检索结果-南通市图书馆

作者：陈琛上海师范大学

学位级别：硕士

蕨类植物,由于其独特的演化位置和形态结构的多样性,在植物界具有非常重要的地位。其中,水蕨被用作研究遗传,生物学,细胞学,分子生物学的模式物种。近年来,蕨类植物越来越受到人们的关注,随着分子生物学技术在种子植物中应用不断的完善... 详细信息

蕨类植物,由于其独特的演化位置和形态结构的多样性,在植物界具有非常重要的地位。其中,水蕨被用作研究遗传,生物学,细胞学,分子生物学的模式物种。近年来,蕨类植物越来越受到人们的关注,随着分子生物学技术在种子植物中应用不断的完善和成熟,人们也开始用这方面的方法和技术探究蕨类植物生长发育和代谢的分子机制。本文正是在这样的背景下,从分子水平上对水蕨进行研究,应用基因工程技术,采用RACE方法克隆了水蕨的Fe-SOD基因,转入大肠杆菌中进行表达。并对表达蛋白进行了纯化,鉴定。同时,通过胁迫水蕨配子体在不同环境的生长,检测水蕨中Fe-SOD的功能。本研究通过简并引物,首先从水蕨中得到一个458bp的Fe-SOD核心片段。再通过RACE的方法,分别进行5’RACE和3’RACE,得到5’和3’两个亚克隆,分别获取了382bp的5’端片段和691bp的3’端片段。最后通过已知的序列设计特异性引物,克隆得到1212bp的Fe-SOD的完整序列,该序列编码266个氨基酸。通过生物信息学分析可以看出,此Fe-SOD的核酸序列与其他植物的序列具有较高的同源性。该酶的氨基酸序列中含3个Fe-SOD的保守序列:FNNA、FGSGW、WEHAYY。同时与其他植物的Fe-SOD氨基酸序列也具有很高的同源性。将该Fe-SOD目的片段与pET32a载体连接后转化入大肠杆菌BL21,之后用1mM的IPTG诱导6h,表达形成一个大小43KD的蛋白,与预计大小符合。得到的重组蛋白经过纯化后制备抗体,将该抗体应用于检测水蕨逆境胁迫下的Fe-SOD的表达。水蕨配子体在低温胁迫4℃下持续处理72小时候后,通过Western-blotting检测发现,在8小时到12小时之间,Fe-SOD的表达量达到最高,而此后骤然下降,说明当植物在寒冷环境下时,Fe-SOD在发挥作用,随着胁迫时间的延长表达量增大,但是当24小时候后,表达量明显下降,因为此时水蕨配子体的整体开始萎蔫。而72小时候,部分的配子体已经死亡或停止生长,所以此时Fe-SOD的表达量也已经非常小了。也就是说,Fe-SOD在一定时间内可以帮助植物抵御不良环境,但并不能长时间有效。水蕨配子体在不同的光照胁迫下处理24小时候后,虽然这些配子体从外形来看并没有明显差异,但通过Western-blotting检测发现,无论配子体处于是低光照还是高光照条件下,Fe-SOD的表达量都有所上升,而在培养箱光照强度下,Fe-SOD的表达量相对较小,说明光照过高或者过低对植物体来说都是一种不良的刺激,低光照会导致光照不足,而高光照会造成光抑制。在这样的情况下植物体内会过多的产生氧自由基。此时Fe-SOD发挥作用清除植物体内由于受到过强或过低光照而产生的氧自由基,故而表达量增高,以保护细胞免受伤害,帮助植物抵御不良环境。蕨类植物作为植物界中重要过渡的类群,是研究进化不可缺少的重要环节。另外,蕨类植物中还有许多非常重要植物类群,有的是珍贵的药用植物,有的是特殊的抗逆植物,研究这些蕨类植物的功能基因以及代谢途径对医学,农业,食品,等方面都具有重要价值,对人类的生产和发展,既有重要意义。.但是目前蕨类植物中还未有成熟的转化体系,给蕨类的分子机制和功能基因研究带来了一定的困难。同时蕨类中已知的序列信息相对比较少,也是其分子生物学研究进展相对较慢的原因之一。本研究得带的成果为蕨类的功能基因研究提供了一定的数据和参考。

关键词：水蕨 Fe-SOD RACE 低温胁迫光照胁迫

红盖鳞毛蕨查尔酮合成酶基因的克隆与功能分析

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红盖鳞毛蕨查尔酮合成酶基因的克隆与功能分析

作者：谢颖华上海师范大学

学位级别：硕士

红盖憐毛蕨（ZJ/yoprmi(Eaton) O. Ktze)是药用蕨类植物，含有丰富的黄酮类化合物，具有抗病毒、抗肿瘤、抗菌消炎等功能。目前对于红盖鳞毛蕨黄酮类化合物的研宄集中在含量的测定和种类分析上，对于影响黄酮含量和形成的内外因素尚无... 详细信息

红盖憐毛蕨（ZJ/yoprmi(Eaton) O. Ktze)是药用蕨类植物，含有丰富的黄酮类化合物，具有抗病毒、抗肿瘤、抗菌消炎等功能。目前对于红盖鳞毛蕨黄酮类化合物的研宄集中在含量的测定和种类分析上，对于影响黄酮含量和形成的内外因素尚无系统的研究。在自然条件下，季节变化对黄酮含量有明显的影响，然而此方面的研究尚无报道。有关蕨类植物中黄酮类化合物生物合成途径己经起步，目前已经在蕨类中克隆到查尔酮合成酸(chalcone synthase, CHS)基因，但仍没有对其功能的分析。棊于以上的背景，本研宄获得以下两方面的结果。1.对红盖鳞毛蕨的羽片、叶轴、根和茎（根茎）的总黄酮含量和抗氧化活性进行季节动态分析。红盖鳞毛蕨各部位总黄酮含量均表现出明显的季节动态变化。羽片中平均黄酮含量只有2.01%,最低含量为0.78%,而茎中黄酮含量为4.3%-12.5%,明显高于羽片中黄酮含量。在春季，茎中黄酮含量相对较低，但是在夏季含量迅速增加，在秋季和冬季都具有较高的含量。而羽片中黄酮含量变化则表现相反的规律，在春季羽片黄酮含量升高但是到夏季后黄酮含量明显下降，随后含量-直处于较低的水平。因此，茎和羽片中的黄酮含量在季节变化上表现出明显的负相关关系。羽片、叶轴、根和茎的黄酮类化合物提取液的抗氧化活性也随着不同采集时间、不同含量而表现不同的清除能力。一般而言，茎的黄酮类化合物提取液抗氧化能力最强，可以选取茎作为药用部位。2.对红盖鳞毛蕨的查尔酮合成酶进行基因的克隆与功能分析。以孢子体中提取的RNA、DNA为模板，通过PCR技术获得红盖鳞毛蕨的查尔酮合成酶基因ORF序列和基因组序列。生物信息学分析表明，该基因ORF区为1212bp,编码403个氨基酸，含有一个内含子并且遵循gt/ag剪切规则。BLAST序列比对发现本实验所获得CHS基因与其它物种的该基因序列具有较高的同源性，构建进化树进行同源性分析，表明红盖鳞毛蕨CHS基因与渐尖毛蕨、槐叶萍、水蕨等蕨类的CHS基因亲缘关系更近。蛋白序列比对表明红盖鳞毛蕨CHS蛋白具有C170314ys, His, A347sn等CHS活性位点和G383FGPG信号序列。将CHS目的片段与PET32a载体连接构建原核表达载体转化到大肠杆菌BL21中，使用IPTG诱导蛋白表达，进行SDS-PAGE分析和Western blotting验证，红盖鳞毛蕨CHS基因在大肠杆菌中得到表达，形成了一个大小为63KD的蛋白，与预期结果相符合。体外酶活实验验证了原核表达的红盖鳞毛蕨CHS蛋白具有活性，能催化底物生成柚皮素。综上所述，红盖鳞毛蕨各部分总黄酮含量呈现明显的季节动态变化，春季羽片中黄酮含量较高，可采集羽片加以利用，其它季节茎中黄酮含量较高，可采集茎使用。CHS是红盖鳞毛蕨黄酮类化合物生物合成途径中的关键酶，功能分析表明原核表达的红盖鳞毛蕨CHS蛋白具有活性。本研究为蕨类植物黄酮类化合物生物合成途径的研究奠定了基础，对揭示蕨类植物中黄酮类化合物合成的调控机制也具有重要意义。

关键词：查尔酮合成酶红盖鳞毛蕨黄酮类化合物 PCR

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淀山湖浮游植物与环境因子的相关性研究

淀山湖浮游植物与环境因子的相关性研究

作者：蓝天上海师范大学

学位级别：硕士

淀山湖作为上海市最大的天然淡水湖泊，是黄浦江上游水源保护区的重要组成部分。近年来，淀山湖富营养化程度不断加剧，尤其是夏季蓝藻水华的暴发，严重影响了湖泊生态系统的健康和生态功能的发挥，水环境安全受到了严重威胁。我们于201... 详细信息

淀山湖作为上海市最大的天然淡水湖泊，是黄浦江上游水源保护区的重要组成部分。近年来，淀山湖富营养化程度不断加剧，尤其是夏季蓝藻水华的暴发，严重影响了湖泊生态系统的健康和生态功能的发挥，水环境安全受到了严重威胁。我们于2012年8月到2013年12月期间，对淀山湖进行了全面的浮游植物采样调查。在淀山湖水域共选取了12个采样点，每月采样一次，其中夏季的7月和8月每月采样两次，共计采样19次。对淀山湖各样点的浮游植物种类组成、数量变化、优势种等进行了研究，同时对浮游植物群落结构与水体理化因子之间的相关性进行了分析，得出影响浮游植物群落分布的关键因子。还依据浮游植物群落生态功能分组学说，结合淀山湖浮游植物生境的综合特征及其季节变化，分析得出淀山湖浮游植物生态功能组的群落演替同生境变化的相互关系。并对夏季蓝藻暴发期间的水体微囊藻毒素MC-LR进行检测，为淀山湖的富营养化管理和水华预测提供基础数据。主要结果如下：1、2012年8月-2013年12月期间，淀山湖共鉴定出浮游植物142个种（变种），隶属于7门56属。其中绿藻门共发现28属60种，占总数的43%;硅藻门14属32种，占总数的20%;蓝藻门6属22种，占总数的13%;裸藻门3属14种，占总数的8%;其余鉴定出的种类还包括：金藻门4属5种，甲藻门2属4种，隐藻门2属5种。2、浮游植物平均数量变化范围在180-2435万个/L之间，上下波动的幅度较大。浮游植物数量最大值出现在2013年8月的5号样点，达到3368.15万个/L，最小值出现在2013年2月的4号样点，为33.75万个/L;重量生物量最高为2013年8月的7号样点，达到16.61mg/L，最低为2013年1月的4号样点，只有0.13mg/L。浮游植物数量从2012年8月至2013年2月，呈现逐月下降的趋势;从2013年2月至2013年8月，转变为逐渐升高的走势。浮游植物的平面分布具有一定的规律，即呈现出自西北向东南逐渐减少的趋势。3、淀山湖浮游植物优势种随着时间变化具有明显的演替特点，全年优势种有尖尾蓝隐藻（Chroomonas acuta）、小环藻（Cyclotella sp.）、细小平裂藻（Merismopedia minima）、鱼腥藻（Anabaena sp.）;各个季节出现的优势种各有不同，存在明显的季节演替现象。4、对淀山湖所观察到的浮游植物进行功能分组，共得出21个浮游植物功能组，统计各功能组在淀山湖的出现频率，得出B、P、D、X1、X2、J、L0、MP组有着较高的出现频率，并且占有较高的丰度比例。而E、XPH、N组的浮游植物只在特定的季节出现。随着季节变化所引起的淀山湖水体环境状况的改变，浮游植物功能组存在显著的演替规律。春季浮游植物功能组为C、P、B、LO型（以平裂藻、星杆藻为代表），夏季演替为LM、P、G、J、L0型（以微囊藻、实球藻、栅藻为代表），秋季演替为W2、Y、MP、X1型（以裸藻、异极藻、舟形藻、纤维藻为代表），最终演替为冬季的E、Y、B型（以锥囊藻、隐藻为代表）。5、于淀山湖夏季7、8、9月藻类暴发期，检测湖区微囊藻毒素MC-LR的含量。结果显示，在8月水面明显可见条带状藻类聚集区域，检测出少量毒素存在，其平均含量约为0.34ug/L，低于世界卫生组织（WHO）建议的饮用水藻毒素1ug/L标准值。6、利用典范对应分析CCA结果显示，水温、透明度、溶解氧、总氮、总悬浮固体颗粒物是影响浮游植物群落结构分布的主要因子，而pH值、总磷、盐度等对浮游植物影响较小。

关键词：淀山湖浮游植物环境因子

滴水湖浮游植物优势种群演替及与外围水体的比较研究

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滴水湖浮游植物优势种群演替及与外围水体的比较研究

作者：孙博伟上海师范大学

学位级别：硕士

滴水湖位于上海市浦东新区临港新城内,是临港新城水系的核心。滴水湖在塑造城市景观生态,优化地区小气候环境起着相当重要的作用,它的水质直接关系到临港新城未来的城市发展和旅游观光。近几年,外围水体的水不再流入湖区,主要靠天然降... 详细信息

滴水湖位于上海市浦东新区临港新城内,是临港新城水系的核心。滴水湖在塑造城市景观生态,优化地区小气候环境起着相当重要的作用,它的水质直接关系到临港新城未来的城市发展和旅游观光。近几年,外围水体的水不再流入湖区,主要靠天然降雨补水,但附近水环境的好坏也会影响到滴水湖的水质状况。2016年1月至2017年12月,本实验室对滴水湖及外围水体的浮游植物进行了全面的采样调查研究,比较分析了滴水湖及其外围水体浮游植物群落结构的差别与联系,且本研究结合本实验自2006年以来的滴水湖浮游植物调查情况,探讨滴水湖浮游植物群落演替情况,并分析滴水湖浮游植物主要的优势种群与理化因子的相关性,为滴水湖的水质保护和未来旅游开发提供了生物学依据。主要结果如下:1.2016年1月-2017年12月期间,滴水湖湖区共鉴定浮游植物102种,隶属于8门57属。浮游植物平均数量生物量为360.75×10ind/L,平均重量生物量为2.47mg/L。浮游植物优势种主要有:蓝藻门的细小平裂藻(Merismopedia minima)和伪鱼腥藻(Pseudanabaena sp.),绿藻门的球衣藻(Chlamydomonas globosa)和拟配藻(Spermatozopsis sp.),硅藻门的小环藻(Cyclotella sp.),江河骨条藻(Skeletonema potamos),隐藻门的啮蚀隐藻(Cryptomonas erosa)和尖尾蓝隐藻(Cryptomonas acuta),金藻门的小色金藻(Chromulina pygmaea)。滴水湖湖区各采样点的浮游植物群落结构差别不大。2.2016年1月-2017年12月期间,滴水湖外围共鉴定浮游植物167种,隶属于8门80属。浮游植物平均数量生物量为1071.24×10ind/L,平均重量生物量为6.13mg/L。外围水体浮游植物优势种主要有:蓝藻门的微囊藻(Microcystis sp.)、细小平裂藻(Merismopedia minima)、伪鱼腥藻(Pseudanabaena sp.)、颤藻(Oscillatoria sp.),金藻门的小色金藻(Chromulina pygmaea)、黄群藻(Synuraceae urella),甲藻门的裸甲藻(Gymnodinium sp.),硅藻门的小环藻(Cyclotella sp.)、变异直链藻(Melosira varians)、江河骨条藻(Skeletonema potamos),绿藻门的四鞭藻(Carteria sp.)、球衣藻(Chlamydomonas globosa)、二形栅藻(Scendesmus dimophus)、衣藻(Chlamydomonas sp.)、拟配藻(Spermatozopsis sp.),隐藻门的啮蚀隐藻(Cryptomonas erosa)和尖尾蓝隐藻(Cryptomonas acuta)。3.根据滴水湖浮游植物数量生物量的差异,采用SPSS软件进行聚类分析,将滴水湖及其外围水体划分为5种水体类型;5种生境浮游植物种类数及浮游植物群落结构差异较大;浮游植物数量表现为湖区最低,农场中心河最高;从浮游植物群落结构和理化因子的对比分析可以得出,湖区与外围各类型水体差异较大。4.结合实验室2006年至2017年的滴水湖浮游植物的调查,主要结果如下:从滴水湖浮游植物种类数变化来看,在2009年达到最高,之后种类数在82-102种之间。浮游植物生物量呈降低的趋势,2006年浮游植物生物量为41.41mg/L,到2017年,仅为2.59mg/L。从滴水湖的浮游植物优势种变化看,2006-2008年,小色金藻(Chromulina pygmaea)为长年优势种,在此期间,蓝藻门生物量也较高;2009-2013年,甲藻门的裸甲藻(Gymnodinium sp.)成为优势种,从2009年开始,隐藻门的尖尾蓝隐藻(Cryptomonas acuta)、啮蚀隐藻(Cryptomonas erosa)生物量上升;2015年出现了江河骨条藻(Skeletonema potamos),且成为滴水湖的优势种;目前,滴水湖的生物群落结构逐步稳定,浮游植物的种类组成、生物量、各门生物量的比例、各个季节的优势种也逐步稳定。分析滴水湖浮游植物优势种演替的主要环境因子得出,影响浮游植物优势种长期演替的主要环境因子是Sal、COD和pH;影响浮游植物季节演替的主要环境因子是WT、TP;在滴水湖水生态系统的长期演替中,随着滴水湖的盐度和酸碱度下降,耐盐耐碱种类减少,淡水种类增多;滴水湖的营养盐浓度上高,而浮游植物生物量却减少,这说明生物治理对控制浮游植物起到了至关重要的作用。

关键词：浮游植物群落结构聚类分析优势种演替滴水湖 SPSS

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近盐骨条藻的形态、分类及生理研究

近盐骨条藻的形态、分类及生理研究

作者：陈婉婉上海师范大学

学位级别：硕士

骨条藻（Skeletonema）是一类广泛分布在近海海岸的浮游硅藻,大量繁殖可引起赤潮。以往对我国骨条藻的研究绝大多数都是以中肋骨条藻（***）为主,种类单一。而对于淡水水体中骨条藻的形态特征、分类位置、生态特点及地理分布研究甚少。... 详细信息

骨条藻（Skeletonema）是一类广泛分布在近海海岸的浮游硅藻,大量繁殖可引起赤潮。以往对我国骨条藻的研究绝大多数都是以中肋骨条藻（***）为主,种类单一。而对于淡水水体中骨条藻的形态特征、分类位置、生态特点及地理分布研究甚少。且淡水骨条藻种间形态差异相对较小,光镜下难以辨别,需要通过电镜观察并结合分子生物学手段,增加了淡水骨条藻分类的难度。近年来,在对上海市主要水体进行浮游植物监测时,我们发现了一种骨条藻逐渐成为水体的优势种,为了明确该种骨条藻的分类地位,本研究对采自滴水湖的骨条藻进行分离纯化培养,通过光镜和电镜下的形态观察,并结合三种分子标记基因比对结果,将其确认为近盐骨条藻（***）;选用三种标记基因核糖体LSU nrDNA、ITS片段（5.8s rDNA及转录间隔区）、线粒体编码细胞色素C氧化酶基因I（COXI）对其进行遗传多样性及系统进化研究,分析骨条藻属的种内和种间株系差异以及系统进化关系,并比较得出骨条藻属种类鉴定的最适标记基因;本论文还探讨了不同温度、光照和盐度对近盐骨条藻生长的影响,以及不同盐度对该种形态结构的影响,并且结合国内外报道以及本实验室近年的研究,分析讨论了近盐骨条藻的地理分布情况。本研究为骨条藻属种类的分类、生理特性及生理分布等方面研究提供重要资料。主要研究结果如下:1.本研究对上海市滴水湖的优势种骨条藻进行纯培养,利用形态学和分子生物学手段结合的方法,鉴定该种为近盐骨条藻。该种主要的形态特征是:光镜下,细胞呈长方形,色素体1—2个,细胞间距不明显。壳缘有一圈支持突,与相邻细胞的对应支持突相接,组成直或弯曲的长链;电镜下壳面直径3—6μm,壳面平缓,网孔大多呈矩形在壳面上辐射状排列,纵向1μm内3—4个,横向1μm内5—7个。外壳面肋纹边缘高度硅质化,网孔为伪室,有外孔。中间支持突（IFPP）末端不规则扩张,7—13个,以波状边缘与相邻细胞的中间支持突紧紧相连,连接方式为1:1或1:2。唇形突（IRP）位于壳面边缘,在内壳面,支持突开孔被三个卫星孔包围。2.本研究分析了近盐骨条藻株系基于三种标记基因的遗传多样性以及系统进化位置,发现该种与中肋骨条藻和江河骨条藻构成一个姐妹群;此外,分析得出在三种标记基因中,线粒体编码细胞色素氧化酶C（COXI）最适合作为该属种间差异分析。3.由于骨条藻属大多为海水种,生境多为海域或者河口,而本研究的骨条藻种类是在湖泊中发现的,因此我们研究了盐度对于近盐骨条藻形态的影响。实验设置了不同盐度梯度（0—10‰）,结果表明:盐度在0—10‰之间,壳面直径变化不大,大小在3—6μm间波动;细胞贯长轴长度随着盐度增加,明显变短,但盐度增加至2‰以后,变化不明显;支持突随着盐度增加（0—8‰）,逐渐增长,且相关性显著,但盐度在8‰以上时,支持突长度基本不变。4.国内外关于近盐骨条藻的研究较少,尚未有该种的生理特性研究。因此本研究探索了近盐骨条藻最适的生长条件。实验表明,近盐骨条藻适宜生长的温度范围是20—30℃,最适温度为25℃,温度在35℃对其生长有一定抑制作用,该种在较低温度下可以进行低速率生长;近盐骨条藻适合在60—90μmol/（m~2·s）之间的中等强度光照下,强光照对就近盐骨条藻的生长具有一定抑制作用;该种适宜生长在低盐度下,盐度接近0‰,盐度大于5‰时,细胞也可生长,但是生长缓慢,盐度在10‰以上,几乎不生长。

关键词：近盐骨条藻形态学系统发育生理实验

基于转录组测序的石斛黄酮类化合物生物合成相关基因的克隆与表达分析

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基于转录组测序的石斛黄酮类化合物生物合成相关基因的克隆与表达...

作者：伊秀娟上海师范大学

学位级别：硕士

铁皮石斛(Dendrobium catenatum Lindley),兰科石斛属多年生草本植物,是《中国药典》收载的正品石斛之一。黄酮类化合物为铁皮石斛的次生代谢物质,是重要的药效成分,具有抗氧化、抗衰老、抗病毒等功效,同时也是植物自身抗病、抗逆的主... 详细信息

铁皮石斛(Dendrobium catenatum Lindley),兰科石斛属多年生草本植物,是《中国药典》收载的正品石斛之一。黄酮类化合物为铁皮石斛的次生代谢物质,是重要的药效成分,具有抗氧化、抗衰老、抗病毒等功效,同时也是植物自身抗病、抗逆的主要成分。目前对铁皮石斛黄酮类化合物的研究主要集中在成分鉴定和种类分析上,对其生物合成途径的研究还相对较少。本文以为石斛黄酮类化合物代谢途径的研究提供依据为目的,主要从三个方面进行研究,主要研究结果如下:1.铁皮石斛转录组测序对人工栽培的普通和紫色植株叶进行转录组测序分析。应用Illumina Hiseq 2000测序平台共得到独立基因64,195个,总长度,平均长度,N50以及GC含量分别为66,479,063 bp,1,035 bp,1,742 bp和42.47%;被注释到KEGG功能数据库的独立基因占35.92%。以普通叶为对照进行差异表达分析,得到差异表达基因7177个,其中表达为上调的有3155个,下调4022个,与黄酮类化合物合成相关的差异基因有13个,选取差异表达明显且表现为上调的查尔酮合成酶(CHS)、黄烷酮-3-加氧酶(F3H)和二氢黄酮醇-4-还原酶(DFR)基因进行克隆和表达研究。2.铁皮石斛查尔酮合成酶基因的克隆及原核表达以转录组测序结果为参照,选取差异表达明显的查尔酮合成酶基因进行研究。通过同源克隆和RACE技术相结合的方法,克隆得到了查尔酮合成酶基因的cDNA全长,命名为DcCHS(GenBank登录号为KR078267)基因。DcCHS基因全长1311bp,开放阅读框1188bp,编码395个氨基酸,预测相对分子质量为43.14Kda。BLAST和氨基酸序列多重比对结果显示Dc CHS基因编码的氨基酸与其他物种的同源度较高;系统进化同源性分析,显示Dc CHS基因与兰科植物(如白苇兰属)聚为一支,属于Orchid CHS group 1的成员,处于较高的进化地位;成功构建原核表达载体pET32a-DcCHS,利用IPTG诱导pET32aDcCHS在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达并进行SDS-PAGE分析,结果显示产生了一个大小为43KD左右的蛋白,与预期结果相符合。利用高效液相色谱法对表达的蛋白产物进行酶活鉴定,结果显示pET32a-Dc CHS原核表达产物具有查尔酮合成酶的活性。***、Dc F3H、DcDFR基因的定量表达分析克隆Dc F3H和DcDFR基因的保守序列,并对Dc CHS、DcF3H、DcDFR基因进行荧光定量PCR分析。以普通植株叶为对照,发现三个基因在紫色植株中的表达量高于普通植株,并且在叶中的表达量高于茎,而在原球茎和组培苗中的表达量较少,这与转录组测序结果相一致。

关键词：铁皮石斛黄酮类化合物转录组测序基因克隆荧光定量

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新疆管壳缝目硅藻的初步研究

新疆管壳缝目硅藻的初步研究

作者：李海玲上海师范大学

学位级别：硕士

新疆位于我国西北部，面积166万多平方公里，是我国面积最大的省区。我们于2001年7月至8月期间对新疆4个地区3个自治州1市的17个采集点进行了藻类标本采集，共采集到标本144号。经鉴定分析，发现管壳缝目硅藻63种30变种1变型，共94个分... 详细信息

新疆位于我国西北部，面积166万多平方公里，是我国面积最大的省区。我们于2001年7月至8月期间对新疆4个地区3个自治州1市的17个采集点进行了藻类标本采集，共采集到标本144号。经鉴定分析，发现管壳缝目硅藻63种30变种1变型，共94个分类单位，隶属于3科10属。其中窗纹藻科有3属，有细齿藻属2种，窗纹藻属6种8变种，棒杆藻属5种4变种;菱形藻科3属，有杆状藻属1种，菱板藻属3种4变种1变型，菱形藻属28种7变种;双菱藻科4属，有波缘藻属3种3变种，双菱藻属13种4变种，长羽藻属、马鞍藻属各1种。在这些种类中，属于中国新记录的有14种5变种，属于新疆新记录的有4属45种20变种1变型。同时，我们对管壳缝目硅藻的生态分布特征作了简要的分析。发现管壳缝目硅藻的分布受区域气候、地理位置等的影响并不显著，而受所处水体的小环境的影响较为明显，在临时性水体以及湖边渗出水、沼泽中管壳缝目硅藻的种类多，数量也多;而在溪流、河水、湖水等水体中种类和数量都很少。在种类组成上，普生性种类、适碱性种类丰富，固着种类多;淡水、半咸水种类广泛分布，喜盐种类突出;真性浮游种类少。

关键词：管壳缝目窗纹藻科菱形藻科双菱藻科硅藻分类生态分布新疆

滴水湖及其外围水体浮游动物群落结构比较研究

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滴水湖及其外围水体浮游动物群落结构比较研究

作者：周晓梅上海师范大学

学位级别：硕士

滴水湖位于上海市临港新城,是国内最大的人工湖,也是港城水系的核心。滴水湖在塑造城市景观生态,优化地区小气候环境起着相当重要的作用,它的水质好坏直接关系到港城未来城市的发展和旅游观光,同时间接反映出上海市水环境的安全现状。... 详细信息

滴水湖位于上海市临港新城,是国内最大的人工湖,也是港城水系的核心。滴水湖在塑造城市景观生态,优化地区小气候环境起着相当重要的作用,它的水质好坏直接关系到港城未来城市的发展和旅游观光,同时间接反映出上海市水环境的安全现状。滴水湖的水源来自附近水体,附近的水体环境的好坏也会影响到滴水湖水质状况。2008年至2009年对滴水湖的浮游动物进行了调查研究,并从2009年3月起,增加对滴水湖的外围水体进行采样研究,比较分析滴水湖及外围水体浮游动物群落结构的差别与联系,进一步探讨滴水湖浮游动物群落演变情况,并对滴水湖及外围水质状况状况进行生态学评价,为滴水湖的水质保护和未来旅游开发提供了生物学依据。主要结果如下: 1、2008年1月～2009年12月,滴水湖共鉴定浮游动物17科23属49种,其中轮虫9科15属38种,桡足类5科5属8种,枝角类3科3属3种。滴水湖浮游动物两年平均丰度为2448个/L,其中,轮虫平均丰度占总量99%;桡足类占1%;枝角类丰度极少,可忽略不计。浮游动物两年平均生物量为2.15mg/L,其中,轮虫、桡足类平均生物量分别占总生物量的97%、3%。滴水湖的浮游动物轮虫优势种有以下8种:疣毛轮虫(Synchaeta sp.)、暗小异尾轮虫(Trichocerca pusilla)、裂痕龟纹轮虫、中吻轮虫(Encentrum sp.)、广生多肢轮虫(Polyarthra vulgaris)和艾氏龟甲轮虫(Keraatella eichwaldi)、臂三肢轮虫(Flinia brachiata )、角突臂尾轮虫(Brachionus angularis);桡足类优势种有为桡足幼体;枝角类无优势种。滴水湖不同水域的浮游动物群落结构较为均一,差别不大。2、2009年3月～12月,外围水体共检出浮游动物20科45属112种,其中轮虫有10科26属83种,桡足类有5科7属9种,枝角类有5科12属20种。丰度及生物量方面,外围水体各采样点浮游动物平均丰度变动范围为1183-9730个/L,生物量变动范围为0.97-8.06mg/L。外围水体轮虫优势种分别为以下12种:广生多肢轮虫(Polyarthra vulgaris)、疣毛轮虫(Synchaeta sp.)、暗小异尾轮虫(Trichocerca pusilla)、中吻轮虫(Encentrum sp.)、裂痕龟纹轮虫(Anuraeopsis fissa)、热带龟甲轮虫(Keratella tropica)、艾氏龟甲轮虫(Keratella eichwaldi)、螺形龟甲轮虫(Keratella cochlearis)、变异臂尾轮虫(Brachionus valiabilis)、褶皱臂尾轮虫(Brachionus plicatilis)、西式晶囊轮虫(Asplanchna sieboldi);桡足类优势种为桡足幼体;枝角类不形成优势种。各样点优势种类存在差异,但是,多肢轮虫及疣毛轮虫为各采样点的共同优势种。 3、与外围水体同期相比,滴水湖浮游动物种类贫乏,浮游动物种类数仅为外围水体的1/3,外围水体浮游动物种类丰富多样,不同样点浮游动物群落结构差异较大。外围水体中,大治河(W1)、农场中心河(W2)浮游动物丰度低于滴水湖。而苦草种植区(W9)、滴水湖出海闸(W13)的浮游动物(分别为2320、2893个/L)与滴水湖较为接近。其它样点皆明显高于滴水湖,浮游动物丰度处于3290～9730个/L。滴水湖第一优势种为暗小异尾轮虫轮虫,相对丰度为0.25。外围水体的第一优势种为广生多肢轮虫,其在各样点的相对丰度较高,处于0.25～0.51间。从优势种变化来看,滴水湖优势种季节更替较为明显,而外围水体中,广生多肢轮虫为全年优势种,优势种季节更替不明显,群落结构较为单一。根据浮游动物水质生态学评价,结果显示,目前滴水湖水质处于中营养水平,外围水体则处于中度富营养水平。

关键词：浮游动物群落结构水质生态学评价滴水湖

九段沙湿地自然保护区及其附近水体浮游植物的研究

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九段沙湿地自然保护区及其附近水体浮游植物的研究

作者：吴琼上海师范大学

学位级别：硕士

九段沙湿地自然保护区位于长江河口,基本保持了河口原生湿地的状态,具有极高的保护价值和科研价值。本研究于2005年2、5、9、12月对吴淞口至九段沙下沙近海水域的10个采样点进行浮游植物分季调查,其中9月和12月在长江江苏段的太海汽渡... 详细信息

九段沙湿地自然保护区位于长江河口,基本保持了河口原生湿地的状态,具有极高的保护价值和科研价值。本研究于2005年2、5、9、12月对吴淞口至九段沙下沙近海水域的10个采样点进行浮游植物分季调查,其中9月和12月在长江江苏段的太海汽渡和常通汽渡增加2个采样点;在2006年8月对九段沙上沙码头附近水域进行了定点分层的浮游植物昼夜变化调查,同时对南北槽的6个采样点进行了浮游植物调查。论文分析了九段沙湿地自然保护区及其附近水体浮游植物的群落结构及变化规律,并讨论其与环境因子的关系,主要结果如下: 1.调查共发现浮游植物8门119属304种（包括变种和变型）。其中硅藻种类最多,共56属142种,占总种数的46.71%;绿藻36属99种;其它藻类27属63种。种类的季节变化上,冬季最多,秋季最少;昼夜变化表现为白昼比夜间略高;南北槽差别不大。 2.分季调查中浮游植物年平均数量为44.33万个/升。季节变化上,春季、秋季和冬季的数量差别较小,夏季的浮游植物数量显著高于其它季节。在调查区域呈低-高-低的分布格局,但冬季不同。具体分布特点及影响因素如下: 吴淞口至江亚南沙段的浮游植物数量在春、夏、秋三个季节都是低于九段沙上沙和中沙段,主要是由于其盐度不适合藻类大量生长,其中夏季九段沙上沙和中沙段的浮游植物数量显著高于吴淞口至江亚南沙段除了上述原因以及水温的促进作用外,营养盐的差别也是很大的影响。冬季九段沙上沙和中沙段的优势种中肋骨条藻（Skeletonema costatum （Grev.） Cl.）数量受低温限制,因此呈现出吴淞口至江亚南沙段浮游植物数量略高,可能由于吴淞口至江亚南沙段的淡水浮游植物相对较多并且不受低温的限制。长江江苏段受海水影响小,淡水浮游植物能够大量生长,所以数量高于吴淞口至江亚南沙段。但在夏季受到营养盐的限制而低于九段沙上沙和中沙段,秋季营养盐较高时数量就不比九段沙上沙和中沙段低,其中太海汽渡的浮游植物在高营养盐影响下其单一优势种梅尼小环藻（Cyclotella meneghiniana Kütz.）大量繁殖造成其浮游植物数量明显高于其它水域。九段沙下沙段的浮游植物数量在四次调查中都是低于上沙和中沙段（除了Ⅷ号采样点在夏季的调查中可能由于处于满潮的原因而略高于上沙和中沙段的采样点）,可能是受涨潮或落潮-涨潮流带来的外海水稀释作用的影响。 3.定点分层的浮游植物昼夜变化调查中,浮游植物平均数量为158.90万个/升。上下层的浮游植物数量昼夜变化特点趋于一致,都是在24小时内出现两个明显的数量高峰。垂直分布特点是上层平均数量高于下层。潮汐作用是影响浮游植物数量昼夜变化的主要因素,同时也与长江口浮游植物的水平分布有着密切的联系。 4.南北槽六个采样点的浮游植物数量的平均值为186.19万个/升。北槽的平均数量比南槽高,但可能是受潮汐的影响而造成。 5.九段沙湿地自然保护区及其附近水体浮游植物的主要优势种是中肋骨条藻（除长江江苏段）。其数量决定了浮游植物数量在该区域的分布特点和季节变化,也决定了浮游植物数量的昼夜变化、垂直分布和在南北槽的分布。在江亚南沙以下水域,中肋骨条藻是单一优势种,而且在该水域其数量占总数量的百分比都在70%以上。对三种浮游植物多样性指数的分析发现其在各采样点的大小都是与中肋骨条藻数量占总数量的百分比呈负相关,且在江亚南沙以下水域较低,反映了中肋骨条藻对该水域浮游植物多样性的破坏。而中肋骨条藻大量繁殖并成为单一优势种的原因主要是所处区域的复杂环境和中肋骨条藻的广泛耐受性以及最大浑浊带的丰富营养物质。长江江苏段只在夏秋两季进行了调查,该水域的浮游植物多样性指数较高（除秋季太海汽渡）。综上所述,九段沙湿地自然保护区及其附近水体的浮游植物种类较为丰富,但大多数种类受到复杂环境的影响不能大量生长,只有中肋骨条藻能大量生长并成为主要优势种。潮汐、径流、水温和营养盐等环境因素通过中肋骨条藻对浮游植物数量的分布特点产生影响。本研究作为对九段沙湿地自然保护区整体环境资料研究的一个部分,为其浮游植物群落结构的现状特征及生态修复的研究提供了重要基础资料。

关键词：九段沙湿地自然保护区浮游植物群落结构季节变化昼夜变化垂直分布环境因子影响因素

九寨沟自然保护区主要湖泊浮游植物群落结构及水质评价

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九寨沟自然保护区主要湖泊浮游植物群落结构及水质评价

作者：徐季雄上海师范大学

学位级别：硕士

水体景观是九寨沟的核心,水质的状况影响着水生态系统的演替和景观的美学价值。浮游植物作为水体环境中的初级生产者,能对水体状况进行迅速响应,对水环境监测和保护起着重要的作用。本研究于2014年7月25日至8月6日选取九寨沟自保护区内... 详细信息

水体景观是九寨沟的核心,水质的状况影响着水生态系统的演替和景观的美学价值。浮游植物作为水体环境中的初级生产者,能对水体状况进行迅速响应,对水环境监测和保护起着重要的作用。本研究于2014年7月25日至8月6日选取九寨沟自保护区内的主要12个湖泊,对各湖泊浮游植物群落结构与水质状况进行调查,并分析长海和五花海浮游植物空间分布的变化,主要结论如下:九寨沟自然保护区主要的湖泊,共鉴定浮游植物138种,隶属7门69属,其中硅藻门种类最多为42属108种,绿藻门15属17种,蓝藻门5属6种,其它门共7属7种,其中偶然性浮游植物-着生硅藻占主要类群,真性浮游植物多为中心纲的硅藻和其他门类的藻类。各湖泊间浮游植物群落结构存在差异。除了则查洼沟内的长海,其浮游植物优势种主要为真性浮游植物长海小环藻(Cyclotella changhai)和角甲藻(Ceratium hirundinella),日则沟和树正沟内的多数湖泊均以偶然性浮游植物-着生硅藻为主。树正沟的各湖泊浮游植物优势种组成相似,均以硅藻门的Achnanthidium minutissimum,Cyclotella changhai,Delicata delicatula,Denticula tenuis为主要优势种。日则沟内的湖泊浮游植物优势种组成各不相同,部分湖泊出现非硅藻门的优势种,其中箭竹海主要优势种为甲藻门的裸甲藻(Gymnodinium sp.),熊猫海的优势种有甲藻门的多甲藻(Peridinium sp.)和金藻门的分歧锥囊藻(Dinobryon divergens),五花海的优势种出现绿藻门的衣藻(Chlamydomonas sp.)。长海和五花海浮游植物空间分布的研究显示:长海浮游植物在水平和垂直分布上,受到人为干扰较小,主要受到湖泊本身构造和水体理化条件的影响呈现规律性变化,浮游植物丰度(ind./L)受到长海小环藻的影响,在水平分布上沿入水口至出水口方向逐渐增多,沿岸区高于湖心区,垂直分布上呈现先增加后减小的趋势;浮游植物生物量(mg/L)受到长海小环藻和角甲藻的共同影响,在水平分布上呈现湖泊中部生物量高于出水口和入水口区域的格局,垂直分布上水面表层生物量最高,随着深度下降,呈现先增加后减小。五花海浮游植物丰度的水平空间分布上的趋势,显示观景平台附近的浮游植物丰度最大,主要是衣藻和偶然性浮游硅藻为主,呈现边缘区域向湖心区扩散减小的趋势。综合各种水质评价方法,可以得到九寨沟自然保护区主要湖泊的多数水体清洁,贫营养化。五花海沿岸区域轻度污染。通过浮游植物群落结构的组成来判断湖泊生态类型,熊猫海和箭竹海湖泊藻型化趋势明显。

关键词：九寨沟浮游植物群落结构水质评价