检索结果-南通市图书馆

作者：李洋四川农业大学

学位级别：硕士

本试验选用健康雌性小鼠(体重为20+1g)360只,采用二因素三水平设计,DON浓度水平0、1.5、2.5mg/KgBW, ZEA浓度水平为0、20、30mg/KgBW,随机分为9组,对照组(甲醇溶液10%)、DON染毒组(试验D1组和试验D2组,DON剂量分别为1.5、2.5mg/KgBW)、... 详细信息

本试验选用健康雌性小鼠(体重为20+1g)360只,采用二因素三水平设计,DON浓度水平0、1.5、2.5mg/KgBW, ZEA浓度水平为0、20、30mg/KgBW,随机分为9组,对照组(甲醇溶液10%)、DON染毒组(试验D1组和试验D2组,DON剂量分别为1.5、2.5mg/KgBW)、ZEA染毒组(试验Z1组和试验Z2组,ZEA剂量分别为20、30mg/KgBW)、联合染毒组(DON1.5mg/KgBW和ZEA20mg/KgBW, DON1.5mg/KgBW和ZEA30mg/KgBW, DON2.5mg/KgBW和ZEA20mg/KgBW, DON2.5mg/KgBW和ZEA30mg/KgBW)。每隔24h腹腔注射染毒,连续注射4d。在首次注射后第3d(染毒2d)、5d(染毒4d)、8d(停止染毒后4d)、12d(停止染毒后8d)早上每组随机选取4只小鼠,断颈法处死,迅速取出全脑,滤纸拭干,测定脑组织重量并记录。脑组织样品分装后液氮保存,以备样品检测。检测脑蛋白质含量、抗氧化指标、脑部神经递质、脑细胞凋亡率等指标的变化情况。试验结果表明：(1)在试验期间,各试验组之间脑组织的重量变化无显著差异(P>0.05);(2)试验第3d和第5d,DON、ZEA单独或联合染毒,脑组织蛋白质含量均随毒素剂量增大呈剂量依赖性下降。联合染毒对蛋白含量降低表现出显著的互作性,其效应明显大于DON和ZEA的单一作用,呈加性效应。在停止注射毒素后4d(试验第8d),毒素对蛋白质含量的影响逐渐减弱,至停止注射毒素后8d(试验第12d)毒素对脑蛋白含量无明显影响;(3)试验第3d和第5d,ZEA低浓度单独染毒、DON与ZEA低浓度联合染毒可以提高组脑组织中SOD活力,而DON单独染毒或DON与ZEA高浓度染毒均降低SOD活力,丙二醛(MDA)含量升高,羟自由基活力下降,一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(NOS)活性升高,联合毒素染毒组与相对应的单一毒素染毒组相比差异显著(P<0.05或P<0.01),不同浓度组之间表现出明显的剂量-效应关系。其中以联合高浓度组(DON2.5mg/KgBW+ZEA30mg/KgBW)对小鼠脑组织氧化损伤最为严重;(4)DON、ZEA单独或联合染毒导致神经递质发生紊乱：AchE活力降低、Glu含量升高、GS浓度升高;(5)DON、ZEA单独或联合染毒均导致脑组织脑细胞凋亡率升高;(6)DON和ZEA的毒性作用在试验第3d和5d时最强,在8d和12d时明显降低,但联合毒素染毒组仍表现出比较强的毒性。结果表明：DON、ZEA及其联合染毒均能造成小鼠脑组织蛋白含量下降,抗氧化能力下降,细胞凋亡率升高,最终脑部组织功能受损;DON、ZEA联合染毒对脑组织的损伤效应为亚加性效应。

来源：

同方学位论文库评论

胰岛素、高血糖素和神经肽Y对初生犊牛原代培养肝细胞中硬脂酰CoA去饱和酶mRNA表达的影响

胰岛素、高血糖素和神经肽Y对初生犊牛原代培养肝细胞中硬脂酰CoA...

引用

作者：王利民四川农业大学

学位级别：硕士

选用健康初生犊牛，采用双灌流的方法，成功分离犊牛肝脏细胞，通过测定培养液中尿素合成能力、白蛋白分泌能力和乳酸脱氢酶的泄漏量等指标，检测细胞在分离后损伤和修复情况，寻找神经内分泌激素处理的恰当时机。以含有目的基因的质粒... 详细信息

选用健康初生犊牛，采用双灌流的方法，成功分离犊牛肝脏细胞，通过测定培养液中尿素合成能力、白蛋白分泌能力和乳酸脱氢酶的泄漏量等指标，检测细胞在分离后损伤和修复情况，寻找神经内分泌激素处理的恰当时机。以含有目的基因的质粒为模板，采用梯度稀释的方法，以SYBR greenⅠ为荧光染料，检测β-actin和SCD两个基因的扩增效率。在培养到72h时，用0、5、10、20、50IU／ml的胰岛素，0、50、100、500、1000pg/ml高血糖素，0、50、100、500、1000pg／ml神经肽Y分别处理肝细胞，以β-actin为内参基因，用荧光PCR方法检测肝细胞内硬脂酰CoA去饱和酶(SCD)mRNA的相对变化。结果表明：1．离体双灌流法可以成功的分离犊牛肝细胞，成活率均在90％以上，细胞合成尿素的能力、分泌白蛋白的能力随着培养时间先减少后增加，在培养到3～4天时乳酸脱氢酶泄漏明显减少，表明培养3～4天后肝细胞能够修复胶原酶带来的损伤，因此分离的肝细胞培养72h后，用作实验材料比较适合。2．通过质粒浓度对数与CT值，求得Y=34.14-2.95*X(Ⅰ)和Y=35.46-2.97*X(Ⅱ)，两个基因的扩展效率相同，可以用比较CT法计算SCDmRNA相对表达量。3．胰岛素能显著的促进肝细胞内SCDmRNA表达，不同浓度组间差异均显著(P＜0.05)，并呈现剂量依赖性促进效应。4．胰高血糖素显著地抑制了肝细胞SCDmRNA表达水平，不同浓度组差异极显著(P＜0.01)，并呈现剂量依赖性抑制效应。5．神经肽Y促进肝细胞内SCDmRNA表达，添加不同浓度神经肽Y组与对照组比较差异显著(P＜0.05)，除50pg／ml处理组和500pg／ml处理组之间差异不显著外，其他处理组之间差异显著(P＜0.05)。6．胰岛素和神经肽Y在体外培养的肝细胞中可通过促进SCDmRNA表达，促进肝脏脂肪沉积。而高血糖素可通过抑制SCDmRNA表达，减少肝脏脂肪沉积。

来源：

同方学位论文库评论

蠕形螨感染犬免疫功能的变化及中西药防治研究

引用

作者：阮世良四川农业大学

学位级别：硕士

32只4月龄健康家犬随机分为4组,健康对照组和实验组(分为中西药治疗组、中药治疗组、西药治疗组),健康组与感染组分开隔离饲养。以蠕形螨病犬的皮肤刮取物,接种在实验组犬皮肤上,观察感染情况,每组筛选感染强度基本一致(以皮肤变化为准)... 详细信息

32只4月龄健康家犬随机分为4组,健康对照组和实验组(分为中西药治疗组、中药治疗组、西药治疗组),健康组与感染组分开隔离饲养。以蠕形螨病犬的皮肤刮取物,接种在实验组犬皮肤上,观察感染情况,每组筛选感染强度基本一致(以皮肤变化为准)的6只病犬和6只健康犬为实验动物,进行正式实验。分别在接种后5、10、15、20、25、30、35、40d观察体温、呼吸、脉搏及临床表现,采血进行血液常规检验、淋巴细胞转化、淋巴细胞周期、免疫球蛋白等相关指标的检测;第5、10d进行显微镜检查。在第20d时进行治疗:中药组用肤螨灭涂擦,1次/2d,连续10次;西药组用伊维菌素0.2mg/kg体重,皮下注射,1次/5d,连续4次;中西药组用肤螨灭和伊维菌素联合治疗,观测其疗效。结果表明: 1.采用临床感染蠕形螨犬的皮肤刮取物直接接种在实验犬皮肤上,第5d即可表现蠕形螨感染的表现:出现红斑、丘疹、结痂、掉毛、瘙痒等症状。第10d镜检蠕形螨病的感染率高达83.33%(20/24)。但接种后20d感染犬体温、脉搏数、呼吸数均在正常范围内波动,感染犬精神情况良好,饮食正常。除皮肤的明显变化外,未见其他明显临床异常。病理组织学检查结果表明蠕形螨寄生于皮肤的毛囊内或皮脂腺内,引起毛囊周围细胞浸润、充血水肿、毛囊角化过度等病理变化。 2.蠕形螨感染犬的红细胞数、血红蛋白含量及血小板数均下降,白细胞数在感染后5～10d明显增多(P＜0.05或0.01),此后呈现下降趋势。 3.蠕形螨感染犬血液淋巴细胞转化OD值逐渐下降,从而降低了机体的细胞免疫功能。感染初期,犬血液淋巴细胞周期G/G期值升高,PI值降低,免疫能力受到一定程度的抑制;感染后期,犬血液淋巴细胞周期G/G期值降低,PI值升高,免疫能力有一定程度的增强。 4.蠕形螨感染犬血清中IgG、IgM、IgA含量的变化趋势基本一致。感染组和健康对照组血清中IgG、IgM、IgA含量在很小范围内波动,说明蠕形螨感染对犬的体液免疫功能影响不明显。 5.以传统西药(伊维菌素0.2mg╱kg体重,皮下注射,1次/5d,连续4次)、自制中药“肤螨灭”(涂擦,1次/2d,连续10次)及二者结合的方法治疗蠕形螨感染犬,给药后20d,中西药组、中药组和西药组治愈率分别为100%、83.33%和50%;总有效率分别为100%、100%、83.33%。停药后30天,中西药组、中药组和西药组复发率分别为0%、0%和33.33%。 6.伊维菌素与“肤螨灭”结合治疗在提高红细胞数和血小板数、血红蛋白含量,提高血液淋巴细胞的转化能力,提高血清IgG、IgM、IgA含量方面略优于单用“肤螨灭”,比单用伊维菌素治疗有明显的优势。中西药组能降低犬血液淋巴细胞周期G╱G期值、升高PI值从而提高犬的免疫能力。

来源：

同方学位论文库评论

四川省某县黑山羊体内寄生虫感染情况调查

引用

作者：匡思印四川农业大学

学位级别：硕士

被调查县黑山羊养殖主要集中在A、B、C、D和E五镇(区域位置见图2-1)。养殖方式以放养和半放养,养殖规模以母羊2000头为主。分别于2015年5月份、8月份、11月份和次年2月份,在上述五镇开展黑山羊体内寄生虫感染情况调查,掌握其流行病学规... 详细信息

被调查县黑山羊养殖主要集中在A、B、C、D和E五镇(区域位置见图2-1)。养殖方式以放养和半放养,养殖规模以母羊2000头为主。分别于2015年5月份、8月份、11月份和次年2月份,在上述五镇开展黑山羊体内寄生虫感染情况调查,掌握其流行病学规律,为该县黑山羊体内寄生虫病的防控提供理论依据。根据养殖规模按年出栏商品羊≤50头、5100头、10150头、15100头、≥200头分为五种规模,每个规模选取5户,每户按黑山羊年龄分为2月龄以下、22月龄、12月龄以上三个年龄段,每个年龄段抽5个粪样。采取羊直肠粪样或羊只排出的新鲜粪便,标记信息,分别装入采样袋内,置于4℃冰箱保存待检。粪便虫卵检查法得到如下结果:(1)该县黑山羊体内寄生虫感染率由高到低排序为:肝片吸虫感染率为40.17%、类圆线虫感染率为39.80%、捻转血矛虫感染率为34.69%、马歇尔线虫感染率为17.49%、夏伯特线虫感染率为8.50%、毛首线虫感染率为9.49%、、球虫感染率为4.32%、仰口线虫感染率为3.73%、前后盘吸虫感染率为3.40%。其中优势虫种包括:肝片吸虫、类圆线虫、捻转血矛线虫、马歇尔线虫等。春季主要感染肝片吸虫、类圆线虫、马歇尔线虫;夏季、秋季主要感染肝片吸虫、类圆线虫、捻转血矛线虫、马歇尔线虫;冬季主要感染肝片吸虫、类圆线虫;夏季、秋季感染率和感染强度高于春季;冬季除肝片吸虫、类圆线虫感染率比较高外,其他寄生虫感染率都比较低,甚至有些乡镇未检测出某些寄生虫。肝片吸虫、仰口线虫、前后盘吸虫随年龄的增长,感染率增高,类圆线虫、捻转血矛线虫、夏伯特线虫、毛首线虫随年龄增长感染率降低,球虫和马歇尔线虫各年龄之间无明显差异。(2)按照年龄段划分,2月龄以下羊、22月龄羊、12月龄以上羊体内寄生虫阳性感染率,A镇分别为68.46%、47.68%、35.83%,B镇分别为75.33%、54.16%、40.65%,C镇分别为70.22%、51.10%、39.99%,D镇分别为70.77%、50.23%、38.12%,E镇分别为73.21%、52.54%、40.83。五个镇黑山羊体内寄生虫阳性感染率均随年龄增大而降低,同乡镇同季节不同年龄之间2月龄以下感染头数要多于其余两个年龄阶段羊,同季节同年龄之间不同乡镇之间感染情况差异不大,同年龄同乡镇之间夏季、秋季感染头数还多于春季和冬季。(3)各乡镇羊寄生虫混合感染严重。五镇羊平均混合感染率为56.2%。五镇羊混合感染率由高到低分别为,B镇61.2%、E镇58.5%、D镇57.7%、C镇56.5%、A镇47.1%;四个季度羊平均混合感染率由高到低分别为,秋季74.9%、夏季63.9%、春季60.0%、冬季26.1%,其中B镇、C镇羊春季混合感染率高于夏季,E镇羊夏季混合感染率高于秋季,B镇秋季混合感染率最高为78.9%;混合感染率随羊年龄增加而降低,其中以B镇2月龄以下羊只混合感染率最高为82.6%;五种规模养殖场羊平均混合感染率由高到低分别为,d 68.1%、c 67.8%、b 50.5%、a 48.1%、e46.6%,其中B镇、C镇、D镇d种规模养殖场混合感染率低于c种规模养殖场,E镇d种规模养殖场羊混合感染率最高为75.7%。结论:该县不同规模的黑山羊养殖场各个年龄阶段的羊都有不同程度感染体内寄生虫,呈现感染率高、感染种类多、混合感染严重、全年感染,且随年龄的增加羊体内寄生虫感染率降低,年出栏商品羊200头以下规模养殖场混合感染情况比较严重。

来源：

同方学位论文库评论

青蒲颗粒对仔猪部分血液指标的影响及解热作用研究

引用

作者：杨梅四川农业大学

学位级别：硕士

青蒲颗粒是由成都乾坤动物药业有限公司研究开发的现代中药颗粒,本试验主要探究青蒲颗粒对仔猪部分血液指标的影响及解热作用。试验一:青蒲颗粒对仔猪血常规及血生化指标的影响选取32头35日龄长白仔猪,随机分为4组,除对照组外,试验组分... 详细信息

青蒲颗粒是由成都乾坤动物药业有限公司研究开发的现代中药颗粒,本试验主要探究青蒲颗粒对仔猪部分血液指标的影响及解热作用。试验一:青蒲颗粒对仔猪血常规及血生化指标的影响选取32头35日龄长白仔猪,随机分为4组,除对照组外,试验组分别在仔猪日粮中添加1、3、5g/kg体重的青蒲颗粒,连续给药7d,每日监测仔猪体征变化,并于第0、8、13 d时,每组随机选取5头试验仔猪,晨饲前经前腔静脉采血5mL/头,检测血常规及血生化指标。结果显示:各试验组与对照组的仔猪血常规和血液生指标均无显著差异。试验二:建立LPS致热模型,确定最佳致热剂量及体温变化规律选取16头35日龄长白仔猪,随机分为4组,除对照组外,试验组分别腹腔注射40、50、60μg/kg体重LPS,12h后再注射一次,持续监测记录体温变化72 h。结果显示:注射LPS 2 h后,所有仔猪体温开始逐渐升高,低、中剂量组仔猪体温在首次注射LPS 6 h后均上升到最高温度,12h再次注射LPS后体温又逐渐上升,并呈现波动状态,低剂量组从42h开始体温基本恢复正常,中剂量组体温始终保持在39.63℃以上。高剂量组仔猪体温变化幅度最大,首次注射LPS后体温始终保持在40.06℃以上,在8、20、60h时分别达到峰值。综合考虑中剂量LPS(50μg/kg体重)对长白仔猪致热效果最佳,第一次灌服中药的时间为首次注射LPS后6h。试验三:青蒲颗粒对LPS致热仔猪的解热效果选取60头35日龄长白仔猪,随机分为正常对照组、阳性对照组、膏芩口服液组、青蒲颗粒低、中、高剂量组。除正常对照组外,均接种LPS(按试验二确定的最佳致热剂量50μg/kg体重),4个用药组在仔猪接种LPS 6h后,分别灌服膏芩口服液1mL/kg体重、青蒲颗粒0.5、1.0、1.5g/kg体重,连续给药3d,每日观测临床症状及体温;计算平均日采食量、日增重及料重比;在第0、2、4和6d每组随机选取5头仔猪前腔静脉采血3mL/只,分离血清后检测TNF-α、PGE2、MIP-1、IL-1β、IL-6、IL-8的含量;在第4 d,阳性对照组和青蒲颗粒低剂量组随机选取2头仔猪处死后,采集肺、肝、肾、脾制作石蜡切片,以观察相应组织的病理变化。结果显示:1)LPS可使仔猪96h内平均体温维持在39.90℃1.87℃之间,使用LPS后,青蒲颗粒高剂量组和膏芩口服液组、青蒲颗粒中剂量组、青蒲颗粒低剂量组仔猪体温分别于36、48、60h后下降至39.5℃以下;2)使用LPS各组仔猪平均日采食量和平均日增重均低于正常组,高于阳性对照组,青蒲颗粒中、高剂量组显著高于膏芩口服液组和青蒲颗粒低剂量组;3)LPS可明显提高仔猪血清中TNF-α、PGE2、MIP-1、IL-1β、IL-6、IL-8含量,第2d开始膏芩口服液组和青蒲颗粒低、中、高组上述细胞因子含量均明显低于阳性对照组,青蒲颗粒各剂量组间表现出剂量依赖性。除青蒲颗粒中剂量组的TNF-α外,青蒲颗粒中、高剂量组上述6种细胞因子含量第2d开始均明显低于膏芩口服液组和青蒲颗粒低剂量组;青蒲颗粒低组MIP-1、IL-8从第2d开始也低于膏芩口服液组。青蒲颗粒中剂量组IL-6从第4d开始以及高剂量组MIP-1从第2d开始,IL-6从第4d开始,IL-1β、IL-8第6d均低于正常对照组。试验四:青蒲颗粒辅助治疗副猪嗜血杆菌病效果观察选取经细菌分离、PCR鉴定确诊为副猪嗜血杆菌病的病猪90头,随机分为3组(氟苯尼考组、青蒲颗粒联合组、膏芩口服液联合组),各组仔猪均肌注氟苯尼考20mg/kg体重,两个联合组分别灌服1mL/kg体重膏芩口服液、1.0g/kg体重青蒲颗粒,每日2次,连续3日。试验期7d,统计疗效。结果显示:青蒲颗粒联合氟苯尼考治疗副猪嗜血杆菌病疗效优于单用氟苯尼考及膏芩口服液联合氟苯尼考的效果。结论:(1)青蒲颗粒以低于5g/kg体重每日灌服2次对仔猪具有良好的安全性;(2)本试验剂量的青蒲颗粒和膏芩口服液可有效抑制LPS(50μg/kg体重)致热仔猪PGE2、TNF-α、MIP-1、IL-1β、IL-6、IL-8的产生,青蒲颗粒组具有剂量依赖效应,且中、高剂量组优于膏芩口服液组;(3)1.0g/kg体重青蒲颗粒联合氟苯尼考治疗副猪嗜血杆菌病,疗效优于单用氟苯尼考。本试验结果表明青蒲颗粒可安全用可于生产实践,推荐剂量为1.0g/kg体重。

来源：

同方学位论文库评论

转基因植酸酶玉米营养成分分析及其对猪的营养价值评定

引用

作者：刘晋生四川农业大学

学位级别：硕士

本文对转基因植酸酶玉米的营养成分及对猪的养分消化率及消化能进行了初步研究,并与非转基因相近品种农大108玉米相比较,以期为这一具有独立自主知识产权的新型品种在猪饲料配制中的合理使用提供数据基础。试验一,对转基因玉米及其... 详细信息

本文对转基因植酸酶玉米的营养成分及对猪的养分消化率及消化能进行了初步研究,并与非转基因相近品种农大108玉米相比较,以期为这一具有独立自主知识产权的新型品种在猪饲料配制中的合理使用提供数据基础。试验一,对转基因玉米及其亲本进行植酸酶活性以及外源导入植酸酶phyA2基因的检测。结果表明,转基因植酸酶玉米样品植酸酶活性均值为7032U/kg干物质,且均有外源导入植酸酶phyA2基因扩增片段;非转基因亲本玉米样品植酸酶活性为126U/kg干物质,且均无外源导入植酸酶phyA2基因扩增片段。试验二,对转基因玉米及其亲本进行营养及抗营养成分分析。结果表明,转基因植酸酶玉米中绝大多数营养成分以及抗营养成分含量与非转基因亲本玉米基本相近。试验三,对转基因玉米及其亲本的能量、氨基酸及磷消化率进行测定。将18头杜×长×大三元杂交公猪（始重25.8±1.46kg）按窝别随机分成2组,每组9头,饲养于单个代谢笼中。分别饲喂非转基因玉米饲粮和转基因玉米饲粮,用于两组玉米消化能和消化率的测定。结果表明,两种玉米除粗蛋白质和粗脂肪表观消化率无显著差异（P＞0.05）外,其他所测指标转基因植酸酶玉米均显著高于非转基因亲本玉米（P＜0.05）;18头杜×长×大三元杂交公猪（始重41.8±3.05kg）按窝别随机分成3组,每组6头,饲养于单个代谢笼中,分别饲喂非转基玉米饲粮、转基因玉米饲粮以及无氮饲粮,用于氨基酸回肠末端表观消化率及标准消化率测定。结果表明,两种玉米中所有氨基酸回肠末端表观消化率和标准消化率均无显著差异（P＞0.05）;18头杜×长×大三元杂交公猪（始重30.5±2.02kg）按窝别随机分成3组,每组6头,饲养于单个代谢笼中,分别饲喂非转基玉米饲粮、转基因玉米饲粮以及无磷饲粮,用于磷表观消化率及标准消化率测定。结果表明,与非转基因亲本玉米相比,转基因植酸酶玉米磷进食量高于非转基因亲本玉米,但粪中磷排泄量显著降低（P＜0.01）,而尿中磷排泄量无明显差异,因此转基因植酸酶玉米中磷吸收量和沉积量均显著（P＜0.01）高于非转基因亲本玉米,表观消化率、标准消化率和沉积率相当于非转基因亲本玉米的2倍多。因此,在猪饲粮配制中,如果用转基因植酸酶玉米替代非转基因玉米,将提高饲粮消化能值和非植酸磷含量,从而减少无机磷源的添加量。

来源：

同方学位论文库评论

复方中药“禽康散”对NDV人工感染鸡预防效果研究

引用

作者：申渝波四川农业大学

学位级别：硕士

为了观察复方中药“禽康散”对人工感染新城疫病毒鸡的预防效果,分别进行了鸡胚体外抗病毒试验和体内预防试验。试验取9～10日龄鸡胚随机分成低、中、高剂量中药预防组,阴性对照组,阳性对照组(每组8枚)。中药预防组将不同生药浓度(0.25... 详细信息

为了观察复方中药“禽康散”对人工感染新城疫病毒鸡的预防效果,分别进行了鸡胚体外抗病毒试验和体内预防试验。试验取9～10日龄鸡胚随机分成低、中、高剂量中药预防组,阴性对照组,阳性对照组(每组8枚)。中药预防组将不同生药浓度(0.25g/mL、0.50g/mL、1.00g/mL)的中药提取液0.1mL接种鸡胚尿囊腔,1h后接种新城疫病毒0.1mL;阴性对照组接种生理盐水0.2mL,阳性对照组接种NDV-F48E9 100倍ELD稀释液0.2mL,观察复方中药对NDV接种鸡胚的抑制作用。试验另选10日龄黄杂仔鸡(不免疫NDV疫苗)400只,随机分为5个组:阴性对照组(不攻毒+基础日粮)、阳性对照组(攻毒+基础日粮),低剂量中药组(攻毒+基础日粮+0.5%“禽康散”)、中剂量中药组(攻毒+基础日粮+1%“禽康散”)、高剂量中药组(攻毒+基础日粮+2%“禽康散”)。每组8个重复(其中3个重复组用于观察发病及死亡情况),每个重复10只鸡。17日龄开始投喂中药日粮,连续饲喂5d后(22日龄)进行人工NDV攻毒。每天观察和记录雏鸡临床表现和死亡情况;分别于饲喂中药前1d、第5d和攻毒后1d、3d、7d、11d进行外周血液免疫球蛋白、ND-HI抗体效价、免疫器官指数、外周血T细胞亚群、红细胞免疫功能。试验结果表明: 1.0.25g/mL、0.5g/mL、1g/mL中药预防组活胚率分别为37.5%、62.5%、100%,阴性对照组活胚率为100%,病毒阳性对照组鸡胚96h内全部死亡。表明复方中药“禽康散”在体外具有明显的抗新城疫F48E9毒株作用,以1g/mL中药浓度抗病毒作用最佳。 2.0.5%、1%、2%中药预防组发病率分别为16.7%、10%、26.7%,死亡率分别为6.7%、3.3%、20%,阴性对照组发病率和死亡率均为0,阳性对照组发病率和死亡率分别为100%和66.7%,表明复方中药“禽康散”对人工感染新城疫病毒鸡具有明显的预防作用,能明显降低发病率和死亡率,其中以添加1%中药剂量效果最佳。 3.复方中药“禽康散”可有效的降低NDV对鸡胸腺、脾脏和法氏囊等免疫器官的损伤,增加免疫器官指数;降低接种新城疫病毒引起的抗体水平;提高T细胞亚群CD3、CD4的含量和CD4/CD8的比值;提高免疫球蛋白中IgG、IgA和IgM的含量;促进红细胞免疫功能的提升。因此,复方中药“禽康散”能显著增加鸡的细胞免疫功能和体液免疫功能,从而增强机体的抗病毒能力,其中以0.5%～1.0%对各指标影响最明显。 4.复方中药“禽康散”对人工感染新城疫病毒鸡具有明显的预防作用,以0.5%～1.0%效果最佳。

来源：

同方学位论文库评论

p53乙酰化和氧化应激在高铜诱导小鼠下丘脑神经细胞线粒休自噬中的作用研究

p53乙酰化和氧化应激在高铜诱导小鼠下丘脑神经细胞线粒休自噬中...

引用

作者：朱松四川农业大学

学位级别：硕士

来源：

同方学位论文库评论

牛抵抗素基因的真核表达及生物学活性鉴定

引用

作者：黄文华四川农业大学

学位级别：硕士

抵抗素是一种由白色脂肪组织的脂肪细胞分泌的新型小分子蛋白,是联系肥胖和2型糖尿病的纽带,可减弱脂肪细胞、骨骼肌细胞、肝细胞胰岛素的敏感性。国内外,抵抗素引起胰岛素抵抗的研究主要集中在小鼠和人,且机制研究尚无一致结论。而牛... 详细信息

抵抗素是一种由白色脂肪组织的脂肪细胞分泌的新型小分子蛋白,是联系肥胖和2型糖尿病的纽带,可减弱脂肪细胞、骨骼肌细胞、肝细胞胰岛素的敏感性。国内外,抵抗素引起胰岛素抵抗的研究主要集中在小鼠和人,且机制研究尚无一致结论。而牛抵抗素与胰岛素抵抗的关系研究少之又少,已有牛抵抗素基因的原核表达、酮病牛抵抗素基因的真核表达的相关报道。但抵抗素基因真核表达产物有无活性,尚未见报道。本研究分别进行了牛抵抗素基因克隆、真核表达及表达产物生物学活性研究,为临床治疗动物糖代谢紊乱性疾病提供了科学依据。试验从18月龄牛腹部脂肪组织中提取总RNA、反转录及PCR扩增,凝胶电泳鉴定后连接T载体,再进行PCR和双酶切鉴定后送上海生工生物工程有限公司测序。结果用RT-PCR扩增获得了343bp的牛抵抗素基因的cDNA编码序列;成功将牛抵抗素基因克隆至pMD18-T载体上,构建了pMD-Res重组克隆质粒;所获得的目的基因大小为343bp,与Genbank中牛抵抗素基因的序列同源性为99%,表明所获得的基因为牛抵抗素编码基因。设计真核表达引物,进行PCR扩增,连接T载体,进行双酶切鉴定后连接真核表达载体pPICZaA,进行PCR和双酶切鉴定后测序。然后将成功构建的真核表达质粒线性化,转到酵母中进行基因重组,经表型和PCR双重筛选后进行表达条件的优化,进行酵母工程菌的增量表达,应用Dot-blot、SDS-PAGE和western-blot鉴定,浓缩纯化,得到纯化蛋白。试验结果表明成功构建出了牛抵抗素基因真核表达质粒(pPICZaA-resistin);经过表型筛选和PCR筛选,得到5株整合成功的菌株;牛抵抗素真核表达体系的条件优化是甲醇浓度1.0%、表达时间72h,提高了蛋白表达量;经过Dot-blot筛选,得到1株特别好的重组酵母表达菌株;成功表达出牛抵抗素蛋白,分子量为14KD,并获得重组牛抵抗素蛋白。试验选取体重相似(约100±10g)的4周龄wistar大鼠20只,随机分成4组,每组5只。第Ⅰ组(自由进食,注射不含重组牛抵抗素的PBS)、第Ⅱ组(自由进食,注射含1：1重组牛抵抗素的PBS)、第Ⅲ组(禁食2d,注射不含重组牛抵抗素的PBS)、第Ⅳ组(禁食2d,注射含1：1重组牛抵抗素的PBS)。四个组均在Ⅲ、Ⅳ组小鼠开始禁食时,均同时注射上述药物(每次1.5mg/只,每隔12h注射一次,连续注射4次)。在最后一次注射(48h时)后,立即尾静脉采血记为(0min),以后在15mmin、30mmin、60min、120min和180min分别采集全血,检测血糖和胰岛素含量。实验结果表明重组牛抵抗素不论对自由进食或禁食2d大鼠的血糖浓度和胰岛素水平均具明显提高作用,说明重组牛抵抗素具有明显的生物学活性。取培养良好的肝细胞培养板(6孔板),每孔分别接种重组牛抵抗素0、10、50、100、300、500ng/L(共6个梯度,共6个重复),继续培养12h,PBS洗涤细胞,然后超声破碎,收集上清,采用考马斯亮蓝染色法测定上清液中牛抵抗素蛋白的含量。每管上清中取出100μl加入基质缓冲液37℃恒温水浴8min,加入1.5mmol/L的草酰乙酸100μl,在酶标仪上读取340nm处的吸光度,根据蛋白含量及吸光度计算PEPCK酶(磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶)的比活性。结果表明PEPCK酶活性随重组牛抵抗素浓度的升高而增强,10ng/L以上的重组牛抵抗素可明显提高PEPCK活性,再次证明重组牛抵抗素具有明显的生物学活性。综上所述,本研究成功地克隆了牛抵抗素基因,成功构建出了牛抵抗素基因的真核表达质粒,表达产物(重组牛抵抗素蛋白)具有明显的生物学活性。

来源：

同方学位论文库评论

隐孢子虫棒状体cgd82530蛋白sushi片段亚单位疫苗和核酸疫苗的制备及其免疫保护性研究

隐孢子虫棒状体cgd82530蛋白sushi片段亚单位疫苗和核酸疫苗的制...

引用

作者：石凯四川农业大学

学位级别：硕士

顶复门原虫是一类专性的细胞内寄生原虫,包括刚地弓形虫、隐孢子虫、疟原虫、巴贝斯虫和球虫等,是人和动物的重要病原。这类原虫具有相似的亚细胞结构并能分泌与入侵相关的保守蛋白,尤其是在入侵宿主细胞阶段分泌的棒状体蛋白(rhoptry p... 详细信息

顶复门原虫是一类专性的细胞内寄生原虫,包括刚地弓形虫、隐孢子虫、疟原虫、巴贝斯虫和球虫等,是人和动物的重要病原。这类原虫具有相似的亚细胞结构并能分泌与入侵相关的保守蛋白,尤其是在入侵宿主细胞阶段分泌的棒状体蛋白(rhoptry proteins, ROPs)被认为是协助寄生虫入侵和繁殖的关键分子。微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)属专性肠道寄生性原虫,在免疫功能正常的宿主通常是自限性的。但免疫缺陷的宿主感染后,如艾滋病患者等则可能危及生命。目前,尚未见报道有效治疗隐孢子虫感染的药物,因此,疫苗是未来防控本病的重要策略之一。本研究根据Cryptodb数据库(http://***/cryptodb/)中登录的微小隐孢子虫棒状体蛋白cgd8530编码基因中的sushi结构域基因片段序列(共708bp)设计引物,利用PCR技术将该基因片段从微小隐孢子虫基因组DNA中扩增出来,然后连接到原核表达载体pET28a (+)上,构建重组表达质粒pET-sushi并转化到大肠杆菌BL21 (DE3)中进行诱导表达。结果显示,sushi结构域基因在大肠杆菌中高效表达。将纯化的重组蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,Western blot分析显示重组蛋白能被微小隐孢子虫sushi结构域基因重组表达蛋白免疫兔血清识别,表明表达的重组蛋白具有较好的反应原性和免疫原性。将sushi基因片段连接到pVAXl质粒,成功构建了真核重组表达质粒pVAX-sushi,与sushi亚单位疫苗共同免疫ICR小鼠,并设置健康组、空白组、TE组、pVAX1质粒组、佐剂组,对各组诱导的免疫应答指标进行了检测比较;,观察ICR小鼠感染泰泽隐孢子虫(***)后的免疫保护效果。结果显示,sushi亚单位疫苗组ICR小鼠血清中特异性IgG抗体、脾脏CD4+和CD8+T淋巴细胞数量、淋巴细胞增殖及各细胞因子IFN-γ、TNF、IL-4、IL-5、IL-12p70等免疫水平均显著增高,表明亚单位疫苗能诱导小鼠产生Th1/Th2混合型免疫反应。减卵实验显示,亚单位疫苗免疫组无排卵高峰;排卵量明显减少,减卵率可达89%,表明制备的sushi亚单位疫苗能明显地诱导小鼠产生特异性免疫应答,对隐孢子虫感染具有良好的免疫保护作用。而pVAX-sushi试验组CD4+和CD8+T淋巴细胞的数量、淋巴细胞增殖及各细胞因子指标也呈现显著升高的趋势,可以产生Th1/Th2混合型细胞免疫反应,但明显低于亚单位疫苗组：血清中特异性IgG抗体水平与其他对照组比较无显著差异性变化;小鼠排卵囊数量少于空白对照组,与其他对照组相比差异并不显著,表明pVAX-sushi免疫不能产生有效的保护性免疫反应。本研究构建了隐孢子虫cgd8530蛋白sushi结构域亚单位疫苗和核酸疫苗,观察了亚单位疫苗和核酸疫苗的免疫保护效果,有益于隐孢子虫病疫苗的研制,为研制隐孢子虫病疫苗提供了基础。

来源：

同方学位论文库评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：