检索结果-南通市图书馆

作者：付泽坤曲阜师范大学

学位级别：硕士

鸟类群落多样性及形成机制是鸟类群落生态学研究的重要内容。本研究于2021年11月到2023年4月采用样线法、样点法、红外相机监测等方法对济南市鸟类资源进行调查,分析了济南市鸟类群落多样性特征及其与环境因素之间的关系,并结合系统发... 详细信息

鸟类群落多样性及形成机制是鸟类群落生态学研究的重要内容。本研究于2021年11月到2023年4月采用样线法、样点法、红外相机监测等方法对济南市鸟类资源进行调查,分析了济南市鸟类群落多样性特征及其与环境因素之间的关系,并结合系统发育多样性对济南市典型鸟类群落的形成机制进行探讨,研究结果可为济南市区域鸟类保护提供科学依据。主要研究结果如下。1、本研究共记录鸟类18目52科184种,其中雀形目鸟类最多28科82种,占比44.5%。国家重点保护动物36种,其中国家Ⅰ级保护动物7种,包括:青头潜鸭(Aythyabaeri),黄嘴白鹭(Egretta eulophotes)等;国家Ⅱ级保护动物 29 种,包括:红脚隼(Falco tinnunculus)、黑翅鸢(Elanus caeruleus)、雀鹰(Accipiter nisus)等;山东省重点保护动物25种,包括:环颈雉(Phasianus colchicus),赤膀鸭(Marecastrepera),针尾鸭(Anasacuta),普通秋沙鸭(Mergus merganser)等。2、济南市鸟类群落具有明显季节变化。春季(133种)>夏季(100种)>冬季(97种)>秋季(93种),不同季节鸟类个体数量为春季(29270只)>冬季(28620 只)>夏季(28080 只)>秋季(20608 只)。Shannon-Wiener 多样性指数,夏季>春季>秋季>冬季。Simpson优势度指数夏季>春季>冬季>秋季。Pielou均匀度指数夏季>秋季>春季>冬季。Margalef丰富度指数春季>夏季>秋季>冬季。G-F指数春季>夏季>秋季>冬季。夏季优势种一种为麻雀(Passer montanus),春秋冬各两种,春季优势种为麻雀(Passer montanus)和喜鹊(Picapica),秋季冬季优势种都为麻雀(Passer montanus)和斑嘴鸭(Anas zonorhyncha)。3、济南市鸟类群落丰富度和多样性指数在不同生境间具有显著性差异。不同生境鸟类丰富度为湿地(144种)>农田(118种)>山地(86种)>城镇(72种),不同季节鸟类个体数量为湿地(58837只)>农田(26184只)>山地(13383只)>城镇(8174只)。Shannon-Wiener多样性指数,湿地>城镇>农田>山地。Simpson优势度指数湿地>城镇>山地>农田。Pielou均匀度指数城镇>湿地>山地>农田。Margalef丰富度指数湿地>农田>山地>城镇。4、济南市鸟类群落形成机制环境过滤起主导作用。影响其形成的生态因子主要包括生境类型、植被覆盖度、海拔、食物资源、人为干扰、迁入迁出、种间竞争、经度、纬度、年均温、年最湿季均温等。其中纬度和年最湿季均温影响最大,人为干扰程度对不同生境鸟类群落结构形成作用明显。系统发育多样性分析结果山地、湿地、农田、城镇四种生境类型SES均小于0,表明在群落形成过程中环境过滤起主导作用,群落表现为聚集。济南市鸟类群落的构建在环境过滤主导下,同时受到种间竞争和人为干扰的影响。

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同方学位论文库评论

南四湖及其主要入湖河流鱼类和水体重金属污染评价

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作者：李扬眉曲阜师范大学

学位级别：硕士

南四湖作为省级自然保护区,周围煤矿众多,矿产资源极为丰富,且地处平原,农业发达,人口密集,大量的工业废水、农业污染物和生活污水排放使得南四湖及其主要入湖河流水环境污染日益严重。因此,南四湖及其主要入湖河流的水体污染和水体生... 详细信息

南四湖作为省级自然保护区,周围煤矿众多,矿产资源极为丰富,且地处平原,农业发达,人口密集,大量的工业废水、农业污染物和生活污水排放使得南四湖及其主要入湖河流水环境污染日益严重。因此,南四湖及其主要入湖河流的水体污染和水体生态安全已经成为山东省和江苏省地方区域重要的环境问题,引发社会关注,其中重金属因其毒性大、难降解等特点成为人们关注的焦点。在南四湖及其主要入湖河流水环境持续治理和改善的基础上,系统开展南四湖及其主要入湖河流鱼类重金属状况调查并进行污染评价,可以进一步保障其水环境功能,提高该区域的生态环境质量,维系渔业资源的可持续利用。本研究以南四湖四个湖区和洸府河、泗河、白马河、洙赵新河、新万福河、老万福河、东鱼河共七条主要入湖河流为研究区域,以水、沉积物和经济鱼类(肌肉)为研究对象,对铬(Cr)、镉(Cd)、铅(Pb)、汞(Hg)四种重金属分析测定,借助潜在生态风险指数、单因子指数和内梅罗综合污染指数对水环境和鱼类肌肉组织中的重金属污染程度进行评价,评估研究区域水体、沉积物和鱼类肌肉组织中的各重金属元素污染水平、潜在生态风险,为河湖重金属污染防控、水产品食用安全风险防控、水系可持续发展提供科学依据和理论支持。主要研究结果如下:(1)南四湖及其主要入湖河流80个样点水体重金属Cr、Cd、Pb浓度均符合我国《地表水环境质量标准》(GB 3838—2002)Ⅰ类标准和《WHO饮用水水质标准》,重金属Hg存在10%样点浓度只达到Ⅳ类水限量标准。单因子指数法分析表明,重金属Cr、Cd、Pb均处于无污染水平,重金属Hg存在8.75%样点处于轻度污染水平;整体来看并无污染。内梅罗综合污染指数法分析表明,5%样点处于轻度污染水平,其中重金属Hg的贡献率最大,整体来看并无污染。(2)南四湖及其主要入湖河流80个样点沉积物重金属Cr、Cd、Pb、Hg浓度均低于我国《土壤环境质量标准》(GB 15618—2018)中的风险筛选值。单一重金属潜在生态风险指数分析表明评价结果表明,南四湖及其主要入湖河流沉积物重金属Cr、Cd、Pb无潜在生态风险;重金属Hg整体处于较高生态风险—高生态风险状态,是研究区沉积物主要的潜在风险重金属。多种重金属潜在生态风险指数结果表明,南四湖及其主要入湖河流沉积物重金属具有中等潜在生态风险,Hg是主要的贡献元素,需要引起重视。(3)南四湖及其主要入湖河流12种经济鱼类肌肉组织中重金属Cr、Pb、Hg均符合《食品安全国家标准》(GB 2762—2022),洙赵新河6号样点乌鳢、7号样点鲇鱼肌肉组织出现重金属Cd超标现象。单因子污染指数法分析表明,上级湖、下级湖鱼类均处于无污染水平;Cd是造成支流鱼类肌肉重金属污染的主要元素,Cr、Pb和Hg元素均处于无污染水平。对于Cd元素,支流鲢、乌鳢处于中度污染水平,鲫鱼、鲇鱼处于轻度污染水平,其余均为无污染。内梅罗综合污染指数结果表明,南四湖及其主要入湖河流12种经济鱼类肌肉样品的污染程度均处于无污染水平。(4)Pearson相关系数分析表明,鱼类肌肉组织重金属与水、沉积物重金属的相关系数不同,其中,上级湖鱼类肌肉与水体Hg元素间呈现极显著正相关,与沉积物Hg元素间呈现显著正相关;下级湖鱼类肌肉与水体、沉积物同种重金属间皆呈现弱相关;支流鱼类肌肉与水体Pb元素间呈现显著正相关,与沉积物同种重金属呈现弱相关。

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菏泽市主要林业有害生物防治技术与推广

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作者：祁建华曲阜师范大学

学位级别：硕士

近年来,菏泽市人工纯林面积不断增大且树种单一,加上外来林业有害生物的入侵以及防治技术推广体系不完善等因素,致使该区林业有害生物发生危害较重。目前,菏泽林业发展重点已由造林逐步转变为治林。为有效控制林木病虫危害,亟需科学的... 详细信息

近年来,菏泽市人工纯林面积不断增大且树种单一,加上外来林业有害生物的入侵以及防治技术推广体系不完善等因素,致使该区林业有害生物发生危害较重。目前,菏泽林业发展重点已由造林逐步转变为治林。为有效控制林木病虫危害,亟需科学的防治技术和高效的技术推广方法。本研究采用查阅文献、个别访谈、实地调研和统计分析等研究方法,对近七年来菏泽市主要林业有害生物的发生规律、危害特点、发生原因与防治状况以及防治技术推广模式进行了研究,研究结果可为菏泽市主要林业有害生物的防治提供科学依据。主要研究结果如下:1.菏泽市林业主要有害生物计11种,其中,虫害8种,病害3种。2008年-2014年的调查数据表明,病虫害的发生面积先上升,2011年达到最大,然后持续下降;2010年前,病害面积大于虫害面积,2010年该趋势则发生逆转,这可能与2010年美国白蛾的大发生有关。预测2015年全市林业有害生物发生面积与2014年相比呈下降趋势,但发生形势依然严峻。其中,病害发生面积呈下降趋势;虫害发生面积与2014年基本持平,与病害发生面积相比,比例有加大趋势,主要林业有害生物总体发生情况仍属中等偏重发生年份。2.美国白蛾、杨尺蠖、杨树黑斑病和杨树溃疡病在菏泽市发生面积最大、危害最严重。营林、人工、无公害药剂和飞防等措施是菏泽市目前对美国白蛾和杨尺蠖的主要防治措施;而杨树黑斑病和杨树溃疡病的主要防治措施是合理营林和无公害药剂的推广。3.在充分利用电视、广播和报纸等传统推广模式的基础上,菏泽市创新性的开展了文学创作、手机报、手机短信、网络森林医院等新推广模式的尝试,取得了一定的效果。但推广效果仍然受到机构设置和人员结构上的不合理以及推广资金投入不足等因素的制约。

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人胚胎干细胞向多巴胺前体细胞的分化研究

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作者：冯琳曲阜师范大学

学位级别：硕士

人口老龄化会面临各种退行性疾病的高发。其中,神经系统的退行性疾病占有很大的比例。本课题主要围绕帕金森病(Parkinson’s disease,PD)的细胞疗法展开研究,为之后研究中脑DA神经元的发育路径,PD发病机制和开展PD的细胞疗法奠定了坚实... 详细信息

人口老龄化会面临各种退行性疾病的高发。其中,神经系统的退行性疾病占有很大的比例。本课题主要围绕帕金森病(Parkinson’s disease,PD)的细胞疗法展开研究,为之后研究中脑DA神经元的发育路径,PD发病机制和开展PD的细胞疗法奠定了坚实的基础。PD的发病机制主要是中脑黑质(substantia nigra pars compacta,SNc)区域DA神经元的死亡导致多巴胺(dopamine,DA)分泌量减少。开展PD的细胞治疗,最重要的是要得到源源不断的供体细胞,即DA神经前体细胞。本课题主要研究目标是建立DA神经元的分化体系,为PD的细胞疗法提供细胞。采用的策略是将人胚胎干细胞(human Embryonic Stem Cells,hESCs)定向分化为DA前体细胞从而得到供体细胞。首先,通过添加特定组合的因子将hESCs诱导分化为神经底板细胞(neural floor plate cells,NFP),这部分细胞能够表达神经底板细胞的标志物LMX1A,FOXA2,OTX2。然后,经过FGF8等因子的诱导,神经底板细胞能够分化为DA前体细胞,这些细胞能够表达中脑的标志物LMX1A,FOXA2,EN1。我们将其体外培养发成熟为多巴胺神经元后,它能够表达成熟DA神经元的标志物TH,TUJ1。为了探究不同hESCs的分化潜力是否存在差异,我们采用了12株hESCs进行了DA的分化。实验结果证明,不同hESCs分化产生的DA神经前体细胞的效率是不同的,并筛选出了一株DA分化潜力较高hESCs,为DA的分化提供种子细胞。目前建立的DA神经元的化体系仍有不足之处。第一个不足之处是:DA前体细胞的标志物LMX1A的表达比例过低。通过查阅文献发现LMX1A在发育上是由WNT通路调控的,而CHIR99021是WNT通路的激活剂,所以我们利用了H9-LMX1A的报告细胞系对CHIR99021的最适浓度进行了筛选,进而上调LMX1A的表达水平。第二个不足之处是试剂不符合临床要求。由于基础级B27中含有BSA成分,我们更换为临床级B27。实验结果证明临床级B27可以较好的取代基础级B27。第三个不足之处是DA神经元的分化效率较低。本课题使用两种方法来提高DA神经元的分化效率。一种提高效率的方法是通过延长两种营养因子GDNF和TGFβ3的作用时间来为DA神经元提供分化所需的营养物质,进而提高LMX1A,FOXA2,EN1,TH,TUJ1的表达比例。另一种方法是在ES细胞诱导分化为神经细胞的过程中,通过降低高SHH的浓度,同时加入SHH的激活剂PP来增强腹侧化程度来提高DA神经元的分化效率。从分化成本上看,SHH是一种蛋白质,价格较贵,这样也可以减少DA神经元的分化的成本,这为后续大量提供DA细胞治疗PD提供了很大的帮助。综上所述,本课题主要包括三个部分:DA神经元分化体系的建立,不同hESCs向DA分化潜力的差异性研究,DA神经元分化体系的优化。这不仅为PD的细胞治疗提供了充足的供体细胞,还为DA分化体系的优化提供了宝贵经验。

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NDRG2在不同脑疾病模型中的异质性研究

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作者：毕春颖曲阜师范大学

学位级别：硕士

N-myc downstream-regulated gene 2(NDRG2)是N-myc的下游调节基因,它属于α/β水解酶超家族。NDRG2与NDRG1、NDRG3、NDRG4同属于NDRG基因家族。研究显示NDRG2在结直肠癌、乳腺癌、恶性胶质瘤和肝癌等许多人体癌症疾病中,其表达量明显减... 详细信息

N-myc downstream-regulated gene 2(NDRG2)是N-myc的下游调节基因,它属于α/β水解酶超家族。NDRG2与NDRG1、NDRG3、NDRG4同属于NDRG基因家族。研究显示NDRG2在结直肠癌、乳腺癌、恶性胶质瘤和肝癌等许多人体癌症疾病中,其表达量明显减少,这提示着NDRG2的功能之一是抑制人体癌症的出现。然而现在研究发现NDRG2除了可以抑制肿瘤,还在神经系统中具有重要的调节作用,特别是在某些神经系统疾病中NDRG2都扮演着重要的角色。例如:NDRG2对大脑中神经元的轴突、突触的延伸和形成有促进作用;另外在大鼠脑缺血模型中NDRG2会参与神经系统中的抗凋亡机制以及在抑郁和癫痫等神经疾病中作为一种新的治疗途径。而在小鼠中的最新研究显示,NDRG2主要是在胎鼠以及新生鼠脑区的神经发生部位大量表达。而且NDRG2与星形胶质细胞的标记蛋白GFAP(Glial Fibrillary Acidic Protein)在星形胶质细胞中存在共定位,这都提示其可能参与到中枢神经系统的神经发生过程。但是到目前为止,NDRG2在脑疾病模型中的表达模式和作用机制尚不清楚。所以在本研究中,我们选取了亨廷顿疾病(Huntington’s Disease,HD)、创伤性脑损伤(Traumatic brain injury,TBI)、神经炎症疾病(Lipopolysaccharide,LPS)三种脑疾病模型。在三种模型建立后1w/2w/3w/4w,采用实时定量PCR检测海马、皮层、纹状体中NDRG2的mRNA表达水平。结果表明,NDRG2的mRNA水平在HD和TBI建模后的1w/2w升高,而在LPS建模后的1w至4w NDRG2的mRNA水平则没有明显变化。同时,我们还利用NDRG2和GFAP对样品进行免疫荧光染色,与对照组相比,脑疾病模型中双染色结果显示小鼠脑组织中NDRG2和GFAP阳性细胞比例明显升高,并且NDRG2在脑损伤后主要表达于星形胶质细胞,提示其是一种应激反应基因。而且损伤侧的NDRG2+/GFAP+的星形胶质细胞的平均面积明显大于损伤对侧星胶的平均面积,说明在损伤后,大脑中星形胶质细胞被激活;并且在损伤侧中NDRG2+/GFAP+双阳性的细胞数量明显多,所以这提示着NDRG2更倾向于在激活的星形胶质细胞里表达,这证明NDRG2可能在脑损伤疾病小鼠模型中对星形胶质细胞的状态有影响,提示NDRG2的表达可能对某些脑损伤疾病有潜在的治疗作用。本研究初步探索了NDRG2在小鼠正常以及疾病的脑组织中的时空表达差异性,得到NDRG2在小鼠脑疾病模型的区域与时间上的表达差异的大体趋势,为以后探究NDRG2在脑疾病模型中的具体作用提供了很好的研究基础。

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沼泽红假单胞菌紧密耦合改性TiO2、S型异质结光催化剂对典型印染废水的降解机制研究

沼泽红假单胞菌紧密耦合改性TiO2、S型异质结光催化剂对典型印染...

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作者：刘凯曲阜师范大学

学位级别：硕士

随着工业化的发展,许多染料未得到充分利用,排放到生态环境中,对生态系统造成严重干扰。在以往的研究中,微生物被证明在降解污染物中扮演着重要角色,但是生物修复难以降解新出现的高浓度、复杂结构的难降解污染物。因此,如何保持生物处... 详细信息

随着工业化的发展,许多染料未得到充分利用,排放到生态环境中,对生态系统造成严重干扰。在以往的研究中,微生物被证明在降解污染物中扮演着重要角色,但是生物修复难以降解新出现的高浓度、复杂结构的难降解污染物。因此,如何保持生物处理技术的优势,并将其与新的污水处理技术相结合,实现难降解污染物的有效降解已成为当前的研究热点。紧密耦合光催化和生物降解体系（ICPB）结合了光催化高效清洁的特点和生物降解低成本和彻底的优点,提高了污染物的降解效率并降低了运行成本。本研究以典型印染废水为研究对象,设计了新型的ICPB体系即沼泽红假单胞菌紧密耦合改性TiO、S型异质结光催化剂体系,探究了沼泽红假单胞菌对典型印染废水的适应性和降解性。并研究了沼泽红假单胞菌对光催化剂的适应性以及光催化剂与载体对沼泽红假单胞菌的生物相容性。同时,通过宏转录组,对沼泽红假单胞菌降解染料及其与光催化剂间的适应性和协同作用的分子机制进行分析。最后,探究了光催化剂协同沼泽红假单胞菌降解染料废水的性能和机理研究。主要研究结果如下:（1）沼泽红假单胞菌（***）在接种24 h以内处于延滞期,24-72 h进入对数生长期,72 h趋于稳定。沼泽红假单胞菌对碱的耐受度比较强,在中性和微碱环境下能达到最佳生长状态。染料和光催化剂的加入,对沼泽红假单胞菌的对数生长期有一定的抑制作用,但不影响沼泽红假单胞菌的正常生长代谢,菌株对染料和光催化剂具有一定的耐受性。同时沼泽红假单胞菌对30 mg/L的刚果红染料降解效果明显,其降解率为89.9%,COD的去除率达到92.4%。（2）通过多孔载体海藻酸钠（SA）耦合沼泽红假单胞菌和碳纳米管-银改性二氧化钛（CAT）光催化复合材料制成了新型的ICPB体系***/CAT@SA。通过表征,***/CAT@SA体系具有良好的形貌特征和结构特征,验证了体系制备成功。CAT光催化中主要起氧化作用的是超氧自由基（·O）和羟基自由基（·OH）,而空穴（h）并没有起很大作用。在CAT光催化剂和沼泽红假单胞菌的投加比例（C/P）为0.1时,制备的***/CAT@SA体系对刚果红废水的降解效果最佳。相比于固定化的光催化剂和沼泽红假单胞菌,新型ICPB体系对100 mg/L刚果红的去除率分别提升了14.3%和42.1%,对COD去除率分别提升了76%和44.6%。（3）通过壳聚糖改性聚氨酯海绵载体（CPU）结合石墨相氮化碳-二硫化钼S型异质结光催化剂（RCM）和沼泽红假单胞菌复合材料制成了降解多种偶氮染料的ICPB体系。在CPU载体中观察到棒状的光催化剂和卵状的沼泽红假单胞菌,在13.1°和27.6°处的g-CN特征峰和33.4°和57.6°处的MoS特征峰以及N-H,N=C,C-S-MO,N-MO键被检测到,证实了***/RCM@CPU体系制备成功。由于RCM光催化在可见光下的电子转移方向为S型,因此产生了氧化还原更强的e和h,所以RCM光催化中主要起氧化作用的是.O、·OH和h。在二硫化钼的掺杂比例为6%,光催化剂投加量为0.2 g,壳聚糖的掺杂比例为0.75%下,ICPB体系有更好的降解效果,对150 mg/L的刚果红,50 mg/L的甲基橙和胭脂红的去除率分别达到了99.5%,97.5%,99.5%。（4）宏转录组分析表明,在物种水平上体系降解染料的主要降解菌为沼泽红假单胞菌（80.42%）。功能基因注释显示,在GO数据库中基因主要富集在代谢过程、细胞膜和催化活性等方面,在KEGG数据库中表达丰度最多的代谢通路是碳水化合物代谢、氨基酸代谢和能量代谢。通过差异基因富集分析说明了光催化剂的加入,促进了沼泽红假单胞菌对偶氮染料的降解,并且在两者间形成了电子传递,沼泽红假单胞菌在获得电子促进自身生长代谢的同时,减少了光生电子空穴对的复合,提升了光催化效率。GC-MS分析显示光催化剂则更侧重于氧化难降解的芳香烃化合物,沼泽红假单胞菌能及时去除部分可生物降解的烷烃化合物实现最终矿化。这种分工明确,密切合作的光催化剂与微生物之间的协同作用,有效提高了ICPB体系对偶氮染料的去除效率。本研究成功制备了对典型印染废水去除效果良好的沼泽红假单胞菌紧密耦合改性TiO、S型异质结光催化剂体系,阐明了光催化剂与微生物之间的协同作用,为后续体系的改善及其应用到印染废水的实际处理中提供理论支持和实验依据。

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利用CRISPR/Cas9构建FAH基因缺陷模型猪

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作者：王晶曲阜师范大学

学位级别：硕士

随着科学技术的不断发展,人类迫切的需要对各种疾病进行透彻的了解和研究,从而开发出能够有效治疗疾病的手段。但是,由于伦理道德的限制,科学研究并不能直接以活人作为实验研究的对象。而动物可以作为科学研究的直接对象,科学家可以直... 详细信息

随着科学技术的不断发展,人类迫切的需要对各种疾病进行透彻的了解和研究,从而开发出能够有效治疗疾病的手段。但是,由于伦理道德的限制,科学研究并不能直接以活人作为实验研究的对象。而动物可以作为科学研究的直接对象,科学家可以直接在符合伦理审查的活体动物上做实验。与小鼠、大鼠等啮齿类动物相比,猪作为在器官构造,大小及生理结构上更加接近于人的物种之一,因其诸多的优势被广泛用于科学研究,作为动物模型,猪拥有的最大优势。自基因编辑技术现世以来,科学家已经能够通过基因编辑,如锌指核酸酶(zinc finger nucleases,ZFN)技术、转录激活样效应因子核酸酶(transcription activator-like effector nucleases,TALEN)技术和成簇规律性间隔的短回文重复序列(Clustered regularly interspaced short palidromic repeats,CRISPR/Cas)技术等获得基因编辑的动物,从而拿到动物疾病模型,进行相关疾病的研究。目前科研人员已经通过基因编辑技术逐渐建立了以小鼠,大鼠,兔子,猪为对象的FAH疾病模型。经鉴定这些疾病模型动物能很好的模拟人HT1肝纤维化,肝硬化等表型。遗传性酪胺酸血症Ⅰ型(Hereditary tyrosinemia type I,HT1),在人类中是种严重的常染色体隐性遗传病,该病的发生是因为患者体内的延胡索酰乙酰乙酸水解酶(Fumarylacetoacetate hydrolase,FAH)缺失所造成,该酶是催化酪氨酸代谢的最后一步。如果体内FAH基因发生突变,就会导致血液中延胡索酰乙酸乙酯和琥珀酰丙酮大量积累,长时间最终会造成肝脏和肾脏的严重损伤,并造成胎儿期或者幼儿期肝肾病变,最终造成死亡。1998年科学家找到一种药物2-(2-硝基-4-三氟甲基苯甲酰基)-1,3-环己二酮(2-(2-nitro-4trifluoromethylbenzyol)-1,3 cyclohexanedione,NTBC),它可以抑制延胡索酰乙酸乙酯和琥珀酰丙酮所产生的酪氨酸分解代谢产物的积累,从而防止肝肾毒性。1993年,Grompe M编辑小鼠胚胎干细胞获得了FAH的突变小鼠;2011年,Raymond等人首次使用通过AAV载体获得了FAH模型猪;2014年,同一课题组利用体细胞核移植(Somatic Cell Nuclear Transfer,SCNT)技术获得了FAH的雌雄猪,待其性成熟后两者交配繁殖FAH模型猪;2016年,Lijian Hui利用CRISPR/Cas9技术制作了FAH大鼠,随后,脾内注射10WT肝细胞,症状有所缓和;2017年,Liangxue Lai利用TALEN技术获得了FAH模型兔。在本研究中,我们利用CRISPR/Cas9技术,构建了FAH基因敲除的猪成纤维细胞系,再利用该细胞进行体细胞核移植技术,通过胚胎移植后成功的制作了10只FAH疾病模型猪。本研究的意义在于直接通过核移植技术,无需交配繁殖即可获得FAH模型猪,缩短了繁殖周期,其次,构建FAH基因敲除的猪成纤维细胞再通过体细胞核移植技术可以大批量的制备FAH-/-模型猪。FAH-/-模型猪不仅可以作为疾病模型来研究遗传性酪氨酸血症的发病机理及治疗方法,也可以仿照肝人源化小鼠模型作为肝人源化猪模型的基本品系,此外,还可以为临床研究提供相关模型,用于测试各种细胞治疗方法的功效,为解决器官短缺问题提供一丝的曙光。(1)利用CRISPR/Cas9技术构建了FAH猪胎儿成纤维细胞系。取35天胎儿构建6株胎儿成纤维细胞系,经过基因型鉴定,PEF-1,PEF-2,PEF-6为雌性,PEF-3,PEF-4,PEF-5为雄性。我们在FAH基因第一外显子设计了sgRNA序列构建敲除载体,通过细胞核电转建立了FAH细胞系,最终得到了40bp敲除的FAH-31细胞系。(2)经过体细胞核移植和胚胎移植后,获得10只FAH胎儿。以FAH-31为供体细胞,通过体细胞核移植并经胚胎移植后,获得了10只FAH的胎儿。经基因型鉴定,确定所有出生胎儿均与FAH-31细胞系的基因型一致。(3)采用Western Blot技术,确定FAH蛋白已完全敲除。(4)采用免疫组化和H&E染色技术,检测出生小猪的肝脏和肾脏表型。结果表明,FAH-/-猪的肝组织呈现弥漫性肝损伤,肝细胞出现坏死,细胞质膨胀变大,核巨大并且显着核仁。而FAH猪的肾脏具有局灶性急性肾盂炎,肾小管扩张和肾小管上皮损伤等,野生型的肾脏结构正常(5)通过外周血的血常规检测,FAH猪血液中ALP、ALT、AST、TBA等含量明显高于野生型猪的血液中的含量,证明FAH猪的肝功能和肾脏功能异常。

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重金属对黄河三角洲湿地鸟类的影响

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作者：张风姣曲阜师范大学

学位级别：硕士

东方白鹳(Ciconia boyciana)和黑嘴鸥(Larus saundersi)是黄河三角洲湿地中比较典型的湿地鸟类,研究湿地重金属对这2种湿地鸟类的影响,可为湿地鸟类的保护以及湿地生态系统的修复提供一定的参考数据。本研究对东方白鹳羽毛以及黑嘴鸥孵... 详细信息

东方白鹳(Ciconia boyciana)和黑嘴鸥(Larus saundersi)是黄河三角洲湿地中比较典型的湿地鸟类,研究湿地重金属对这2种湿地鸟类的影响,可为湿地鸟类的保护以及湿地生态系统的修复提供一定的参考数据。本研究对东方白鹳羽毛以及黑嘴鸥孵化成功卵壳与孵化失败卵壳样本中的八种重金属含量进行了测定、并对其进行主成分分析,同时分析各种重金属间的相关性、显著性,主要研究结果如下:1.东方白鹳羽毛中的重金属Cr和Cd、Cd和Ni之间呈现显著正相关关系,Cr与Mn、Cr与Ni、Mn和Ni之间呈现极显著正相关关系,黄河三角洲湿地内东方白鹳羽毛中重金属含量在整体趋势上表现为Cr>Zn>Mn>Cu>Ni>Mn>Pb>Fe>Cd。第一主成分与重金属Ni、Cr密切相关,第二主成分与Cu密切相关,第三主成分与Fe、Pb密切相关,说明东方白鹳可能主要受到重金属Ni、Cr的污染,其次是受到重金属Cu、Fe、Pb的污染。2.孵化成功的黑嘴鸥卵壳中重金属含量的整体趋势表现为Cr>Mn>Zn>Ni>Cu>Pb>Fe,其中,重金属Cr的含量明显最高,其它重金属含量接近,卵壳中未检测到在东方白鹳羽毛中的重金属Cd。孵化成功的黑嘴鸥卵壳中重金属Fe和Mn呈现显著性负相关,Ni和Pb之间呈现极显著性正相关,其它重金属间相关性不显著。第一主成分与Ni、Pb密切相关,第二主成分与Fe密切相关,第三主成分与Mn、Cr密切相关,说明孵化成功的黑嘴鸥卵壳可能主要受到重金属Ni、Pb的污染,其次是受到重金属Fe、Mn、Cr的污染。3.孵化失败的黑嘴鸥卵壳中同样没有检测出重金属Cd,重金属Cr的含量最高,孵化失败的黑嘴鸥卵壳中重金属含量的整体趋势表现为Cr>Mn>Zn>Cu>Ni>Pb>Fe,各重金属相关性不显著。第一主成分与Mn、Ni密切相关,第二主成分与Pb密切相关,第三主成分与Cu密切相关,说明孵化失败的黑嘴鸥卵壳可能主要受到重金属Mn污染,其次是重金属Ni、Pb、Cu的污染。4.孵化失败的黑嘴鸥卵壳中重金属Cr、Mn、Pb、Fe的含量均显著性高于孵化成功的黑嘴鸥卵壳中的含量;孵化失败的卵壳中重金属Cu的含量极显著性高于孵化成功的卵壳;而孵化失败的黑嘴鸥卵壳中的重金属Ni的平均含量低于孵化成功的卵壳中的重金属Ni的平均含量,孵化失败与孵化成功的卵壳中重金属Zn、Ni含量之间的差异不显著。说明重金属Cr、Mn、Cu、Pb、Fe可能会对黑嘴鸥卵的孵化造成影响。

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海南和广西四条河流底栖动物群落特征研究

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作者：陈璐曲阜师范大学

学位级别：硕士

健康的河流生态系统对人类社会的可持续发展具有重大意义。河流的水环境污染被公认为世界上最重要的环境问题之一,许多研究表明,河流污染严重影响河流生态系统和人类身体健康。底栖动物是淡水生态系统的一个重要组分,对了解生态系统的... 详细信息

健康的河流生态系统对人类社会的可持续发展具有重大意义。河流的水环境污染被公认为世界上最重要的环境问题之一,许多研究表明,河流污染严重影响河流生态系统和人类身体健康。底栖动物是淡水生态系统的一个重要组分,对了解生态系统的结构和功能有重要意义,相对来说底栖动物生活区域比较狭窄,有较长的生命周期,具有多种生态功能,对污染物表现出一系列的敏感性,是生物评价中应用最为广泛的类群之一。展开对河流底栖动物的群落结构调查以及河流健康评价对我国河流生态系统的保护与可持续利用具有重要的应用价值。基于此,本研究于2012年1月至2015年9月间在海南和广西选取四条河流对底栖动物进行了全面调查,主要结果如下:(1)万泉河流域中共采集到底栖动物5门9纲58科102属种,其中水生昆虫67种,寡毛类属5种,软体动物19种,其它类群11种。(2)松涛水库入库的六条河流(南开河、南美河、南溪河、南叉河、南湾河和南春河)中共采集到底栖动物128属种,其中枯水期采集到5门8纲61科120属种,平水期采集到3门5纲50科94属种,丰水期3门6纲45科84属种。(3)刁江冬季采样记录底栖动物45个属种,其中水生昆虫共33属种,软体动物5种,寡毛类仅记录3属种,春季采样共记录底栖动物58个属种,其中水生昆虫共49属种,软体动物,共记录6种,其它类群3种。(4)龙江共计采得底栖动物64种,隶属于4门8纲30科58属种。水生昆虫占总种类数的45.3%,其中摇蚊是种类数最多的类群,占总种类数的26.6%,共有17种。寡毛类和腹足纲软体动物分别占总种类数的25%和15.6%。(5)本文通过大型底栖动物多样性综合指数来评估流域生态健康情况。松涛水库入库河流的多样性较高,且三个时期的多样性指数相差不大,枯水期健康情况优秀,平水期优秀,丰水期良好。万泉河流域生物多样性较高,各主干支流中,共有3条河流达到良好标准,3条河流健康情况一般。综合来说,万泉河和松涛水库入库河流健康情况都为良好。(6)我们将刁江不同位点根据重金属分值分为对照组,低浓度组,中浓度组和高浓度组。不同重金属浓度对底栖动物大多数指标,如种类数和现存量具有不同的影响。(7)随着发生重金属污染时间的推移,许多生物多样性指标有所回升,其中水生昆虫种类数,总种类数,每个样点的种类数,累积种类数和Shannon-Wiener多样性指数与重金属污染事件时间呈正相关。

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邹城与微山林业有害生物防治现状与对策研究

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作者：刘霰霰曲阜师范大学

学位级别：硕士

林业有害生物问题是阻碍我国林业健康发展的主要原因之一。为了探清我国区域林业有害生物的发生情况,进而提出更具针对性的林业有害生物防治对策,推动我国林业的健康发展,以邹城与微山两地区为代表,于2015年4月至11月,通过野外调查的方... 详细信息

林业有害生物问题是阻碍我国林业健康发展的主要原因之一。为了探清我国区域林业有害生物的发生情况,进而提出更具针对性的林业有害生物防治对策,推动我国林业的健康发展,以邹城与微山两地区为代表,于2015年4月至11月,通过野外调查的方法开展了两地区林业有害生物的调查研究,范围涵盖邹城全市3个街道、13个乡镇及微山全县3个街道、12个乡镇、1个经济开发区。主要研究结果如下:1.邹城全市共设调查线路14条,采集病虫害标本1530号(份),其中害虫1320号,共125种,病害标本210份,共19种,比较常见的病虫害有24种,其中虫害有17种,病害有7种,危害程度较高的7种病虫害为美国白蛾、杨小舟蛾、悬铃木方翅网蝽、春尺蠖、铜绿丽金龟和杨树黑斑病、流胶病。2.微山全县共设调查线路13条,采集病虫害标本1200号(份),其中害虫1100号,共99种,病害标本100份,共14种,比较常见的病虫害有12种,其中美国白蛾、杨小舟蛾、悬铃木方翅网蝽、春尺蠖、铜绿丽金龟5种虫害以及杨树溃疡病、杨树黑斑病2种病害是危害微山林业的主要病虫害。3.两地林业有害生物的发生原因:(1)客观因素:历史性虫源地、环境恶化、林型单一、外来有害生物致害、造林育林粗放、森防经费紧缺、防控基础差、检疫工作把关不严、缺乏高效减灾技术、科研转化率低。(2)主观因素:认识不足、法制观念差、缺乏系统防治。4.对两地林业有害生物的发生情况作出对比,发现邹城林业有害生物种类多于微山,但两地主要的林业有害生物种类相似,首要危害物种均为美国白蛾。相较而言,邹城林业有害生物危害特征为小范围高致害,微山则为大范围低致害。5.列举了两地对当地林业有害生物所作出的防治措施后,对两地施行的防治措施进行对比分析,发现两地林业防治体系均是初现框架,亟待完善,邹城防治基础稍优于微山。6.林业有害生物防控管理建议:(1)夯实林业有害生物防治基础;(2)健全林业有害生物监测预防体系;(3)强化林业有害生物安全检疫工作;(4)优化林业有害生物防治技术手段;(5)推进林业有害生物社会化服务体系。

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