生,春秋及气温变化大的时节多发,并且任何品种和年龄段的猪都可被感染。... 详细信息

猪喘气病是由猪肺炎支原体感染引起的高度接触性、慢性传染病,严重影响猪的正常生长,对养猪业的危害极大。该病由呼吸道被感染猪肺炎支原体引起,在任何季节均可发生,春秋及气温变化大的时节多发,并且任何品种和年龄段的猪都可被感染。尤其是规模化养殖条件极易诱发喘气病。如果不积极采取防治措施,几乎所有的猪都会被感染,且很容易引起继发感染,使病情加重,损失加剧。本实验选择广西玉林某三个猪场的陆川猪为研究对象,先对陆川猪感染喘气病进行了诊断,通过饲料加药和注射用药的方法进行治疗。实验采用氟苯尼考粉剂、泰乐菌素+土霉素混合剂、氟苯尼考注射液和林可霉素注射液四种用药方法,并设阳性感染组为对照组,通过对几种治疗喘气病的药物进行疗效比较,对规模化养殖条件下治疗陆川猪喘气病的方法进行分析讨论,获得结果如下:1.氟苯尼考粉剂饲料用药的治愈率和有效率分别是77%和89%。2.泰乐菌素+土霉素混合剂饲料用药的治愈率和有效率分别是74%和87%。3.氟苯尼考注射液的治愈率和有效率分别是85%和95%,高于其他组。4.林可霉素注射液的治愈率和有效率分别是64%和78%,在四组药物治疗中最低。结果表明:氟苯尼考粉剂及注射液对陆川猪喘气病均有较好的治疗作用,泰乐菌素+土霉素的混合剂疗效也比较好,林可霉素注射液治疗有一定的效果,但治愈率不高。氟苯尼考注射液对治疗陆川猪喘气病较适合。

关键词：氟苯尼考猪喘气病治疗实验疗效

成年野生型与摇晃小鼠大脑皮层及海马中ErbB4和PV的表达与共定位研究

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成年野生型与摇晃小鼠大脑皮层及海马中ErbB4和PV的表达与共定位...

作者：范艳乐西北农林科技大学

学位级别：硕士

摇晃蛋白（Reelin）主要是由Cajal-Retzius细胞（CR细胞）合成和分泌的一种细胞外基质糖蛋白,它短暂存在于大脑皮质的发育形成过程中。通常人们将Reelin基因突变小鼠,简称为摇晃小鼠（Reeler mouse）。随着人们对Reelin的广泛关注和深... 详细信息

摇晃蛋白（Reelin）主要是由Cajal-Retzius细胞（CR细胞）合成和分泌的一种细胞外基质糖蛋白,它短暂存在于大脑皮质的发育形成过程中。通常人们将Reelin基因突变小鼠,简称为摇晃小鼠（Reeler mouse）。随着人们对Reelin的广泛关注和深入研究,科学家发现Reelin与众多神经系统疾病有着密切联系。ErbB4是分子量为147ku表达于GABA能中间神经元的受体酪氨酸蛋白激酶,是神经调节蛋白（neuregulin,NRG）的受体之一,与精神分裂症等神经方面疾病的发生发展密切相关。小清蛋白（parvalbumin,PV）是一种分子量为12kD的Ca2+结合蛋白,可以标记GABA能中间神经元亚群,PV阳性神经元的树突末梢可以特异性地与其附近的锥体细胞的轴突始段,或和锥体神经元的胞体形成抑制性突触。中间神经元电生理活性的异常与神经方面疾病的发生息息相关。为了比较研究ErbB4和PV在成年野生型小鼠、杂合子摇晃小鼠和纯合子摇晃小鼠大脑皮层和海马中的表达及共定位情况,我们利用免疫荧光组织化学法和结构照明显微镜对大脑皮层和海马中ErbB4和PV进行观察、拍照和数据统计,还结合蛋白印迹法对三种基因型小鼠大脑皮层和海马中ErbB4和PV的表达水平进行研究。试验结果如下:1.免疫荧光染色显示,ErbB4和PV在成年野生型小鼠、杂合子摇晃小鼠和纯合子摇晃小鼠大脑皮层和海马中均有分布,ErbB4和PV主要表达于野生型小鼠与杂合子摇晃小鼠大脑皮层中的中皮层和下皮层,且在各层中的分布比例一致,纯合子摇晃小鼠大脑皮层中ErbB4和PV主要表达于上皮层和下皮层,上皮层中ErbB4阳性细胞和PV阳性细胞分布比例显著增加,下皮层中ErbB4阳性细胞和PV阳性细胞分布比例显著降低;野生型小鼠、杂合子摇晃小鼠和纯合子摇晃小鼠中ErbB4和PV主要表达于CA1区、CA3区的锥体细胞层和齿状回中的颗粒细胞层和颗粒细胞下层。2.数据统计分析显示,杂合子摇晃小鼠和纯合子摇晃小鼠大脑皮层中ErbB4表达量均低于正常野生型小鼠,但无显著性差异,而杂合子摇晃小鼠和纯合子摇晃小鼠海马中ErbB4表达量均高于正常野生型小鼠,杂合子摇晃小鼠无显著性差异,纯合子摇晃小鼠差异显著;杂合子摇晃小鼠和纯合子摇晃小鼠大脑皮层和海马中PV的表达量均低于正常野生型小鼠,大脑皮层中无显著差异,海马中差异显著。3.双重免疫荧光组织化学染色显示,野生型小鼠、杂合子摇晃小鼠和纯合子摇晃小鼠大脑皮层和海马中ErbB4及PV存在明显的共定位,二者共表达于ErbB4和PV双阳性细胞的细胞膜。综上所述,成年野生型小鼠、杂合子摇晃小鼠和纯合子摇晃小鼠的大脑皮层和海马中均有ErbB4和PV阳性细胞分布及二者的共定位,不同基因型小鼠的大脑皮层和海马的不同部位ErbB4和PV的表达量有所差异,即Reelin影响大脑皮层和海马中ErbB4和PV的分布表达,且存在组织特异性,但不影响ErbB4和PV的在大脑皮层和海马中的共定位。

关键词：摇晃蛋白 ErbB4 小清蛋白大脑皮层海马

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PRRSV受体在仔猪免疫器官的分布

PRRSV受体在仔猪免疫器官的分布

作者：孙建波西北农林科技大学

学位级别：硕士

为研究仔猪免疫器官中猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）受体在免疫器官的分布及其相对表达量的差异，本试验用PRRSV感染仔猪进行病理学观察，用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法,蛋白质印迹法，免疫荧光法，对免疫器官... 详细信息

为研究仔猪免疫器官中猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）受体在免疫器官的分布及其相对表达量的差异，本试验用PRRSV感染仔猪进行病理学观察，用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法,蛋白质印迹法，免疫荧光法，对免疫器官进行了病毒分布检测，病毒受体定位，病毒受体相对表达量分析，结果如下： 1.剖杀后大体观察显示，感染组仔猪免疫器官存在广泛的损伤，病变明显，其中胸腺萎缩，浅表淋巴结和深部淋巴结普遍肿大、出血;对照组无明显病变。 2.病理学检查显示，感染组仔猪各淋巴结及扁桃体、脾中淋巴小结减少，淋巴小结的生发中心变小，结构疏松;病毒检测，在免疫器官中均有病毒分布;对照组无异常。上述结果显示，PRRSV在感染仔猪后对淋巴组织具有组织嗜性。 3.感染组仔猪免疫器官进行免疫荧光组织化学法染色，结果显示，波形蛋白在脾未见分布，在其他检测器官均分布;唾液酸粘附素、CD163、NMHCⅡ-A在各检测器官均有分布;四种受体在免疫器官的皮质分布较为集中，在髓质零星分布。 4.蛋白质印迹法结果显示，与对照组相比，四种PRRSV受体在感染组仔猪免疫器官均有表达，且表达量差异较大;Sn和波形蛋白的相对表达量呈现整体上升趋势，NMHCⅡ-A相对表达量呈现下降趋势，CD163没有明显规律。不同受体呈现不同的变化趋势，这提示PRRSV感染不同的器官时四种受体发挥协同作用，且功能不同。综上所述，PRRSV感染仔猪后，免疫器官是其侵害的主要部位，并因此影响免疫组织发挥免疫调节作用，导致免疫抑制和持续感染;四种PRRSV受体在仔猪免疫器官中均有表达，不同受体呈现不同的变化趋势，这提示PRRSV感染免疫器官时四种受体发挥协同作用，且功能不同。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒受体免疫器官分布表达

黄体细胞培养液和氯前列醇钠对卵巢癌细胞体外生长的影响

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黄体细胞培养液和氯前列醇钠对卵巢癌细胞体外生长的影响

作者：周涛西北农林科技大学

学位级别：硕士

为了研究黄体细胞凋亡中起作用的物质及PG-CI对卵巢癌细胞体外生长的影响。本实验采用了离体细胞体外培养法、MTT法、Gimesa染色法、Hoechest-33342荧光染色法以及细胞共培养法,进行了小鼠黄体细胞和卵巢癌细胞SKOV3的培养以及这两种细... 详细信息

为了研究黄体细胞凋亡中起作用的物质及PG-CI对卵巢癌细胞体外生长的影响。本实验采用了离体细胞体外培养法、MTT法、Gimesa染色法、Hoechest-33342荧光染色法以及细胞共培养法,进行了小鼠黄体细胞和卵巢癌细胞SKOV3的培养以及这两种细胞的共培养,检测了氯前列醇钠(PG-CI)以及末期黄体细胞培养液对SKOV3细胞生长的影响。结果如下: 1.小鼠黄体细胞能够进行离体培养。在培养过程中其形态不断发生变化,呈现由圆形和椭圆形到多角形和短梭形,再由多角形变化到长梭形,最终发生细胞萎缩。Gimesa染色黄体细胞胞质呈蓝色,胞核呈蓝紫色,可见多个核仁,胞核小、胞质较大,细胞体积大,着色较浅。 2.黄体细胞与人类卵巢癌细胞SKOV3以10:1的比例进行接触共培养。在培养初期无明显变化,两种不同的细胞共同生长,卵巢癌细胞增殖速度很快。6 d后黄体细胞有凋亡迹象,10 d后卵巢癌细胞增殖状态也开始缓慢。 3.末期黄体细胞提取液对人类卵巢癌细胞SKOV3体外生长有一定抑制作用。SKVO3细胞发生胞质形变,细胞空泡化严重,细胞脱落,发生凋亡。 4. PG-CI可抑制卵巢癌细胞SKOV3体外的增殖,其抑制率与药物浓度、作用时间呈量-效、时-效关系,且在高浓度药物作用下效果极显著。加入药物24 h后,倒置显微镜观察发现SKOV3细胞密度明显减少,细胞间隙增大,胞浆减少,细胞脱落呈悬浮状,存活细胞减少,细胞核出现裂解,可见细胞碎片,随着药物作用浓度的增加上述现象更加明显。用150μg/mL的PG-CI作用12 h后细胞发生凋亡,荧光显示核质固缩呈明亮圆形或椭圆形团块。结果提示:小鼠黄体细胞萎缩,跟细胞凋亡有关。小鼠黄体细胞与SKOV3细胞共培养后,SKOV3细胞初期无变化,后期随着黄体的退化其增殖变缓。末期黄体细胞提取液对SKOV3细胞有一定抑制作用。用氯前列醇钠作用SKOV3细胞,发现可以显著抑制其的体外生长,并诱导发生细胞凋亡。

关键词：黄体细胞人类卵巢癌细胞氯前列醇钠凋亡抑制

奶山羊黄体弥散性神经内分泌细胞标志物的表达特点

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奶山羊黄体弥散性神经内分泌细胞标志物的表达特点

作者：蒋田园西北农林科技大学

学位级别：硕士

为了研究山羊卵巢中是否存在弥散性神经内分泌系统(DNES)细胞及其分布情况,采用了敏感性较高的免疫组化链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶法、超微结构观察及计算机图象分析等方法对妊娠中期奶山羊卵巢黄体中弥散性神经内分泌细胞标志物的... 详细信息

为了研究山羊卵巢中是否存在弥散性神经内分泌系统(DNES)细胞及其分布情况,采用了敏感性较高的免疫组化链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶法、超微结构观察及计算机图象分析等方法对妊娠中期奶山羊卵巢黄体中弥散性神经内分泌细胞标志物的分布进行了研究。结果显示:一些黄体细胞胞质中含有5-羟色胺(5-HT)、S-100蛋白、神经特异性烯醇化酶(NSE)、突触素(SYP)免疫反应阳性物质。神经特异性烯醇化酶(NSE)、突触素(SYP)、5-羟色胺(5-HT)、S-100蛋白均为弥散性神经内分泌系统光谱的,共同的细胞标记物。根据免疫反应复合物呈色的程度不同可分为强阳性、中等阳性、弱阳性三种。这些细胞散在或成团分布,多呈圆形、卵圆形或三角形,一些细胞具有明显的突起。在电镜下观察,一些细胞含有分泌颗粒,分泌颗粒散在分布于胞浆内,它们形态不一、大小不等,直径约100-500nm,有的细胞内的颗粒含有明显的核心和晕轮,上述结果表明,山羊卵巢黄体中的这些细胞属DNES细胞。山羊黄体中DNES细胞所含的S-100蛋白、5-HT、NSE和SYP在非黄体细胞中未检测到。结果提示:这些物质与黄体的形成及退化有极为密切的关系为了探讨5-羟色胺(5-HT)、S-100蛋白、神经特异性烯醇化酶(NSE)和突触素(SYP)四种弥散性神经内分泌细胞标志物是否在黄体的同一细胞中共存,本实验采用免疫荧光双标记法结合激光扫描共聚焦显微镜观察对四种弥散性神经内分泌细胞标志物的分布进行了检测。结果显示:在妊娠中期奶山羊卵巢黄体细胞中,首次观察到了S-100蛋白和SYP有共同存在于一个细胞的现象。且SYP和S-100蛋白共存的细胞主要分布在黄体周边,少数散布于中央区域。S-100与5-HT和5-HT与SYP共存的细胞均匀分布于整个黄体中。阳性反应主要出现于大黄体细胞,但在黄体被膜下方及小梁两侧等小黄体细胞聚集区域也可见一定数量的阳性细胞。在激光扫描共聚焦显微镜下观察,可看到细胞背景色为黑色,单标记阳性反应的组织细胞胞质为深浅不等的红色或绿色,双阳性细胞胞质为深浅不等的黄色。S-100蛋白与NSE、S-100与5-HT、S-100与SYP、NSE与5-HT、NSE与SYP、5-HT与SYP免疫阳性细胞轮廓清楚,胞质中含有深浅不等黄色的染色颗粒,细胞核不着色,呈圆形点状,核位于细胞中央或偏于一侧。细胞形态有圆形、卵圆形、长梭形、三角形等。结果提示:属于弥散性神经内分泌细胞的黄体细胞,必然存在不同的类型,它们分泌的产物和行驶的功能不同。

关键词：弥散性神经内分泌细胞标记物黄体免疫组化双标记

小鼠附睾基因defb48和fam12b的克隆、原核表达纯化及功能的初步研究

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小鼠附睾基因defb48和fam12b的克隆、原核表达纯化及功能的初步研...

作者：陈立瑾西北农林科技大学

学位级别：硕士

defb48、fam12b基因在NCBI unigene数据库中属于小鼠附睾基因,其中fam12b基因在人类中有同源基因。运用蛋白序列分析软件预测出Defb48具有β-defensin结构域,Fam12b属于RNase A超家族。已有的相关研究表明这两个基因在小鼠附睾中可以检... 详细信息

defb48、fam12b基因在NCBI unigene数据库中属于小鼠附睾基因,其中fam12b基因在人类中有同源基因。运用蛋白序列分析软件预测出Defb48具有β-defensin结构域,Fam12b属于RNase A超家族。已有的相关研究表明这两个基因在小鼠附睾中可以检测到转录本,并且用这两个附睾基因的重组真核表达载体转染COS-7细胞证实这两个基因编码的蛋白可以被分泌到细胞外,Defb48、Fam12b蛋白可能在精子成熟过程中发挥作用,目前还未见相关的研究报道这两个蛋白发挥功能的机制。为了阐明小鼠附睾分泌蛋白Defb48、Fam12b在精子成熟中的功能,本论文开展了如下研究: 1.分别克隆了小鼠附睾基因defb48、fam12b,构建原核表达载体pET28(a)-defb48、pET28(a)-fam12b,并于大肠杆菌Rosetta(DE3)中诱导表达,亲和纯化获得高纯度融合蛋白。 2.分别以这两个纯化的融合蛋白作为抗原免疫十周龄雄鼠后,与生育期的正常雌鼠交配,观察对后代小鼠数目以及雄鼠的精子运动活力的影响。结果表明免疫Defb48融合蛋白实验组的雄鼠所生的后代小鼠数目与对照组有显著差异,且雄鼠精子的运动活力也下降;免疫Fam12b融合蛋白实验组的雄鼠所生的后代小鼠数目与对照组无显著差异。 3.运用western-blot以及免疫荧光技术观察正常生育期的小鼠精子是否会与Defb48蛋白结合而发挥作用。由于一抗用的是免疫融合蛋白后的雄鼠血清,成分较为复杂,未能检测出Defb48蛋白与精子的结合情况;但western-blot检测正常雄鼠附睾液中总蛋白时出现比预测分子量大10kD左右的特异的蛋白条带,用蛋白分析软件预测Defb48蛋白可能发生了糖基化修饰。 4.为了检验用原核表达蛋白Defb48免疫雄鼠后产生的抗血清的有效性,构建了真核表达载体pcDNA3.1-defb48,转染293T细胞做过表达,转染后细胞死亡率较高,未能检测出抗血清的蛋白空间构象识别能力。本研究初步探索了小鼠附睾特异性表达的蛋白Defb48和Fam12b在精子成熟中的功能,结果显示Defb48蛋白可能对精子成熟的作用较大。这为筛选对精子成熟起重要作用的蛋白,从而制备有效的鼠疫疫苗工作奠定了基础。

关键词： defb48 fam12b 小鼠附睾分泌蛋白原核表达功能探索

GnRH类似物对小鼠下丘脑—垂体—性腺轴催产素表达及学习记忆的影响

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GnRH类似物对小鼠下丘脑—垂体—性腺轴催产素表达及学习记忆的影...

作者：周建平西北农林科技大学

学位级别：硕士

为了研究促性腺激素释放激素对小鼠下丘脑-垂体-性腺轴中催产素表达及学习记忆的影响,本研究通过对发情期小鼠皮下注射促性腺激素释放激素类似物丙氨瑞林后,应用免疫组织化学链霉素亲生物素-过氧化物酶法结合水迷宫法研究促性腺激素释... 详细信息

为了研究促性腺激素释放激素对小鼠下丘脑-垂体-性腺轴中催产素表达及学习记忆的影响,本研究通过对发情期小鼠皮下注射促性腺激素释放激素类似物丙氨瑞林后,应用免疫组织化学链霉素亲生物素-过氧化物酶法结合水迷宫法研究促性腺激素释放激素对下丘脑-垂体-性腺轴催产素表达,对空间学习记忆及海马催产素表达变化规律和去卵巢小鼠空间认知作用进行了研究。其结果对神经肽之间相互调控的关系,动物生殖以及社会认知和激素替代疗法具有重要意义。主要结果如下: 1.各丙氨瑞林处理组小鼠下丘脑的终纹床核、视前腹内侧核、视前正中核、视上核、室旁核、下丘脑背内侧核、下丘脑腹内侧核内催产素阳性表达量均被抑制;而对下丘脑的视前腹外侧核、下丘脑视前区和下丘脑外侧区的催产素阳性产物表达量起促进作用。提示:促性腺激素释放激素对下丘脑催产素表达的影响具有剂量依赖性,引起性腺甾醇性激素的负反馈作用,且促性腺激素释放激素对下丘脑催产素表达影响有部位特异性,为多种激素共同作用的结果。 2.在小鼠的终纹床核、视前大细胞核、视前腹内侧核、视前腹外侧核和视前内侧区雄性催产素阳性表达量大于雌性,具有性别的差异性。而在室旁核、下丘脑背内侧核和交叉上核催产素阳性表达量雌性小鼠多于雄性小鼠。主要原因可能是脑发育过程中尤其是围产期性激素(雌二醇和雄激素)环境所造成的性别差异,使得雌雄动物的脑结构不同,进而引起催产素阳性表达不同。 3.经丙氨瑞林处理后,终纹床核、视前内侧区催产素阳性表达量不表现性别差异,而在一些如视前腹内侧核、交叉上核在不同剂量处理的情况下有不同效果。提示:丙氨瑞林处理后可减少性别之间催产素表达的差异性,可能不同剂量对雌性小鼠的性周期和受体的结合量影响不同,并且表现出不同剂量处理后催产素的表达存在差异。 4.神经垂体内催产素阳性表达也呈现性别的差异性,可能是性别不同时,下丘脑视上核和室旁核大细胞投射量不同引起。丙氨瑞林处理后,催产素表达量有所减少,性别差异性缩小。推测是下丘脑大细胞投射到垂体后叶变小,垂体促黄体素和促卵泡素在丙氨瑞林作用下分泌减少,进而间接地降低了催产素的表达。 5.各级卵泡和黄体均有催产素阳性反应产物,催产素主要在颗粒细胞表达,生长卵泡的催产素表达高于原始卵泡。处理后,原始卵泡催产素表达量下降,而生长卵泡的催产素表达存在剂量依赖关系,黄体内催产素表达呈下降趋势。提示:催产素在卵泡的发育中有重要作用,丙氨瑞林对卵泡中催产素的影响存在剂量依赖性,对黄体催产素表达的抑制作用可能是通过减少孕酮分泌来完成。 6.在小鼠的生精小管内,精原细胞和各级精母细胞均有催产素阳性产物表达。各处理组生精小管上皮均变薄,管腔增大。丙氨瑞林对生精小管内催产素免疫阳性表达量具有显著的抑制作用。其作用机理可能是通过刺激卵泡刺激素分泌,进而促进精母细胞成熟并形成精子起作用的。 7.去卵巢后小鼠的空间认知能力明显下降。而注射丙氨瑞林后,其空间认知能力有所改善,且存在剂量依赖性。提示:促性腺激素释放激素对小鼠的空间学习记忆的改善是通过抑制促黄体素的合成和分泌来发挥作用。 8.丙氨瑞林可使小鼠潜伏期明显减少,低剂量组在第五天与对照组差异不显著;错误反应次数在前三天内均较对照组有所减少。提示丙氨瑞林对小鼠空间学习记忆的影响存在时间和剂量依赖性。 9.高剂量处理组的CA1、CA2和齿状回区比对照组催产素相对表达明显上升,而CA3和CA4区催产素相对表达量减少;低剂量的CA4区催产素相对表达量有明显减少。提示:丙氨瑞林对海马不同区内催产素表达的影响不一致,对学习记忆的影响是海马各区内整合作用的结果。

关键词：促性腺激素释放激素催产素下丘脑-垂体-性腺轴学习记忆海马

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孕牛血清中早孕因子的分离纯化及生物学鉴定

孕牛血清中早孕因子的分离纯化及生物学鉴定

作者：张宏刚西北农林科技大学

学位级别：硕士

早孕因子(early pregnancy factor,EPF)是存在于妊娠早期母体血清中的一种免疫抑制蛋白。可以用于预测早期胚胎死亡与流产、鉴定胚胎移植效果、监测胎儿的状态以及食道癌诊断。本实验拟从妊娠3～4个月健康孕牛血清中分离得到纯化的EPF... 详细信息

早孕因子(early pregnancy factor,EPF)是存在于妊娠早期母体血清中的一种免疫抑制蛋白。可以用于预测早期胚胎死亡与流产、鉴定胚胎移植效果、监测胎儿的状态以及食道癌诊断。本实验拟从妊娠3～4个月健康孕牛血清中分离得到纯化的EPF。应用DEAE-Sepharos F. F离子交换层析,CM–Sepharose F.F离子交换层析,Con A-Sepharose 4B亲和层析和Heparin Sepharose Cl 6B亲和层析分离纯化技术,从孕牛血清中分离出纯化的EPF(HE-2)。采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对纯化的EPF进行分析;用玫瑰花环抑制实验(RIT)对各阶段产物EPF活性进行检测。结果显示,纯化出的EPF通过玫瑰花环抑制实验具有活性,经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)出现分子量分别为18.3KD、21KD两条区带的蛋白带,纯化的EPF(HE-2)在56℃热处理30 min具有稳定的生物活性。纯化出分子量为18.3KD、21KD的早孕因子蛋白。从孕牛血清中分离得到纯化的早孕因子,为进一步研制牛流产及不孕症的早孕因子单克隆抗体快速检测胶体金试纸条做准备。

关键词：孕牛血清早孕因子纯化分子量

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正念改善焦虑：无法忍受不确定性的中介作用

正念改善焦虑：无法忍受不确定性的中介作用

作者：张柳依浙江大学

学位级别：硕士

目的:焦虑是高校在校生群体中一种常见的负性情绪,其可能的心理机制为个体的无法忍受不确定性(Intolerance of Uncertainty,IU)水平高。正念是一种心理治疗方法,能够有效改善焦虑,但正念认知干预是否能够有效改善国内在校生焦虑的研究... 详细信息

目的:焦虑是高校在校生群体中一种常见的负性情绪,其可能的心理机制为个体的无法忍受不确定性(Intolerance of Uncertainty,IU)水平高。正念是一种心理治疗方法,能够有效改善焦虑,但正念认知干预是否能够有效改善国内在校生焦虑的研究结论尚不丰满,线上短程自助式正念干预对在校生焦虑的效果也尚不明确。另一方面,正念改善焦虑的机制尚不明确。前人研究表明,正念中不同的维度对焦虑的影响不一致。从理论上说,正念所倡导的接纳从理论上能够降低IU,从而改善焦虑。因此,本研究旨在:(1)探讨IU在正念各维度与焦虑之间的关系;(2)验证正念干预能够改善在校生的焦虑水平;(3)检验正念干预对IU的改善效果。方法:本研究分为三个部分。研究一旨在探究IU、正念各维度与焦虑之间的关系。向在校生被试发放问卷,使用简版正念五因素量表(Five Facet Mindfulness Questionnaire-Short Version,FFMQ-SF)、简版无法忍受不确定性量表(Intolerance of Uncertainty Scale-12,IUS-12)、广泛性焦虑障碍量表(Generalized Anxiety Disorder,GAD-7)对大学生的正念、IU、焦虑进行测量。共回收437份有效数据。对正念五个维度、IU与焦虑之间的关系进行结构方程模型分析。研究二旨在验证团体正念认知疗法对在校生的正念、焦虑的改善作用。以在校生为被试,采用等待随机对照设计,对干预组实施为期6周、每周一次的正念认知疗法,等待组在等待结束后接受同样干预。共有61人报名,符合条件的有54人,在随机均等分组后,44人完成前测(干预组24人,对照组18人),37人完成后测(干预组19人,对照组18人)。在干预前、后均使用FFMQ-SF、GAD-7对两组被试的正念、焦虑进行测量。对符合方案集(per-protocol,PP)分析数据集进行重复测量方差分析,对意向性(intention-to-treat,ITT)分析数据集进行线性混合模型分析,以探究干预对正念与焦虑水平的作用。研究三旨在检验线上短程自助式正念干预对在校生的焦虑和IU的改善作用。以在校生为被试,采用对照设计,对干预组实施基于监控和接纳理论的为期14天的线上正念干预,对照组不接受干预。共有107人报名参与并完成前测(干预组41人,对照组66人),其中72人完成后测(干预组25人,对照组47人)。在干预前、后均使用FFMQ-SF、IUS-12、GAD-7对两组被试的正念、IU、焦虑进行测量。对PP分析数据集进行重复测量方差分析,对ITT分析数据集进行线性混合模型分析,以探究干预对正念、IU与焦虑水平的作用。结果:研究一结果表明正念五维度中的观察(β=0.108)和描述(β=0.096)对焦虑有直接正向作用、有觉知地行动(β=-0.158)和不判断(β=-0.233)对焦虑有直接负向作用;无法忍受不确定性在描述与焦虑、有觉知地行动与焦虑之间起部分中介作用,在不判断与焦虑之间起完全中介作用,中介效应值分别为-0.056、-0.097、-0.190。研究二中,ITT与PP数据集分析得到了一致的结果。ITT结果表明,正念干预能够有效提高在校生的正念水平(F=9.186,p=0.005,g=0.859,95%CI=[0.218,1.499])、改善焦虑水平(F=7.786,p=0.008,g=0.886,95%CI=[0.244,1.529]);在正念五维度中,不判断的改善最为显著与稳定。研究三中,ITT与PP数据集分析得到了一致的结果。ITT结果表明,基于监控与接纳理论的线上正念干预能够有效提高在校生的正念水平(F=20.678,p<0.001,g=0.859,95%CI=[0.218,1.499])、改善IU(F=10.016,p=0.002,g=0.640,95%CI=[0.224,1.224])与焦虑水平(F=4.990,p=0.028,g=0.640,95%CI=[0.224,1.224]);在正念五维度中,干预有效提高了观察、不反应、不判断和有觉知地行动。结论:正念干预能够有效改善高校在校生的焦虑水平,无法忍受不确定性在其中起到中介作用,这为之后正念的机制探索和干预发展提供了新的视角。

关键词：正念焦虑无法忍受不确定性高校在校生

突出优势训练对提高大学生积极情绪的作用及其心理机制

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突出优势训练对提高大学生积极情绪的作用及其心理机制

作者：孙倩芸浙江大学

学位级别：硕士

积极情绪是个体幸福的重要情绪体验,也是积极心理学的重要研究内容之一。关于积极情绪的理论研究,目前影响最大的是由Fredrickson提出的情绪拓展—建构理论。积极的个性特质被定义为反映在个体的认知、情绪、以及行为等各个心理层面的... 详细信息

积极情绪是个体幸福的重要情绪体验,也是积极心理学的重要研究内容之一。关于积极情绪的理论研究,目前影响最大的是由Fredrickson提出的情绪拓展—建构理论。积极的个性特质被定义为反映在个体的认知、情绪、以及行为等各个心理层面的积极特质,突出优势代表了个体性格中最为突出的积极品质。本研究试图通过突出优势训练来提高个体的积极情绪,并探讨可能的心理机制。本研究以大学生群体作为被试,实验前预调查选取本地一所职业技术学校随机发放280份正性负性情绪量表,对大学生积极情绪做一个调查;正式的实验在该校通过学生名册筛选两个大一新生班级,每个班级均是68名学生,一一匹配分组,分为突出优势训练组和对照组,采用2×2混合实验设计,观察通过突出优势训练大学生人群的积极情绪是否有所提高,同时观察情绪拓展—建构理论各维度在积极情绪改变中的作用。研究中,我们采用由WatsonD,Clark LA和Tellegen A于1998年共同编制的正性负性情绪量表,评估被试的积极情绪和消极情绪;运用计算机测量经典Stroop效应,评估被试的认知行为指令;使用魏运华(1998)编制和修订的同伴关系满意度量表评估被试的个人发展资源状况;以及Diener等人编制的生活满意度量表评估被试的生活满意度情况。研究结果表明:(1)通过6周的突出优势训练,被试积极情绪的后测得分显著高于前测得分,突出优势训练组和对照组之间存在显著差异;被试的积极情绪的起效点是第三周;消极情绪的起效点是第六周。(2)情绪拓展—建构理论的各个维度,突出优势训练组和对照组在认知作业、同伴关系之间存在显著差异,生活满意度差异不显著;其中,Stroop效应正确率和反应时的起效点均为第二周,同伴关系和生活满意度的起效点均为第五周。本研究主要获得以下结论:(1)通过6周的突出优势训练,可以有效的增加大学生人群的积极情绪。(2)突出优势训练在6周先后改变了认知作业表现和同伴关系,而生活满意度的改变不显著。(3)路径分析结果显示,突出优势训练增加了积极情绪并通过同伴关系作为中介变量,影响最终积极情绪的变化。研究结果部分验证了情绪拓展—建构理论模型。

关键词：突出优势训练积极情绪情绪拓展—建构理论大学生