检索结果-南通市图书馆

作者：高超苏州大学

学位级别：硕士

目的：观察甲磺酸去铁胺（DFO）干预去势小鼠后血清骨钙素及骨组织微观结构的变化。方法：24只12周龄C57BL/6小鼠，体重（19.5±0.5）g随机分为假手术组（SHAM）、模型组（OVX）、DFO干预组（OVX+DFO），每组8只。DFO干预组于卵巢... 详细信息

目的：观察甲磺酸去铁胺（DFO）干预去势小鼠后血清骨钙素及骨组织微观结构的变化。方法：24只12周龄C57BL/6小鼠，体重（19.5±0.5）g随机分为假手术组（SHAM）、模型组（OVX）、DFO干预组（OVX+DFO），每组8只。DFO干预组于卵巢切除后第二天腹腔注射甲磺酸去铁胺（DFO），剂量为30mg/kg,每周3次，共5周;模型组、假手术组均腹腔注射同等剂量0.9%生理盐水，共5周;第5周末取血后处死小鼠并分离子宫、左侧股骨;ELISA试剂盒检测血清骨钙素、血清铁蛋白;分析天平称子宫重量;Micro-CT扫描股骨末端并取感兴趣区进行三维重建，获取骨小梁、骨皮质三维结构图像，进行松质骨、皮质骨定量分析。结果：1.血清骨钙素、血清铁蛋白：DFO干预组均显著低于模型组、假手术组（P＜0.05）;2.松质骨、皮质骨骨密度：DFO干预组均显著低于模型组、假手术组（P＜0.05），骨小梁厚度、骨小梁间隔DFO干预组显著增加（P＜0.05），骨小梁数量、骨体积分数DFO干预组显著降低（P＜0.05）。结论：一定剂量的DFO（30mg/kg）可以使去势小鼠血清铁蛋白水平比正常对照组低，同时也使骨组织形成指标降低，加重骨质疏松。目的：观察甲磺酸去铁胺（DFO）对骨质疏松大鼠（去势模型）血清骨转换指标及骨微观结构的影响。方法：40只雌性3月龄SD大鼠，体重（260±20）g，随机分为假手术组（SHAM）、模型组（OVX）、DFO干预组（OVX+DFO），DFO干预组再分3个浓度组：50mg/kg（L）、100mg/kg（M）、200mg/kg（H），实验共分为5组，每组8只;DFO干预方法：卵巢切除后第2周腹腔注射DFO，每周3次，共11周;模型组、假手术组均同时腹腔注射等剂量0.9%生理盐水;实验过程中每周监测大鼠体重;第12周末3.6%水合氯醛麻醉大鼠，心脏取血后处死大鼠并分离双侧股骨及左侧胫骨;然后，ELISA试剂盒检测血清铁蛋白、雌激素、中段骨钙素、I型胶原羧基末端肽（CTX），原子吸收法检测胫骨铁含量，Micro-CT扫描左侧股骨末端（感兴趣区重建骨小梁三维结构图，行计算机松质骨定量分析），右股骨末端行HE染色观察骨小梁情况。结果：1. SHAM与OVX组在血清雌激素水平、Micro-CT指标中存在显著差异，说明骨质疏松模型制作成功，SHAM组可以作为正常对照、OVX组可以作为骨质疏松对照;2.各组血清铁蛋白未见显著差异（P＞0.05），H组胫骨铁含量显著低于其他各组（P＜0.05）;3.三个干预组中，L、M浓度组“骨钙素”和“CTX”水平明显低于OVX组（P＜0.05），H浓度组与OVX组无差异;4. L、M浓度组骨微观结构指标：骨小梁数量、骨小梁体积、骨小梁厚度、松质骨骨密度显著高于OVX组（P＜0.05）且M浓度组上述微观指标显著高于L组，H浓度组与模型组无显著差异（P＜0.05）;M浓度组骨微观结构（SMI、骨小梁间隔）较SHAM组显著升高而明显低于200mg/kg浓度组及模型组（P＜0.05）;各组皮质骨微观结构未见明显异常。5. OVX组、H组大鼠股骨远端骨小梁较SHAE组稀疏，而L、M组大鼠股骨远端骨小梁密度高于OVX组、H组。结论：三个不同剂量DFO干预大鼠骨质疏松模型后，M剂量组的血清骨转换指标、骨微观结构指标、股骨远端HE染色与OVX组存在显著差异;实验结果提示：一定剂量的DFO对降低骨转换水平、改善骨质疏松程度有一定的作用。

关键词：甲磺酸去铁胺骨质疏松骨钙素铁蛋白显微CT I型胶原羧基末端肽

健康女性中血清铁蛋白与骨密度相关性分析及绝经后髋部脆性骨折中...

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

作者：张林林苏州大学

学位级别：硕士

第一部分健康女性中血清铁蛋白与骨密度相关性分析目的了解正常女性随年龄增加体内铁含量、骨密度的变化关系，分析两者的相关性。方法①、收集2011年1月至2012年12月435名22-80岁本院体检女性血清铁蛋白和骨密度数据;血清铁蛋白采用... 详细信息

第一部分健康女性中血清铁蛋白与骨密度相关性分析目的了解正常女性随年龄增加体内铁含量、骨密度的变化关系，分析两者的相关性。方法①、收集2011年1月至2012年12月435名22-80岁本院体检女性血清铁蛋白和骨密度数据;血清铁蛋白采用电化学发光法检测，骨密度采用双能X线吸收仪测定。②、按5岁年龄间隔分组，分别统计各组血清铁蛋白和各部位骨密度的平均值，观察血清铁蛋白、骨密度随年龄变化的情况。③、将血清铁蛋白进行五等分法分类，运用非条件logistic回归法，分析随血清铁蛋白升高骨量减少发生风险的变化。④、采用多元逐步回归分析、偏相关分析法，了解正常人（非病理状况）血清铁蛋白变化与骨密度的相关性。结果女性血清铁蛋白随年龄增加而增加，骨密度随年龄增加而下降，两者变化趋势在围绝经期、绝经期变化显著。校正混杂因素后，对血清铁蛋白五等分分组，非条件logistic回归显示最高组与最低组相比，股骨颈和腰椎发生骨量减少的OR值（95%CI）分别为2.83(1.25-6.39)和2.09(0.95-4.61)，提示随血清铁蛋白增加，骨量减少发生的风险增加。多元逐步回归分析显示，与骨密度变化相关指标为年龄、体重、血清铁蛋白和BMI，校正年龄、体重、BMI、CRP等混杂因素后，血清铁蛋白与各部位骨密度均呈显著负相关（P<0.05）。结论本组资料提示，女性随着年龄的增大，血清铁蛋白逐渐升高、骨密度逐渐下降，且二者存在显著相关性;血清铁蛋白增高时“骨量减少、骨质疏松”发生率越高。第二部分绝经后髋部脆性骨折中铁过载与骨代谢关系的研究目的研究绝经后髋部脆性骨折患者血清铁过载指标与骨代谢指标间的相互关系，对两者的临床现象进行探讨。方法研究2011年2月至2012年6月76例绝经后髋部脆性骨折患者，年龄55～93岁，平均（73±10）岁;绝经时间5～50年，平均（22±10）年。患者均检测血清铁蛋白、转铁蛋白、碱性磷酸酶（ALP）、Ⅰ型原胶原氨基端延长肽（P1NP）、Ⅰ型胶原C端肽β降解产物（β-CTX）和双能X线股骨颈腰椎骨密度指标。采用t检验、Pearson线性相关分析、多元逐步回归分析、偏相关分析，观察铁代谢指标与骨代谢相关指标的关系。结果血清铁蛋白值升高为（230.0±146.5）ng/mL，转铁蛋白降低为（1.89±0.33）g/L。血清P1NP升高为（60.9±31.9）ng/L,ALP、β-CTX均在正常范围内。股骨颈和腰椎骨密度T值分别为-1.97±1.06和-2.13±1.15（正常范围-1.0～1.0）。将患者按照其血清铁蛋白情况分为血清铁蛋白正常组（血清铁蛋白≤150ng/mL，25例）和血清铁蛋白升高组（血清铁蛋白＞150ng/mL，51例）。铁蛋白升高组较铁蛋白正常组的股骨颈和腰椎骨密度降低（t=3.13、2.89, P＜0.01），P1NP和β-CTX升高（t=-2.38、-3.59，P＜0.05）。校正混杂因素后，铁蛋白值与股骨颈和腰椎骨密度T值呈负相关(r=-0.335、-0.295，P＜0.05)，与P1NP和β-CTX值呈正相关(r=0.467、0.414，P＜0.05)，与ALP无显著相关性(r=0.188，P＞0.05);转铁蛋白值与股骨颈和腰椎骨密度T值呈正相关(r=0.444、0.262，P＜0.05)，与ALP、P1NP、β-CTX值呈负相关(r=-0.326、-0.285、-0.278，P＜0.05)。结论绝经后髋部脆性骨折患者存在铁过载现象，铁过载与骨转换活跃导致骨量丢失相关，体内铁过载可能是一个独立影响绝经后骨代谢异常的因素。

关键词：铁蛋白质类铁过载骨密度骨质疏松髋骨折绝经后

高铁环境对人成骨细胞功能的影响及铁调素对人成骨细胞内钙离子的影响

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

高铁环境对人成骨细胞功能的影响及铁调素对人成骨细胞内钙离子的...

作者：李光飞苏州大学

学位级别：硕士

第一部分高铁环境对人成骨细胞功能的影响目的：探讨高铁环境（枸橼酸铁铵）对人成骨细胞（hFOB1.19）活性指标（增殖、分化、矿化）及OPG/RANKL系统的影响。方法：人成骨细胞（hFOB1.19）培养后，用不同终浓度的枸橼酸铁铵（0u... 详细信息

第一部分高铁环境对人成骨细胞功能的影响目的：探讨高铁环境（枸橼酸铁铵）对人成骨细胞（hFOB1.19）活性指标（增殖、分化、矿化）及OPG/RANKL系统的影响。方法：人成骨细胞（hFOB1.19）培养后，用不同终浓度的枸橼酸铁铵（0umol/L、50umol/L、100umol/L、200umol/L）加入细胞培养基中，MTT法检测成骨细胞增殖活性;碱性磷酸酶活性试剂盒检测碱性磷酸酶活性;Von kossa染色法行钙结节染色;用RT-PCR和Western blot法分别检测RANKL、OPG的基因和蛋白表达变化。结果：在FAC干预48h后，50umol/L FAC使成骨细胞增殖活性显著下降（P﹤0.05），100umol/L和200umol/L FAC使成骨细胞增殖活性下降更为显著（P﹤0.01）;在FAC干预10d后，成骨细胞的碱性磷酸酶活性随着干预浓度的增加而下降（P＜0.01）;在FAC干预15d后，代表成骨细胞矿化能力的钙结节显著减少;在FAC干预48h后，50umol/L FAC对成骨细胞RANKL/OPG mRNA和蛋白表达之比无显著影响（P﹤0.05），100umol/L和200umol/L FAC使成骨细胞RANKL/OPG mRNA和蛋白表达之比显著增加（P﹤0.01）。结论：高铁环境不仅可以抑制成骨细胞增殖、分化和矿化，从而抑制骨形成;而且还可以促进人成骨细胞RANKL/OPG mRNA和蛋白的表达。因此，铁过载在骨质疏松症的发病机制中，不仅直接抑制了成骨细胞的骨形成作用，而且间接促进了破骨细胞的形成、活化，从而促进骨吸收。第二部分铁调素对人成骨细胞内钙离子的影响目的：研究铁调素在正常和不同浓度高铁环境下对成骨细胞内钙离子的影响，并探讨其中的作用机制。方法:人成骨细胞株（hFOB1.19）分别在正常和不同浓度高铁环境（10、200umol/L）下培养，然后用不同终浓度铁调素干预24h，细胞经钙离子荧光剂（fluo-3/AM）染色后用流式细胞仪检测成骨细胞内钙离子荧光强度。此外，在正常环境下，分别用10umol/L的丹曲林和20umol/L的尼莫地平预处理人成骨细胞25min和10min，然后观察铁调素100nmol/L干预24h后对人成骨细胞内钙离子的影响。结果:在正常环境下，铁调素10nmol/L时成骨细胞内钙离子荧光无显著变化（P>0.05），30nmol/L时成骨细胞内钙离子荧光开始增加（P0.05）;在10umol/L高铁环境下，铁调素的作用与其在正常环境下相似，只是30nmol/L时成骨细胞内钙离子增加较正常环境下更为显著（P0.05）。结论:铁调素浓度不超过100nmol/L时，在正常和高铁环境下均可使成骨细胞内钙离子增加，并且在高铁环境下增加更为显著;其机制可能与铁调素干预后胞内钙库释放有关，而钙库钙离子释放通道的激活是由L型钙通道介导的钙离子内流引起的。

关键词：高铁环境铁过载人成骨细胞骨代谢铁调素尼莫地平丹曲林钙离子

绝经后髋关节置换患者外周血及骨髓淋巴细胞亚群与骨质疏松症相关性研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

绝经后髋关节置换患者外周血及骨髓淋巴细胞亚群与骨质疏松症相关...

作者：金星羽苏州大学

学位级别：硕士

背景:绝经后骨质疏松症(PMOP)是一种以骨量减少和骨骼微结构改变为主要特征的全身性疾病,其主要原因是绝经后雌激素水平显著降低。近年来关于免疫调控对PMOP的影响逐渐成为研究热点,有研究显示免疫细胞可通过细胞间接触或细胞旁分泌机... 详细信息

背景:绝经后骨质疏松症(PMOP)是一种以骨量减少和骨骼微结构改变为主要特征的全身性疾病,其主要原因是绝经后雌激素水平显著降低。近年来关于免疫调控对PMOP的影响逐渐成为研究热点,有研究显示免疫细胞可通过细胞间接触或细胞旁分泌机制影响骨稳态,进而引发去卵巢模型(OVX)小鼠的骨量下降。目的:本研究希望通过分析绝经后人群外周血及骨髓淋巴细胞亚群、骨密度等临床数据,了解绝经后人群中淋巴细胞亚群与骨量的相关性,为进一步研究提供临床数据。方法:1、总体方案:(1)按纳排标准收集苏州大学附属第二医院关节外科行髋关节置换的绝经后患者为研究对象,所有研究对象入院后抽取外周血标本、术中抽取股骨近端骨髓标本、术后行骨密度检测(双能X线骨密度仪);(2)使用流式细胞术分析:①外周血及骨髓淋巴细胞亚群占比;②外周血及骨髓淋巴细胞亚群绝对计数;③骨髓T淋巴细胞亚型占比。使用SPSS和Graphpad软件分析骨密度和淋巴细胞亚群之间的相关性。2、分组设计:(1)第一阶段:淋巴细胞亚群占比分析。首先纳入30例研究对象,按骨密度分为骨质疏松组、骨量减低组、骨量正常组,进行外周血及骨髓淋巴细胞占比分析;(2)第二阶段:淋巴细胞亚群绝对计数分析。基于第一阶段结果已显示淋巴细胞亚群占比与绝经后人群骨量有相关性,再次纳入27例研究对象,按骨密度分为骨质疏松组、骨量减低组、骨量正常组,进行外周血及骨髓淋巴细胞亚群绝对计数分析,同时进行外周血及骨髓淋巴细胞亚群占比分析;(3)第三阶段:骨髓T淋巴细胞亚型占比分析。基于第一、二阶段研究结果显示骨髓T淋巴细胞与绝经后人群骨量相关性最高,再次纳入44例研究对象,按骨密度分为骨质疏松组、骨量减低组、骨量正常组,进行骨髓T淋巴细胞亚型占比分析,同时进行外周血及骨髓淋巴细胞亚群绝对计数、占比分析;(4)第四阶段:同类数据整合分析。前三阶段共纳入淋巴细胞亚群占比研究对象101例,第二、三阶段共纳入淋巴细胞亚群绝对计数研究对象71例,进行数据整合分析。(具体分组及流程详见P3-4)结果:1、第一阶段:淋巴细胞亚群占比分析。相关性分析显示骨髓CD3+T淋巴细胞(CD3)占比(R=-0.527,P<0.01)、骨髓CD4+T淋巴细胞(CD4)占比(R=-0.497,P<0.01)与绝经后人群骨量呈负相关;线性回归分析显示骨髓CD3占比(P<0.01)、骨髓CD4占比(P<0.01)与绝经后人群骨量具有线性关系。2、第二阶段:淋巴细胞亚群绝对计数分析。相关性分析显示外周血CD3绝对计数(R=-0.572,P<0.01)、骨髓CD3绝对计数(R=-0.536,P<0.01)与绝经后人群骨量呈负相关;线性回归分析显示外周血CD3绝对计数(P<0.05)、骨髓CD3绝对计数(P<0.05)与绝经后人群骨量具有线性关系。3、第三阶段:骨髓T淋巴细胞亚型占比分析。相关性分析显示骨髓调节性T淋巴细胞(Treg)占比(R=0.401,P<0.01)与绝经后人群骨量呈正相关;线性回归分析显示骨髓Treg占比(P<0.01)与绝经后人群骨量具有线性关系;根据ROC曲线结果提示骨髓Treg曲线下面积(0.815)大于0.7,具有统计学意义。4、第四阶段:同类数据整合分析。根据ROC曲线结果提示骨髓CD3占比(0.883)、骨髓CD4占比(0.772)、外周血CD3绝对计数(0.830)、骨髓CD3绝对计数(0.847)曲线下面积大于0.7,具有统计学意义。其余结果与前置研究基本相符。结论:研究结果初步提示绝经后人群骨密度降低与免疫指标异常存在相关性,对未来进一步探讨免疫调控与PMOP的相关机制及预测方案的研究工作具有一定参考价值。

关键词：绝经后骨质疏松症骨髓淋巴细胞亚群 T淋巴细胞

铁调素对小鼠成骨细胞（MC3T3-E1）成骨活性基因表达的影响

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

铁调素对小鼠成骨细胞（MC3T3-E1）成骨活性基因表达的影响

作者：刘虎苏州大学

学位级别：硕士

随着我国“老龄化”的进程不断加快,骨质疏松症的发病率愈来愈高。骨质疏松症是以骨组织显微结构受损,骨矿成分和骨基质等比例不断减少,骨质变薄,骨小梁数量减少,骨脆性增加和骨折危险度升高的一种全身骨代谢障碍的疾病。对于铁代谢与... 详细信息

随着我国“老龄化”的进程不断加快,骨质疏松症的发病率愈来愈高。骨质疏松症是以骨组织显微结构受损,骨矿成分和骨基质等比例不断减少,骨质变薄,骨小梁数量减少,骨脆性增加和骨折危险度升高的一种全身骨代谢障碍的疾病。对于铁代谢与骨代谢相关性研究始于21世纪初,国外学者研究主要基于:①在各种铁代谢疾病患者中发现伴有骨代谢异常;②骨质疏松患者伴有铁代谢异常。目前已发现骨质疏松症与体内“铁过载”关系十分密切。近几年关于铁代谢与骨代谢的研究越来越受到重视。而作为铁代谢的关键调节因素:铁调素(Hepcidin),是近期发现的一种新型的由肝脏合成的小分子肽类激素,是机体铁稳态的主要调控者,主要在肝细胞中合成,之后分泌至血液将体内铁需要的信号传至小肠,调控肠铁的吸收。本课题中运用铁调素干预成骨细胞,观察细胞的增殖活性情况及成骨细胞功能基因骨钙素及骨保护素的变化。为进一步阐明铁的稳态对于骨代谢紊乱疾病如骨质疏松的影响,提供实验依据。本研究主要分为以下三个部分: 第一部分铁调素对MC3T3-E1小鼠成骨细胞增殖活性影响的研究目的研究铁调素对小鼠成骨细胞MC3T3-E1细胞活性的影响。方法小鼠MC3T3-E1细胞体外培养后,以不同浓度的铁调素及FAC、DFO分别作用24h、48h、72h,用MTT方法检测成骨细胞的增殖情况。结果MTT检测显示在不同浓度铁调素干预后,:随着培养液铁调素的增高,细胞生长呈上升趋势,差异具有统计意义(P<0.05)。在培养液DFO浓度增高时,细胞生长呈上升趋势(P<0.05)。在培养液FAC浓度增高时,细胞生长呈显著性下降(P<0.05)。结论铁调素促进细胞增殖,DFO同样促进细胞增殖,而高浓度铁剂(FAC)可抑制细胞生长、增殖,结果显示有浓度依赖性。第二部分铁调素对MC3T3-E1小鼠成骨细胞骨保护素和骨钙素基因表达的影响目的研究铁调素对小鼠成骨细胞MC3T3-E1细胞骨保护素(OPG)和骨钙素(BGP)基因表达的影响。方法小鼠MC3T3-E1细胞体外培养后,以不同浓度(100nmol/ml,200nmol/ml,300nmol/ml)的铁调素作用72h,用RT-PCR方法检测OPG、BGP mRNA的表达水平。结果RT-PCR检测显示在不同浓度铁调素干预后,各组均有OPG mRNA和BGP mRNA表达;不同浓度组的OPG mRNA和BGP mRNA表达光密度比值不同,组间密度比值比较存在显著性差异(P<0.05)。结论铁调素可上调MC3T3-E1细胞OPG及BGP mRNA表达,铁调素浓度增加转录水平逐渐增加,结果显示有浓度依赖性。第三部分去铁胺对小鼠成骨细胞MC3T3-E1功能的影响目的研究去铁胺(DFO)对小鼠成骨细胞MC3T3-E1细胞骨保护素(OPG)和骨钙素(BGP)基因表达的影响。方法小鼠MC3T3-E1细胞体外培养后,以不同浓度(50μmol/L,100μmol/L)的去铁胺作用48h,用RT-PCR方法检测OPG、BGP mRNA的表达水平。结果RT-PCR检测显示在不同浓度去铁胺干预后,各组均有OPG mRNA和BGP mRNA表达;不同浓度组的OPG mRNA和BGP mRNA表达光密度比值不同,组间密度比值比较存在显著性差异(P<0.05)。结论去铁胺可上调MC3T3-E1细胞OPG及BGP mRNA表达,去铁胺浓度增加转录水平逐渐增加,结果显示有浓度依赖性。

关键词： Hepcidin 去铁胺铁过载骨钙素骨保护素