检索结果-南通市图书馆

作者：何传雨石河子大学

学位级别：硕士

随着规模化养殖业的发展和饲养密度的提高,疾病出现混合感染的机会越来越多,许多细菌扮演着继发感染的角色,多杀性巴氏杆菌就是其中一员。2007年,新躺石河子先后有6个规模化奶牛场1-9周龄犊牛突然发病,共有90余头犊牛死亡,通过临床症状... 详细信息

随着规模化养殖业的发展和饲养密度的提高,疾病出现混合感染的机会越来越多,许多细菌扮演着继发感染的角色,多杀性巴氏杆菌就是其中一员。2007年,新躺石河子先后有6个规模化奶牛场1-9周龄犊牛突然发病,共有90余头犊牛死亡,通过临床症状以及病原菌的分离鉴定,诊断为多杀性巴氏杆菌引起的犊牛肺炎。为追溯病原,更有效地控制该病的发生,本研究从犊牛肺炎发生牛场采集了健康犊牛鼻腔棉拭,通过对细菌的分离、生化鉴定、药敏实验、动物实验及PCR方法的检测,得到了2株多杀性巴氏杆菌。对所分离得到的多杀性巴氏杆菌以及实验室保存的致犊牛肺炎多杀性巴氏杆菌荚膜和毒力相关基因hasR、ompH、plpE、ptfA进行克隆测序及序列分析,以便进一步调查致犊牛肺炎巴氏杆菌病的传染源,为研究多杀性巴氏杆菌的致病机理,相关基因的分子特性以及表达奠定基础。结果如下： 1、鼻腔棉拭分离的2株生化鉴定结果、分离菌形态特征及培养特性与多杀性巴氏杆菌一致。动物实验表现为24小时内实验小鼠全部死亡,表现很强的致病性,并可以从死亡的小鼠体内分离得到所感染菌,组织染色可明显观察到两极浓染现象。 2、参考Townsend发表的多杀性巴氏杆菌种特异性基因引物以及血清型特异性基因引物,以2株分离菌的DNA为模板,通过多重PCR扩增,结果可以扩增出500bp和1000bp左右的两条带,回收后测序并在GenBank中进行Blast比对,显示分别与多杀性巴氏杆菌种特异性基因和荚膜血清A型基因同源性都在99%以上。 3、药敏试验表明,健康牛鼻腔棉拭分离得到的2株Pm对新霉素、庆人霉素、环丙沙星、氧氟沙星、诺氟沙星表现高敏,对氨苄青霉素钠、头孢拉定、卡那霉素、头孢噻呋钠、阿米卡星表现耐受。 4、通过对荚膜和毒力相关基因hasR、ompH、plpE、ptfA的序列克隆与分析表明,Pm-BS-d、Pm-BS-a、Pm142-x-4、Pm142-x-3、Pm149-x、Pm149-xby之间同源性为82.2%-100%,这些基因在不同多杀性巴氏杆菌中有着较高的保守性。研究结果证实,致犊牛肺炎多杀性巴氏杆菌杆菌与健康牛鼻腔棉拭分离的多杀性巴氏杆菌在基因水平上有很高的同源性,这说明致犊牛肺炎多杀性巴氏杆菌可能就来源于自身呼吸道中本来就存在的多杀性巴氏杆菌。

关键词：多杀性巴氏杆菌克隆荚膜序列分析

新疆北疆地区规模化奶牛场犊牛病毒性腹泻相关病原的调查研究

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新疆北疆地区规模化奶牛场犊牛病毒性腹泻相关病原的调查研究

作者：张坤石河子大学

学位级别：硕士

牛轮状病毒(BRV)、冠状病毒(BCV)、病毒性腹泻/粘膜病毒(BVDV)是引起犊牛传染性腹泻的三种主要病毒,犊牛感染后不仅引起严重腹泻及大批死亡而且导致免疫功能下降,容易继发细菌感染给养牛业带来严重的经济损失。新疆北疆地区是全疆主要... 详细信息

牛轮状病毒(BRV)、冠状病毒(BCV)、病毒性腹泻/粘膜病毒(BVDV)是引起犊牛传染性腹泻的三种主要病毒,犊牛感染后不仅引起严重腹泻及大批死亡而且导致免疫功能下降,容易继发细菌感染给养牛业带来严重的经济损失。新疆北疆地区是全疆主要的奶牛生产基地,但有关三种犊牛病毒性腹泻病原的系统调查未见报道。为此,本研究自2014年1月至2016年1月,从新疆北疆石河子、沙湾、奎屯、呼图壁、博乐等地区的7个主要规模化奶牛场采集1月龄以内犊牛粪便、肠内容物、血清样品173份,其中腹泻犊牛样品125份,未出现腹泻症状的犊牛样品48份,采用双抗体夹心ELISA、反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术调查感染情况并用序列分析方法分析病毒基因型,以查明该地区规模化奶牛场牛轮状病毒、冠状病毒、病毒性腹泻/粘膜病毒的感染情况,为本地区犊牛病毒性腹泻相关疾病的预防与疫苗研发提供一定的理论依据,结果如下:1.致犊牛腹泻轮状病毒病原调查ELISA方法检出病毒抗原阳性29份,除呼图壁某奶牛场未检出阳性抗原外,其余牛场均检出阳性样品,阳性率为00%;RT-PCR方法检出病毒阳性65份,阳性率为24%0.91%,从石河子某一场健康犊牛中检测到牛轮状病毒抗原及核酸。核苷酸序列分析表明:新疆北疆地区致犊牛腹泻轮状病毒的基因型为I2型,各病毒株与标准株的同源性在91.4%以上。结果揭示,新疆北疆部分地区主要规模化奶牛场普遍存在牛轮状病毒的感染情况,且部分牛场感染率较高。2.致犊牛腹泻冠状病毒病原调查ELISA检测出病毒抗原阳性20份,除呼图壁和奎屯某奶牛场未检出病毒抗原外,其余五个牛场均检出阳性样品,各牛场阳性率为00%,健康犊牛样品中未检出牛冠状病毒;RT-PCR检测出阳性样品35份,除呼图壁某奶牛场未检出阳性样品外,其余牛场均检出阳性样品,各牛场的阳性率为00%,健康犊牛样品中未检出牛冠状病毒,与ELISA检测结果相一致。使用DNAMAN、DNAStar、MEGA 5.0软件对N基因与S1基因序列分析表明,新疆地区的牛冠状病毒虽与参考毒株保持了较高的同源性,但仍然存在变异,且具有地域分类的特点,同一地区间的毒株其亲缘关系较近。3.致犊牛腹泻的病毒性腹泻/粘膜病毒病原调查ELISA及RT-PCR的方法在石河子某奶牛二场、石河子某奶牛三场、博乐某牛场的阳性检出率分别为60%、32%、13.3%,100%、48%、13.3%。BVDV阳性毒株序列分析表明,此次试验克隆的12株BVDV阳性株基因型属于BVDV-1b型,与标准株Osloss的同源性最高,在97.68.3%。

关键词：牛轮状病毒牛冠状病毒牛病毒性腹泻/粘膜病毒双抗体夹心ELISA RT-PCR 序列分析

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牛支原体灭活疫苗的研制与免疫效果研究

牛支原体灭活疫苗的研制与免疫效果研究

作者：杨铭伟石河子大学

学位级别：硕士

牛支原体(Mycoplasma bovis,***)是感染牛的一种重要的致病性病原体,主要引起牛的肺炎、乳腺炎和关节炎等多种疾病。美国于1961年首次从患乳腺炎的牛乳中分离得到该病原。国内于2008年首次从患肺炎的犊牛肺脏中分离得到,此后在国内逐步... 详细信息

牛支原体(Mycoplasma bovis,***)是感染牛的一种重要的致病性病原体,主要引起牛的肺炎、乳腺炎和关节炎等多种疾病。美国于1961年首次从患乳腺炎的牛乳中分离得到该病原。国内于2008年首次从患肺炎的犊牛肺脏中分离得到,此后在国内逐步蔓延传播,造成了巨大的经济损失,为研发防控牛支原体病的有效疫苗,在综合前期分析研究的基础上,本文对牛支原体生长滴度测定、抗原菌悬液浓缩、灭活疫苗制备以及犊牛免疫效果评价等疫苗研发关键技术进行了试验研究,主要研究内容及结果如下:1 TTC应用于牛支原体活菌计数研究及牛支原体扩大培养效果测定为探讨氯化三苯基四氮唑(TTC)应用于***菌落计数的可行性及实验条件,通过平板计数法进行了TTC浓度筛选;采用倾注培养法对***扩大培养效果进行了菌落形成单位(Colony forming unit,cfu)计数,通过颜色变化单位(Colour change unit,ccu)法进行了浓度检测,并测定了630 nm处OD值及培养物p H的变化。结果:培养基中TTC质量浓度在0.3.6 g/L时菌落正常生长且显色效果明显,TTC质量浓度较低时菌落显色效果不明显,较高时则会抑制***的生长,TTC作用最佳质量浓度为0.4 g/L;CFU法测得菌液浓度为1.8.42×108 CFU/m L,CCU法测得牛支原体菌株在96 h时的生长滴度为5.0×108 CCU/m L,两种方法检测结果基本一致;而不同时段牛支原体培养物OD值变化范围在0.024.213,在对应时间点OD值与上述两种方法未表现出一致性,OD值测定仅可做为培养效果检测时的辅助方法;培养物p H变化与OD值测定却表现出一定的相关性。结果表明:TTC可应用于***活菌计数,菌落呈醒目红色且特征明显,可有效、准确地对***进行活菌计数;CFU法与CCU法均可应用于牛支原体扩大培养效果测定。2牛支原体生长曲线测定及不同培养基生长效果比较通过颜色变化单位法(Colour change unit,ccu)对牛支原体新疆分离株在牛支原体专用液体扩大培养基中不同培养阶段的生长滴度进行了测定并绘制了生长曲线,同时采用活菌计数法对牛支原体菌株在牛支原体专用液体扩大培养基、改良Thiaucourt’s培养基、牛心汤培养基、葡萄糖血清肉汤培养基中的培养效果进行了比较。结果表明:活化培养后的牛支原体菌株在牛支原体专用液体扩大培养基中生长良好,该培养基相比其他三种培养基具有一定的经济优势,可作为制备疫苗时牛支原体抗原获取的最优培养基。3牛支原体灭活疫苗的研制采用透析法、高速离心法及超滤浓缩法对***培养物进行了浓缩试验对比研究,测定不同处理方法浓缩物蛋白含量,并利用CFU与CCU法测定了超滤浓缩后浓缩液浓度;应用ISA 206双相佐剂制备***灭活疫苗,先后进行了疫苗无菌检测、物理性状检测、稳定性与保存期试验、动物安全性试验,结果显示超滤浓缩法处理得到的浓缩物蛋白浓度最高,CFU法与CCU法检测结果基本一致;所制备疫苗物理性状良好,4℃可保存180 d、37℃可存放3 d,受试动物接种后未见异常反应,注射部位均正常,未见化脓及红肿现象。结果表明:超滤浓缩法适用于***培养物的浓缩,可用于疫苗生产时抗原的富集;疫苗安全可靠,为***灭活疫苗的规模化生产提供了一定的方法与技术支持。4牛支原体灭活疫苗免疫小鼠最小免疫剂量及抗体消长规律初步研究应用牛支原体灭活疫苗对小鼠进行最小免疫剂量及抗体消长规律初步研究。将制备的疫苗分别以0.1、0.2、0.3、0.4 m L/只的不同剂量,经腿部肌肉途径免疫小鼠,结果显示最小免疫剂量为0.2 m L/只;以0.2 m L/只剂量免疫小鼠,免疫3周后,抗体滴度达到最高峰,随后抗体滴度开始下降,但仍保持相对稳定,5周后抗体滴度表现出下降趋势。5牛支原体灭活疫苗免疫犊牛的免疫保护性评价随机选取10-15日龄犊牛20头,免疫组10头于10-15日龄首免,间隔10天进行二免,肌肉注射3 m L/每头,未免疫组10头不注射疫苗,注射等剂量生理盐水。测定两组犊牛二免后14 d抗体水平并在二免后21 d随机选取相同日龄免疫与未免疫犊牛各3头进行攻毒保护试验,每头犊牛经鼻腔黏膜接种(滴注)2 m L、气管注射3 m L牛支原体培养物(1.8×109 CFU/m L),记录犊牛体温,观察临床症状,检测血清抗体水平。攻毒后28 d剖检观察肺脏临床解剖学及病理组织学变化,记录犊牛肺脏病变指数并采集病变肺脏组织进行牛支原体分离培养。结果:免疫组犊牛在二免后14 d血清牛支原体抗体达到0.404(OD450);3头攻毒犊牛均保持良好的精神状态且体温变化不明显,临床症状综合评分为3,肺脏病

关键词：牛支原体培养特性抗原浓缩灭活疫苗免疫效果评价观察

牛支原体肺炎流行病学调查及综合防治技术应用研究

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牛支原体肺炎流行病学调查及综合防治技术应用研究

作者：刘东军石河子大学

学位级别：硕士

牛支原体是危害我国养牛业的重要致病性支原体,目前已证实该病呈世界性分布,病原除导致牛肺炎、乳腺炎外,还导致关节炎、角膜结膜炎、耳炎、生殖道炎症、流产与不孕等多种病症。近些年来,新疆多个地区都有牛肺炎支原体的报道,给该地牛... 详细信息

牛支原体是危害我国养牛业的重要致病性支原体,目前已证实该病呈世界性分布,病原除导致牛肺炎、乳腺炎外,还导致关节炎、角膜结膜炎、耳炎、生殖道炎症、流产与不孕等多种病症。近些年来,新疆多个地区都有牛肺炎支原体的报道,给该地牛场带来巨大的损失,石河子地区是垦区重要的牛奶养殖区,本研究开展牛支原体检测、防治等相关的研究,为该病防控提供科学依据。本研究采用传统的流行病学调查法对石河子133团红光牧业牛场奶牛肺炎流行情况进行调查,包括犊牛发病日龄、发病季节、临床症状、剖检变化、发病的影响因素(圈舍温度、通风条件、饲养密度、气候、初乳饲喂情况,总结出该牛场发病特征,同时使用PCR方法确诊该病为牛支原体病。选择合适的治疗药物和治疗方法,对临床出现的病例随机分为4组,每组45头病例,采用阿奇霉素和多茜环素,红霉素,氟苯尼考,氧氟沙星4组药物分别治疗,疗程采用15天。试验结果表明阿奇霉素和多茜环素治疗的一组效果最好,红霉素和氟苯尼考效果次之,氧氟沙星效果不理想。同时采用支原体疫苗免疫接种预防该病。奶牛产前接种牛支原体肺炎灭活疫苗后,所产的犊牛该病发病率明显下降。加强犊牛营养保健,提供及时足量的初乳供应,注射亚硒酸钠-维生素E、维丁胶钙等药物加强犊牛营养保健。改善饲养管理,圈舍保持温暖干燥,空气清洁,定期消毒。采用臭氧空气消毒机每天2次对犊牛圈舍进行消毒,减少病原菌的数量,降低圈舍中氨气、硫化氢等有害气体的浓度,减少疾病的发生。通过改善饲养环境减少疾病的发生。制定控制犊牛支原体肺炎的综合防治方法。

关键词：支原体肺炎流行病学调查综合防治措施

181团牛羊布鲁氏杆菌病的流行病学调查及防控现状分析

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181团牛羊布鲁氏杆菌病的流行病学调查及防控现状分析

作者：曲明悦石河子大学

学位级别：硕士

目的:布鲁氏菌病是由布鲁氏菌杆菌引起的人畜共患的传染病,该病广泛分布于世界各地,在许多国家都有不同程度的流行。该病在我国流行范围广,危害严重。新疆部分地区也普遍存在布病,而阿勒泰地区一直是布病的高发区。兵团十师181团,从60... 详细信息

目的:布鲁氏菌病是由布鲁氏菌杆菌引起的人畜共患的传染病,该病广泛分布于世界各地,在许多国家都有不同程度的流行。该病在我国流行范围广,危害严重。新疆部分地区也普遍存在布病,而阿勒泰地区一直是布病的高发区。兵团十师181团,从60年代初起,不断检测出牛羊布鲁氏菌病。但该病在181团从未全面系统地进行流行病学调查,造成布病防控较为盲目,没有形成有效的防控措施。本研究对181团从2008年-2012年牛羊感染布病进行流行性病学调查,综合分析,掌握布鲁氏菌杆病在我团牛羊群中的感染情况、流行规律和主要影响因素,并根据调查结果提出181团布病防控建议。方法:采用虎红平板凝集试验和试管凝集试验检测人畜感染情况;采用现场流行病学的方法,调查感染动物的畜种、品种、养殖方式与规模、动物来源、免疫、检疫、扑杀情况并分析其感染的相关因素。结果:(1)牛羊不同年度的布病检测结果:2008年-2012年共累计监测血清12963头份,监测总体阳性率为2.6%。羊2011年阳性率最高为3.81%,2012年阳性率最低为1.12%;牛2008年阳性率最高为4.8%,2012年阳性率最低为0.18%。(2)牛羊不同养殖规模方式监测结果:规模养殖场总体阳性率为1.89%,其中:羊为1.73%,牛为2.02%;散养户总体阳性率为3.33%,其中:羊为3.26%,牛为3.37%,散养户的阳性率均高于规模养殖场。(3)牛羊不同品种布病监测结果:哈克萨大尾羊和西门塔尔牛监测阳性数为241头只,占阳性总数的71.51%(241/337),其中哈萨克大尾羊89只,占阳性羊72.95%(89/122),西门塔尔牛152头,占阳性牛70.70%(152/215)。(4)人间布病检测结果:2008年阳性率最高为7.26%,2010年阳性率最低1.9%,人间感染布病倾向于屠宰从业者、兽医防疫人员、饲养人员等人群。结论:通过对181团2008年-2012年布病的疫情发生情况进行调查分析,181团羊布病疫情呈现波动态势,牛呈现下降趋势;布病疫情分布呈明显特征以散养户较多。感染动物品种明显以哈萨克大尾羊和西门塔尔牛品种为主;研究分析:引种检疫不严、阳性牛羊扑杀处理不力,免疫接种不稳定,牛羊流动增加,检疫监督力度不够,公共卫生宣传教育等是引起本团人畜布病感染的主要影响因素。针对181团牛羊布病流行现状,提出以下防控建议:(1)加强畜牧兽医队伍建设,提高队伍的整体素质,加强培训,提高对布病的防控技术;(2)加大对布病危害和综合防制的宣传,提高养殖户布病防控意识;(3)规范引种制度,完善报检制度,减少由引种使布病感染的机率;(4)强化监督监测、完善检测体系,实行免疫制度;(5)加强部门之间的配合,建立健全领导机制,同时开展人畜布病检测;(6)积极推广人工授精和奶牛冷配技术,从而杜绝由自然交配而传播布病

关键词： 181团布鲁氏菌病流行病学血清学调查

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牛支原体灭活疫苗佐剂的筛选与培养基的改良

牛支原体灭活疫苗佐剂的筛选与培养基的改良

作者：石刚石河子大学

学位级别：硕士

牛支原体(Mycoplasmabovis，***)是引起犊牛肺炎、关节炎和奶牛乳房炎的主要病原体，近年来，由牛支原体感染引起的相关疾病已蔓延至全世界，2010年以来，新疆北疆部分地区规模化牛场犊牛陆续出现严重的肺炎与关节炎，造成大批犊牛死亡... 详细信息

牛支原体(Mycoplasmabovis，***)是引起犊牛肺炎、关节炎和奶牛乳房炎的主要病原体，近年来，由牛支原体感染引起的相关疾病已蔓延至全世界，2010年以来，新疆北疆部分地区规模化牛场犊牛陆续出现严重的肺炎与关节炎，造成大批犊牛死亡，后经实验室诊断确定病原体为牛支原体。目前，国内尚无预防该病的商品化疫苗供生产应用，而抗生素治疗常存在盲目用药，疗效不确定等情况。为了解决上述问题本试验着重开展了以下研究： 1.将分离并鉴定得到的牛支原体新疆分离菌株进行扩大培养制备灭活菌悬液，然后分别与弗氏完全佐剂、白油佐剂、氢氧化铝佐剂、蜂胶佐剂配合，制成灭活疫苗免疫小鼠，通过测定血清中的抗体水平来筛选免疫效果较好的疫苗佐剂。结果表明白油佐剂组的免疫增强效果最佳，产生的抗体水平最高，并且高抗体水平持续时间较长，可以作为牛支原体灭活疫苗的较理想佐剂。 2.在常用牛心汤培养基基础上进行了改良，将配方中原有牛心汤进行了2倍浓缩并加入了DMEM和牛肺消化液，利用活菌计数法、菌体蛋白测定法、OD值测定法对牛支原体新疆分离株在改良后的液体培养基中不同培养阶段的生长滴度即颜色变化单位（CCU）、菌体蛋白量及OD值进行了测定，并采用平板菌落计数法（CFU）对牛支原体新疆分离株在三种固体培养基中的菌落数进行了测定。结果表明改良后的培养基配方培养效率明显提高，有助于牛支原体的大量培养。 3.选择临床常用的恩诺沙星、乳酸环丙沙星、盐酸林可霉素、泰乐菌素、阿奇霉素、替米考星、氧氟沙星、氟苯尼考八种药物，采用两倍稀释法对牛支原体进行体外最小抑菌浓度的测定，为指导临床合理用药提供依据。结果表明牛支原体对恩诺沙星的耐药性最低，适用于当前治疗牛支原体感染性疾病。

关键词：牛支原体疫苗佐剂 ELISA 改良培养基最小抑菌浓度(MIC)

新疆猪伪狂犬病流行病学调查及病毒株的分离鉴定

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新疆猪伪狂犬病流行病学调查及病毒株的分离鉴定

作者：张鲁安西北农林科技大学

学位级别：硕士

应用血清学方法对新疆13 个地区的25 个规模化猪场进行猪伪狂犬病调查,并开展了防治试验研究。结果2001 年前未使用疫苗的八个猪场全部有阳性存在,猪场野毒感染抗体阳性率平均34.4%,使用猪伪狂犬病基因缺失疫苗免疫后仍有16 个规模化猪... 详细信息

应用血清学方法对新疆13 个地区的25 个规模化猪场进行猪伪狂犬病调查,并开展了防治试验研究。结果2001 年前未使用疫苗的八个猪场全部有阳性存在,猪场野毒感染抗体阳性率平均34.4%,使用猪伪狂犬病基因缺失疫苗免疫后仍有16 个规模化猪场出现野毒感染抗体阳性,表明猪伪狂犬病是造成新疆规模化猪场猪繁殖障碍病的主要病因。从新疆某猪场病死仔猪的脑组织中分离到一株疑为猪伪狂犬病病毒(PRV)毒株,通过兔体接种、BHK-21 细胞培养、病毒毒力滴定、中和试验、电镜观察、实验兔、仔猪回归试验、PCR 检测病毒等多种方法对该分离株进行了鉴定。结果发现:分离的病毒接种实验兔后发生奇痒并麻痹致死;BHK-21 细胞培养盲传4 代出现典型细胞病变,用BHK-21 细胞测定其毒价TCID50 为10-10.87/0.1mL;电镜观察可见呈现典型PRV 病毒形态学特征;感染试验兔出现典型的奇痒症状;仔猪出现典型的症状和病理变化;分离的病毒能中和PRV 标准阳性血清;PCR体外扩增可见其与鄂A 株在同一水平位置上有相同的电泳带;根据此分离病毒株的上述特性,鉴定其为猪伪狂犬病病毒,并命名为XIN-W株。该研究从血清学、病原学和分子生物学方面证实新疆存在PRV野毒株,对于新疆PRV的流行病学研究及诊断和防治具有重要意义。

关键词：伪狂犬病流行病学调查分离鉴定

石河子地区生鲜肉蛋奶中大肠杆菌的分离鉴定及部分生物学特性分析

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石河子地区生鲜肉蛋奶中大肠杆菌的分离鉴定及部分生物学特性分析

作者：牛春晖石河子大学

学位级别：硕士

大肠杆菌是一种条件致病菌,在相当长的时间内一直被认为是人和动物机体肠道内正常菌群的一部分,被当作是非致病性的细菌。直到20世纪中期,由大肠杆菌引发的疾病广泛传播,研究者意识到某种特殊血清型的大肠杆菌对人和动物具有致病性,尤... 详细信息

大肠杆菌是一种条件致病菌,在相当长的时间内一直被认为是人和动物机体肠道内正常菌群的一部分,被当作是非致病性的细菌。直到20世纪中期,由大肠杆菌引发的疾病广泛传播,研究者意识到某种特殊血清型的大肠杆菌对人和动物具有致病性,尤其对婴幼儿与幼畜(禽)危害极大,可引起严重腹泻和败血症,加之近年来由食源性大肠杆菌O157:H7引起的食物中毒事件频发,引起了全球性恐慌,不仅严重影响养殖业的发展,也对人类的健康存在很大威胁,该菌的公共卫生意义引起了人们的高度重视。为研究石河子地区生鲜肉、蛋、奶中污染的大肠杆菌及及其生物学特性,本研究的试验内容与结果如下:方法:本试验选择石河子地区不同的屠宰场、鸡蛋和牛奶销售点,无菌采集牛肉、羊肝、鸡肉、猪肉、猪肝、鸡蛋、散装牛奶各100份,采用常规微生物学方法对样品进行细菌的分离培养,随机挑选部分代表菌株进行生物学特征和生化特性的鉴定及溶血性观察。结果:1.鸡蛋中未分离到大肠杆菌,牛肉、羊肝、鸡肉、猪肉、猪肝和散装牛奶中分离得到了大肠杆菌,且分离率为100%。2.随机挑选的60株代表菌株中有5株大肠杆菌呈现β溶血,其中羊源大肠杆菌有3株,牛源和奶源的大肠杆菌各有1株。3.为研究石河子地区食源性大肠杆菌的部分生物学特性,本试验以60株代表菌株为研究对象,采用K-B琼脂扩散法测定大肠杆菌对20种抗生素的耐药表型,利用改良山梨醇麦康凯(CT-SMAC)培养基分离培养血清型为O157:H7的大肠杆菌,使用PCR方法检测大肠杆菌O157特异性基因并将5株溶血性大肠杆菌(牛奶中17号、68号、84号,牛肉中66号,羊肝中75号)菌液稀释至1×109 cfu/mL,腹腔感染小鼠,探究其致病性。4.不同来源的大肠杆菌对20种抗菌药物的耐药表型不同,且多重耐药现象严重。所有菌株均对林可霉素100%耐药,大多数菌株对四环素耐药率较高。***-SMAC培养基上未分离得到血清型为O157:H7的大肠杆菌,PCR未扩增出目的条带。6.小鼠攻毒试验显示,牛奶中68号和牛肉中66号导致的小鼠死亡率为60%,牛奶中84号和羊肝中75号致小鼠死亡率为40%,牛奶中17号未致小鼠死亡,从死亡小鼠的肝脏中均成功分离到大肠杆菌。结论:1.本研究选择石河子地区不同的屠宰场和蛋奶销售点,无菌采集牛肉、鸡肉、猪肉、猪肝、鸡蛋、散装牛奶各100份,采用常规微生物学方法对样品进行细菌的分离鉴定,结果表明,除鸡蛋中未分离到大肠杆菌外,其余样品中均成功分离到了大肠杆菌,分离率为100%,且有5株大肠杆菌具有β溶血的特性,表明石河子地区存在大肠杆菌感染的风险。2.本试验以60株代表菌株为研究对象,通过药敏试验、PCR方法和小鼠攻毒试验研究大肠杆菌的部分生物学特性,结果表明,不同来源的大肠杆菌耐药性不同,且大肠杆菌多重耐药现象严重;部分菌株有一定的致病性,O157:H7感染风险较小。

关键词：大肠埃希氏菌生鲜畜产品大肠杆菌O157:H7 耐药性致病性

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新疆部分地区三种鸡肿瘤性疾病的初步调查

新疆部分地区三种鸡肿瘤性疾病的初步调查

作者：万鹏石河子大学

学位级别：硕士

禽传染性肿瘤病是由多种病毒引起的禽的一类传染性疾病。常见的引起家禽传染性肿瘤病的病毒有马立克氏病病毒（Marek’s disease virus）、网状内皮组织增殖病病（Reticuloendotheliosis virus）和禽白血病病毒（AvianLeucosis virus）... 详细信息

禽传染性肿瘤病是由多种病毒引起的禽的一类传染性疾病。常见的引起家禽传染性肿瘤病的病毒有马立克氏病病毒（Marek’s disease virus）、网状内皮组织增殖病病（Reticuloendotheliosis virus）和禽白血病病毒（AvianLeucosis virus）。禽白血病，马立克氏病和网状内皮组织增殖病在形态学上有相似之处，因此通过多种方法对三种鸡肿瘤病进行鉴别。通过调查新疆部分地区蛋鸡场疑似肿瘤性疾病，初步了解鸡肿瘤性疾病的种类及感染与发病情况。调查结果为该类疾病的防控措施提供参考依据。从喀什、阿克苏、玛纳斯等地区的7个养殖场抽选30份疑似肿瘤性疾病病例，进行现场剖解，采用病理组织学方法，ELISA抗原检测法，病原核酸鉴定法进行鉴别诊断。结果如下 1、从对30例疑似肿瘤病鸡的现场剖检观察表明，被检鸡均存在不同器官的肿瘤病变，同一鸡场中，局限性及弥漫性肿瘤结节病变同时存在。病理切片中显示，疑似白血病镜检瘤细胞以淋巴细胞为主，细胞大小均一，核深蓝染，胞浆嗜碱性。疑似马立克镜检各组织中都可见瘤细胞增生，瘤细胞以不同形态的淋巴细胞为主，有的瘤细胞核大、较圆、浅蓝染，胞浆较少，微嗜碱性。疑似网状内皮增生症镜检瘤细胞以网状细胞和淋巴细胞混合增生为主，淋巴细胞核圆较小蓝染，胞浆不明显。初步怀疑有可能存在混合感染。 2、ELISA法检出30份（共七组）病料检出马立克氏病阳性3份,检出率为10%，这三份均为组织检出;禽白血病阳性23份，检出率为76.66%，;禽网状内皮组织增生症阳性15份，检出率为50.00%。检出单一鸡病感染19份,占被检数的63.33%;混合感染11份,占被检数的36.66%。 3、从病料组织提取的总DNA样本中扩增出与预期大小一致的大约477bp的MDV条带，ddH2O作为阴性对照。所取30例样品均检测出MDV阳性。样本中没有扩增出ALV和REV的相应条带，而阳性对照出现相应条带,ALV约545bp,REV约476bp。病料没有扩增出ALV和REV的条带。调查结果表明，三个地区部分鸡场均存在三种肿瘤性疾病感染及马立克氏病病例，且均注射马立克疫苗，但发病是否由于疫苗免疫失败，还是育雏期间野毒感染，尚难确定。

关键词：新疆地区鸡肿瘤性疾病 ELISA PCR 检测

利用OIE PVS工具对五师兽医体系运作效能的评估

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利用OIE PVS工具对五师兽医体系运作效能的评估

作者：李建辉(Lee Jian-hui) 石河子大学

学位级别：硕士

世界动物卫生组织(OIE)制定的兽医体系运作效能评估(PVS)工具,旨在促进兽医体系的各类资源条件和法律体系的改善,提高动物卫生和公共卫生的水平。PVS工具提供了一个统一的参照体系和标尺,是评价兽医体系运作质量的国际标准。《全国兽医... 详细信息

世界动物卫生组织(OIE)制定的兽医体系运作效能评估(PVS)工具,旨在促进兽医体系的各类资源条件和法律体系的改善,提高动物卫生和公共卫生的水平。PVS工具提供了一个统一的参照体系和标尺,是评价兽医体系运作质量的国际标准。《全国兽医事业“十二五”规划》要求,加快推进兽医管理体制机制,完善兽医工作机构运行机制。要求借鉴OIE“兽医体系运作成效评估工具(PVS)”,研究制定适合我国特点的兽医体系建设管理规范,明确各级各类兽医工作机构的工作职责、工作要求,细化兽医工作机构考核评价指标体系,促进兽医体系规范化、标准化建设。有关利用OIE PVS工具对我国兽医体系运作效能评估已经开展了大量的工作,但对地区性兽医体系运作效能的评估报道的较少,新疆尚未报道开展相关研究。新疆兵团第五师兽医体系不仅承担着全师的动物防疫工作和畜产品安全的监督管理,同时第五师地处新疆的西部,有7个团场在中哈过境线上,境内有全国第二大陆路口岸—阿拉山口。通过开展对五师兽医体系效能评估,找出其差距及影响运行效能的“限制因素”,并提出有有针对性的整改措施,改变兽医体系在体制、机制、人员和制度各方面存在的不足,确立兽医体系优先发展的事项。评估过程和结果对第五师兽医体系的改革、创新和完善可以提供必要的数据与建议,并为兵团全面开展兽医体系运行评估提供借鉴,具有特殊的重要意义。本研究根据OIE PVS工具四方面要素,37个评估指标与五师兽医体系运作的实际情况对应地逐项进行评估。结果:评价等级为1级的指标有3个,评价等级为2级的指标有7个,评价等级为3级的指标有24个,评价等级为4级的指标有3个。研究结果表明,五师兽医体系在人力、物力和财力资源的配置可以保证开展基本的兽医工作,五师的兽医体系具备基本的技术权威和能力要求,但是五师的兽医体系在进入市场要素方面工作不足;五师的兽医体系在工作中与利益相关方的互动还很不到位。进一步落实兽医体系体制改革,加强兽医体系与利益相关方的联系互动,强化兽医体系的基础设施建设,提高兽医人员的工作能力,更好地履行各项工作职能,是今后五师兽医体系运行改革的主要发展方向。

关键词：世界动物卫生组织(OIE) 兽医体系运作效能评估(PVS) 评价等级兵团第五师