检索结果-南通市图书馆

作者：池亚斌江南大学

学位级别：硕士

氨基葡萄糖(GlcN)和N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)不仅在营养化学品和药品中使用,而且在预防和治疗骨关节疾病、维持软骨组织及关节健康领域也有广泛应用,市场前景广阔。GlcN和GlcNAc的主要生产方法有微生物发酵法、酶转化法以及甲壳素酸水... 详细信息

氨基葡萄糖(GlcN)和N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)不仅在营养化学品和药品中使用,而且在预防和治疗骨关节疾病、维持软骨组织及关节健康领域也有广泛应用,市场前景广阔。GlcN和GlcNAc的主要生产方法有微生物发酵法、酶转化法以及甲壳素酸水解法。在前期研究中,本研究室以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)为出发菌株,通过代谢工程改造,构建一株可以发酵生产GlcNAc的工程菌。在上述研究基础上,本论文建立GlcNAc的高通量筛选方法,并利用常压室温等离子诱变(ARTP)技术对***工程菌进行诱变,筛选获得一株GlcNAc产量获得显著提升的突变菌株。在此基础上,对该突变菌株的培养条件进行优化,尤其是对其利用无机氮源的能力进行重点研究,并通过上述建立的高通量诱变和筛选方法提高该菌对无机氮源(NH)SO的利用能力。在氮源代谢过程中,研究了全局性调控因子tnrA对无机氮源的代谢影响。(1)建立并优化GlcNAc的高通量比色筛选方法,并将ARTP诱变技术应用于GlcNAc高产菌株的高通量筛选。研究表明,四硼酸钾溶液1μL、PDABA 125μL、反应时间5 min、反应温度96℃时,GlcNAc检测的准确度最高。在此基础上,通过该高通量筛选方法筛选获得一株GlcNAc产量获得提高的突变株4A12,摇瓶发酵GlcNAc产量达到9.1 g·L,较出发菌株7.6 g·L相比提高19.7%,葡萄糖转化效率达到0.169 g GlcNAc/g葡萄糖。3 L罐发酵GlcNAc产量达到36.1 g·L,较出发菌株(21.9 g·L)提高64.8%。之后考察突变株遗传稳定性,通过传代培养,GlcNAc摇瓶产量维持在9 g·L左右,表明突变菌4A12遗传稳定性较稳定。(2)采用BSGN6发酵生产GlcNAc时,由于使用的初始发酵培养基中有机氮源成分太高:酵母粉20 g·L,玉米浆20 g·L,发酵成本太高,不利于工业化放大生产。所以对突变菌株4A12在利用无机氮源的能力方面进行培养条件的优化,确定最优发酵培养基的组成(g·L):酵母粉15,(NH)SO 8.49,K2HPO4·3H2O 12.5,KH2PO4 2.5,MgSO4·7H2O 3,葡萄糖60,木糖5,15mL微量元素溶液。以初始发酵培养基为对照,研究突变菌4A12在最优发酵培养基中发酵情况,相同条件下3 L罐发酵培养72 h,在最优发酵培养基中最高产量达到41.3 g·L,较初始发酵培养基(36.3 g·L)提高13.8%。(3)由于在初始发酵培养基和最优发酵培养基中,突变菌4A12菌体生物量都低于出发菌株BSGN6,所以对影响菌体生长的全局性调控因子tnrA进行了研究,通过基因敲除手段敲除了4A12中的全局性调控因子tnrA,获得菌株4A12-△tnrA。研究发现在初始发酵培养基中,氮源一直处于丰富状态,TnrA被抑制失活,4A12和对4A12-△tnrA在菌体的生长和GlcNAC合成方面差别不大;但是在全无机盐培养基中,4A12与4A12-△tnrA发酵结果差别很明显:在全无机盐培养基中,4A12中TnrA被激活,TnrA激活nrgAB、nasBC和nasDEF操纵子的表达,使菌体更好的利用环境中的氮源,菌体得以生长;但是4A12-△tnrA中由于不能合成TnrA,导致其不能激活nrgAB、nasBC和nasDEF操纵子的表达,从而影响了细胞对无机氮源的吸收利用,导致菌体生长缓慢甚至不生长。得出全局性调控因子tnrA在氮代谢中的作用:影响菌体对无机氮源(NH)SO的代谢与利用,为进一步通过代谢调控提高菌株对无机氮源的利用能力奠定了基础。

关键词：重组枯草芽孢杆菌 N-乙酰氨基葡萄糖常压室温等离子诱变培养基优化高通量筛选

L-氨基酸脱氨酶手性拆分D,L-丙氨酸转化合成丙酮酸

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L-氨基酸脱氨酶手性拆分D,L-丙氨酸转化合成丙酮酸

作者：刘克江南大学

学位级别：硕士

丙酮酸(pyruvic acid)是一种重要的有机酸,也是细胞代谢过程中的关键中间产物,在化工、制药和食品等领域中有着广泛的应用。目前丙酮酸的生产方法主要有化学合成法、微生物发酵法、酶转化法和全细胞催化法。其中,化学合成法对环境污染严... 详细信息

丙酮酸(pyruvic acid)是一种重要的有机酸,也是细胞代谢过程中的关键中间产物,在化工、制药和食品等领域中有着广泛的应用。目前丙酮酸的生产方法主要有化学合成法、微生物发酵法、酶转化法和全细胞催化法。其中,化学合成法对环境污染严重,微生物发酵法中产物组分复杂难以分离,酶转化法的成本较高不易于大规模生产,而全细胞催化法具有环境污染小、底物转化率高、产物易分离等优势,因此,该法合成丙酮酸具有广阔前景。本研究在大肠杆菌(Escherichia coli)中表达奇异变形杆菌Proteus mirabilis的L-氨基酸脱氨酶(Pm1)催化L-丙氨酸合成丙酮酸,并通过手性拆分D,L-丙氨酸获得D-丙氨酸;之后,对Pm1进行N端优化提高其蛋白表达量;建立丙酮酸微孔板高通量筛选方法,通过半理性设计提高Pm1酶活;使用基因编辑手段减少细胞对丙酮酸的吸收利用,并优化全细胞催化条件。主要研究结果如下:(1)构建表达Pm1的*** BL21(DE3)(p ET20b-pm1)重组菌株,建立全细胞催化生产丙酮酸的方法。进一步对Pm1的N端编码序列进行优化。当反应体系pH=7.0,底物D,L-丙氨酸浓度为80 g·L,细胞浓度为2 g·L时,经过N端序列优化的BLKP00-N6菌株的丙酮酸产量达到15.13 g·L,催化活性为0.36 g·h·g DCW。利用半理性设计策略对Pm1进行酶改造,通过SWISS MODEL对Pm1进行同源建模,使用Discovery Studio进行分子对接,选取Gln99、Val437、Tyr97、Leu278、Val411、Trp438位点进行定点饱和突变。为高效筛选定点饱和突变库,建立了基于2,4-二硝基苯肼显色的丙酮酸微孔板高通量筛选方法,通过该方法筛选出催化能力提高的突变株V437I,该菌株丙酮酸产量为18.64 g·L,相较于对照菌株提高23.2%,催化活性达到0.44 g·h·g DCW。(2)使用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除*** BL21(DE3)中编码丙酮酸转运蛋白的基因cst A、bts T,减少全细胞催化剂本身对产物丙酮酸的摄取,丙酮酸产量提高至23.46 g·L。进一步敲除宿主菌中利用丙酮酸的关键基因pps、pox B、pfl B、ldh A、ace EF,获得BLKP07菌株。将质粒p ET20b-N6-pm1-V437I转入其中,获得BLKP07-N6-V437I。该菌株在催化过程中对丙酮酸的消耗大幅减少,丙酮酸产量达到32.58 g·L,相较于对照菌株提高38.9%。(3)对全细胞催化时的pH、溶氧、细胞浓度和底物浓度进行优化,当pH=7.0,摇瓶转速220 r·min,细胞浓度4.0 g·L,底物浓度110 g·L时,丙酮酸产量达到43.50 g·L,催化活性为1.36 g·h·g DCW,L-丙氨酸转化率达到80.0%,D-丙氨酸的拆分率为84.0%。将N6-pm1-V437I基因表达框整合至BLK07菌株基因组,构建了无质粒大肠杆菌重组菌BLK07P1-N6-V437I,该菌株丙酮酸产量为42.20 g·L。

关键词： L-氨基酸脱氨酶全细胞催化丙酮酸半理性设计基因编辑

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面向开闭集问题的多源深度域自适应方法研究

面向开闭集问题的多源深度域自适应方法研究

作者：黄珂卿西安理工大学

学位级别：硕士

深度领域自适应方法是一类应用于解决领域间分布差异问题的机器学习技术,其主要目标是提高模型在目标领域上的泛化性能。这些方法通过利用源领域的数据和标签信息,将模型的知识迁移到目标领域,以减少领域之间的差异。初始阶段,研究人员... 详细信息

深度领域自适应方法是一类应用于解决领域间分布差异问题的机器学习技术,其主要目标是提高模型在目标领域上的泛化性能。这些方法通过利用源领域的数据和标签信息,将模型的知识迁移到目标领域,以减少领域之间的差异。初始阶段,研究人员主要关注单源域自适应方法,这些方法通过学习源域到目标域之间的映射关系,以最小化领域之间的差异。然而,单源域自适应方法在处理多源领域和目标域之间的复杂关系时存在局限性,因此逐渐引入了多源域自适应方法。多源域自适应方法旨在从多个源领域中获取知识,以更好地适应目标领域的特征分布。这种方法通过同时利用多个源领域的数据和标签信息,使得模型更加全面地理解各个领域之间的关系,从而提高了模型的泛化能力和鲁棒性,但现有的多源领域自适应方法大多关注于多个源域与目标域进行整体特征分布对齐或使用多个分类器进行加权,而忽略了源域中不同类别样本距离决策边界的距离及目标域中重要样本对网络模型的影响。此外,随着对领域自适应技术实际应用的不断探索,研究者开始关注开放集领域自适应方法。开放集领域自适应方法与传统的闭集领域自适应方法有所不同,它不再假设目标领域与任何源领域具有相同的类别空间。相反,开放集领域自适应方法允许目标领域包含源领域中未见过的新类别。这种方法更贴近实际应用场景,因为在现实生活中,目标领域往往会出现新的类别,而传统的闭集领域自适应方法无法处理这种情况,开放集领域自适应方法旨在处理这种更加开放和实际的领域自适应场景,提高模型在应对新领域时的适应能力。因此,本文面向闭集和开集数据设定,构建多源深度领域自适应网络模型分别针对上述两种数据设定展开研究,本文的主要研究内容可分为以下两个方面:(1)本文面向闭集问题提出了多源主动领域自适应方法。在多个源域和目标域共享相同标签空间的前提下,先前的经典多源域自适应方法只考虑将有标签的源域数据正确分类,而忽略了待分类样本与决策边界之间的距离,这很大程度上影响了网络模型的鲁棒性,同时虽然目标域无标注,但选择部分重要的目标域样本对网络参数进行优化是可行的。为解决上述问题,本文提出了动态边界损失函数,通过该损失函数加大源域中不同类别样本之间距离决策边界的距离,并根据动态边界损失函数设计查询函数,通过查询函数对目标域中的无标注样本进行重要性排序,选择排名靠前的部分样本对网络参数进行优化,进而提高领域自适应网络模型的泛化能力。(2)本文提出了多源域不变特征开集领域自适应网络模型。在现实世界的许多应用场景中,各领域之间的标签空间并不一定完全重叠,该模型从领域间和领域内样本类别层面出发,首先通过统计学准则对源域和目标域数据分布进行整体对齐,其次通过网络分类器对目标域中的高置信度样本进行选择,使用高置信度样本分别与多个源域数据取交集,通过统计交集部分类别数量并排序,选择排序靠前的类别样本对网络参数进行更新。从而在获得多个源域和目标域特征的基础上优化网络模型,确保网络模型能够准确识别当前目标域中的全部类别样本。此外,本文对面向开闭集问题的多源深度领域自适应方法中涵盖的数据设定、数学公式等进行了解释,并梳理了属于本文研究范畴内相关方法的进展。同时在针对闭集和开集数据设定下的多源领域自适应方法展开研究时,对当前已有方法的问题设定、具体实现以及可能存在的疏漏进行深入分析。构建不同数据设定下的实验环境,同时针对现有方法在分别闭集和开集数据设定下进行指标评估,进而与本文方法进行性能比较。为验证本文方法的效果,本文通过使用多个数据集进行实验,同时与现有的多源域自适应实验方案进行对比分析,通过对实验数据进行定量和定性分析来验证本文方法的有效性。除此之外,本文为证明网络模型中参数及模块的重要性,进行消融实验对网络模型进行进一步分析。

关键词：领域自适应闭集开集领域对抗领域对齐

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多源域深度迁移学习方法研究

多源域深度迁移学习方法研究

作者：惠朝晖西安理工大学

学位级别：硕士

近年来,无监督域自适应（Unsupervised Domain Adaptation,UDA）算法成为了深度迁移学习算法的研究热点,该算法要求仅源域数据有标签,目标域数据无标签。目前,大多数UDA算法都是针对单源无监督域自适应展开研究,然而在实际场景中,源域... 详细信息

近年来,无监督域自适应（Unsupervised Domain Adaptation,UDA）算法成为了深度迁移学习算法的研究热点,该算法要求仅源域数据有标签,目标域数据无标签。目前,大多数UDA算法都是针对单源无监督域自适应展开研究,然而在实际场景中,源域数据往往是通过各种来源获得的,不同来源获得的源域数据与目标域数据在特征分布上相似但相似程度有所不同,而且不同来源得到的源域数据在数据分布上也会存在差异,单源无监督域自适应算法在解决这种多源域的实际情况时表现出了次优性能。而且,目前大多数多源域自适应算法也没有考虑到将各源域与目标域特征分布之间的差异信息加入到网络的迭代训练过程中,反而是均衡地利用各源域的特征信息进行迁移学习,这种处理不能合理有效地迁移各源域的特征信息,导致了负迁移现象的产生。本文主要针对多源无监督域自适应算法展开研究。首先,本文考虑多源域自适应过程中均衡利用各源域特征信息所产生的负迁移问题,基于Wasserstein度量以及最大均值差异（Maximum Mean Discrepancy,MMD）度量,提出了多源非均衡域自适应（Multi-source UnBalanced Domain Adaptation,MUBDA）网络;其次,为了进一步地提高目标域数据的识别精度,本文提出了样本优化算法,避免了无关信息的迁移。（1）针对多源域自适应过程中,均衡利用各源域特征信息所产生的的负迁移问题。首先,本文基于各源域与目标域特征分布之间的差异程度,提出了多源非均衡域自适应调节机制（Multi-source unbalanced domain Adaptation adjustment Mechanism,MAM）;同时,本文也基于控制变量法提出了单源权重调节机制（Single-source weight Adjustment Mechanism,SAM）,通过实验对比,进一步表明了多源非均衡域自适应调节机制的合理性;其次,本文基于多源非均衡域自适应调节机制提出了 MUBDA网络,该网络能够非均衡地借鉴各源域的特征信息,减弱了负迁移的影响;最后,本文在多个公共无监督领域自适应数据集上评估MUBDA的性能,并与多个无监督域自适应方法的实验结果进行对比,重点对比多源域自适应方法DCTN、M3SDA、MDAN的实验结果,验证MUBDA网络的有效性。（2）针对多源域自适应过程中样本优化的问题。首先,本文基于相互关系对齐（Correlation Alignment,CORAL）度量构建单源域自适应网络;其次,本文基于源域数据质量因素提出了解决负迁移现象的样本优化算法,以避免源域中无关信息的迁移;最后,本文通过将手写字符数据集输入到基于CORAL度量的单源域自适应网络中,利用样本优化算法剔除负样本,提高目标域的识别精度,同时,本文利用Office-31、Office-Caltech10以及ImageCLEF-DA数据集,将样本优化算法应用到基于Wasserstein度量的MUBDA网络中,进一步体现本文样本优化方法在多源域自适应中的有效性。实验结果表明,本文方法取得了较优的识别效果。首先,本文基于Wasserstein度量提出的 MUBDA 网络,在 Office-31 数据集、Office-Caltech10 以及 ImageCLEF-DA 数据集上均表现出了较优的识别效果;其次,本文将样本优化算法应用到基于Wasserstein度量的MUBDA网络中,对比样本优化前后的实验结果,目标域的识别精度在多个数据集上均有提升。

关键词：多源无监督域自适应负迁移 Wasserstein度量多源非均衡域自适应MUBDA网络样本优化

高压直喷低速双燃料发动机燃烧过程分析及优化

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高压直喷低速双燃料发动机燃烧过程分析及优化

作者：戴天阳哈尔滨工程大学

学位级别：硕士

随着温室气体排放的加剧和化石能源的需求增多,研究化石能源的替代燃料是一种改善这些问题的有效方法。天然气作为化石能源的替代燃料在船舶动力装置中主要应用于双燃料低速机。柴油-天然气双燃料低速机只有两种,即低压预混和高压直喷... 详细信息

随着温室气体排放的加剧和化石能源的需求增多,研究化石能源的替代燃料是一种改善这些问题的有效方法。天然气作为化石能源的替代燃料在船舶动力装置中主要应用于双燃料低速机。柴油-天然气双燃料低速机只有两种,即低压预混和高压直喷。其中,高压直喷双燃料低速机因气体射流的扩散燃烧而得到高功率输出。但是,相比于低压预混,高压直喷双燃料低速机的NOx排放量相对较高,通常采用后处理技术才能满足国际海事组织（IMO）制定的Tier III排放法规。为了能提出减少低速机NOx排放量的优化策略,需要对低速机的燃烧排放过程进行分析,但是目前对于柴油引燃天然气射流的燃烧原理还不是特别清晰,没有理想的研究方案来研究双燃料燃烧排放特性。因此,本文主要通过CONVERGE仿真软件,根据实验数据来建立验证双燃料喷射模型以及射流燃烧模型,进而预测高压直喷双燃料低速机模型的工作过程并分析NOx的生成原理。根据相关实验参数,分别建立并验证了柴油喷雾模型,高压天然气射流模型以及柴油引燃天然气射流燃烧模型。通过已验证的气体射流模型,进一步研究不同喷嘴孔径,环境温度,环境压力以及涡流比条件下气体射流的流动混合特性。结果表明:涡流比条件对高压天然气射流的流动混合特性有显著影响。然后,在已验证的射流燃烧模型的基础上,分析了双燃料喷射角度变化和双燃料喷射器距离变化对射流燃烧排放过程的影响。结果表明:高压天然气射流中可燃混合物变化是影响NOx的重要因素。结合双燃料喷射模型以及射流燃烧模型,构建了高压直喷双燃料低速机的三维仿真模型,并用于预测低速机实际的工作过程以及分析双燃料燃烧排放过程,特别是理解了NOx的生成原理。为了优化高压直喷双燃料低速机的NOx排放情况,根据NOx的生成原理,主要从天然气喷射时刻,涡流比,EGR比例这几个方面的变化来分析燃烧排放过程。仿真结果表明,随着天然气喷射时刻的延迟,NOx排放量,低速机功率和热效率都会减少。还有,随着涡流比的减少,NOx的排放量才会降低,并影响功率和热效率的输出。只有EGR比例的增大才能降低NOx排放量,但不利于保持低速机的功率和热效率。因此,需要进行不同参数耦合EGR比例的优化研究,其结果表明:当天然气喷射时刻的变化参数为-1°CA以及涡流比为2分别耦合5%EGR比例时,可以使NOx排放量降低到满足排放法规要求,并对低速机的功率和热效率的影响较小。

关键词：柴油-天然气双燃料高压直喷三维CFD仿真燃烧过程排放优化

低压喷射天然气低速双燃料发动机反应机理和爆震研究

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低压喷射天然气低速双燃料发动机反应机理和爆震研究

作者：吴越哈尔滨工程大学

学位级别：硕士

国际海事组织提出了严格的海上排放法规,使用天然气等清洁能源替代柴油可以显著改善船机的SOx和NOx排放指标。低压喷射天然气双燃料发动机由于预燃室点火系统和预混燃烧,具有排放低的显著优点,不需要任何后处理装置或者EGR就可满足IMO T... 详细信息

国际海事组织提出了严格的海上排放法规,使用天然气等清洁能源替代柴油可以显著改善船机的SOx和NOx排放指标。低压喷射天然气双燃料发动机由于预燃室点火系统和预混燃烧,具有排放低的显著优点,不需要任何后处理装置或者EGR就可满足IMO Tier III排放标准。但是由于预混燃烧而带来的爆震等问题严重阻碍了发动机功率的提升,并且天然气狭窄的燃烧界限提高了对发动机进行空燃比控制的难度。因此本文使用数值模拟的方法,深入探究低压喷射天然气双燃料发动机的工作过程对发动机爆震的影响,如天然气与空气的混合过程和预燃室的火焰射流过程等,并寻找影响发动机爆震趋势的参数,以期找到改善发动机爆震的方法。首先,本文使用三维CFD仿真软件CONVERGE建立船用低压喷射天然气双燃料发动机模型。对重要的部位进行网格的局部加密,并设置初始条件和边界条件,配置子模型。对预燃室内的柴油喷雾进行相似孔径喷雾实验的标定。本文发展了适用于船用大缸径预混燃烧发动机的柴油-天然气双燃料化学反应机理。使用正庚烷代替柴油的着火和燃烧,甲烷代替天然气的着火和燃烧。对GRI-Mech 3.0甲烷反应机理的中低温部分进行了优化,与自主简化的正庚烷反应机理构建了柴油-天然气双燃料反应机理。使用点火延迟和层流火焰速度对反应机理进行了验证。并将反应机理应用到所建立的双燃料发动机模型中,进一步验证了反应机理。然后,对双燃料发动机的预燃室气流状态、天然气和空气的预混过程以及预燃室火焰射流和火焰面的传播过程进行了机理分析,并对这些过程中可能出现的对发动机爆震存在影响的天然气局部较浓区域进行了研究。研究了缸内涡流对发动机的燃气混合过程和火焰面传播过程的作用,对稀薄燃烧和高当量比燃烧的燃烧过程进行了对比分析,并提出了预燃室式双燃料发动机的三段放热规律。最后,研究了缸内涡流强度、引燃油喷射量和EGR率等参数对低压喷射天然气双燃料发动机的燃烧过程和爆震的影响规律。研究发现,增强缸内涡流强度会使远端天然气在火焰面传播到来之前来不及发生自燃,降低了爆震的可能性;增加引燃油喷射量会引发多点着火,形成多个火焰面进行传播,增加了爆震的可能性;EGR会降低缸内的温度,使远端天然气不易发生自燃,降低了爆震的可能性。因此,可以通过提高缸内的涡流强度、减少引燃油喷射量和提高EGR率来减轻预燃室式低速双燃料发动机缸内爆震的发生。

关键词：低速柴油-天然气双燃料发动机预燃室预混合燃烧化学反应动力学爆震三维CFD数值模拟

赖氨酸芽孢杆菌氨基甲酸乙酯水解酶的性质研究及异源表达

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赖氨酸芽孢杆菌氨基甲酸乙酯水解酶的性质研究及异源表达

作者：李京京江南大学

学位级别：硕士

氨基甲酸乙酯（Ethyl carbamate或Urethane，简称EC）是发酵食品和发酵饮料酒生产过程和贮藏过程中自然产生的副产物，对动物体和人体具有致癌作用，能够引起肺肿瘤、肝癌、皮肤癌等疾病。氨基甲酸乙酯水解酶（即EC水解酶）能够将EC分... 详细信息

氨基甲酸乙酯（Ethyl carbamate或Urethane，简称EC）是发酵食品和发酵饮料酒生产过程和贮藏过程中自然产生的副产物，对动物体和人体具有致癌作用，能够引起肺肿瘤、肝癌、皮肤癌等疾病。氨基甲酸乙酯水解酶（即EC水解酶）能够将EC分解为无毒的氨、乙醇和二氧化碳，对降低致癌风险和保障食品安全具有重要意义。本研究主要在于EC降解菌株的筛选、EC水解酶的性质研究和异源表达。研究结果主要包括： 1、从小鼠肠道中分离筛选得到一株能够降解氨基甲酸乙酯的菌株，命名为梭形赖氨酸芽孢杆菌（Lysinibacillus fusiformis）。 2、菌体经过超声破碎、硫酸铵分级沉淀、离子层析、疏水层析、高分辨率离子层析和凝胶过滤层析的纯化过程，得到了EC水解酶的纯酶。将EC水解酶纯度提高了279倍，回收率为7%，酶的比活力达81.7U·mg-1。SDS-PAGE电泳显示为单一条带，分子量约为50kDa。 3、酶学性质研究表明：此酶在温度15-45℃时，酶活相对稳定;其最适反应条件为35℃（pH为7.0）;酶活易受到多种离子的抑制，EDTA对酶活没有影响，表明此酶为非金属酶;对低浓度盐和乙醇具有一定的耐受性;以EC为底物的Km值为37.2mmol·L-1，最大反应速率Vmax为7764μmol·min-1。通过测序，确定了其N端氨基酸序列为TTDLHLKSVEEL。由此EC水解酶N端序列与NCBI数据库比对而设计了特异性引物，经PCR扩增得到一段1419bp的基因序列。其在大肠杆菌E. coli BL21（DE3）中的表达验证结果证明其是能编码具有氨基甲酸乙酯水解酶活性的基因。 4、通过优化发酵培养基、温度、IPTG诱导浓度、培养时间等条件，对重组EC水解酶在大肠杆菌中的可溶性表达进行优化。结果显示单位菌体酶活力提高了5.3倍，单位体积酶活力提高了16倍。

关键词：梭形赖氨酸芽孢杆菌氨基甲酸乙酯水解酶氨基甲酸乙酯基因克隆表达优化

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跨视野目标再识别方法研究

跨视野目标再识别方法研究

作者：王攀西安理工大学

学位级别：硕士

在多摄像机监控跟踪网络中,由于被跟踪目标的不确定性因素过多,如监控视角、环境光照、目标姿态变化等,如何对目标进行再识别是一个难点。提取一种稳健的外观统计特征是目标再识别问题的核心。本文提出一种基于注意力特征匹配的目标再... 详细信息

在多摄像机监控跟踪网络中,由于被跟踪目标的不确定性因素过多,如监控视角、环境光照、目标姿态变化等,如何对目标进行再识别是一个难点。提取一种稳健的外观统计特征是目标再识别问题的核心。本文提出一种基于注意力特征匹配的目标再识别方法,首先提取各相机中目标图像局部的颜色纹理特征（ColorSIFT）,之后根据局部的颜色纹理特征按一定准则进行搜索,生成目标图像的注意力显著图,最后结合显著图与ColorSIFT特征进行双向判别,完成目标的识别。论文的主要工作和创新如下:（1）通过对国内外学者的大量研究工作的分析,总结出了多视点协同跟踪中的更关键点问题,即如何建立一种目标外观模型,使其在多个相机中可以保持稳定或较小变化,并且如何针对此外观模型进行相似度量。本文介绍了几种常用的目标外观模型和相似度量方法,总结了目前国内外的研究现状,并提出了一种首先通过校正相机间的成像差异,然后通过提取目标视觉注意力特征进行再识别的方法。（2）由于摄像机本身成像参数、摄像机拍摄角度、场景光照条件等多个方面的影响,造成了目标在多个相机中成像的差异。颜色特征作为目标再识别问题中的重要线索受到了极大影响,本文引入一种亮度转移函数（BTF）概念,通过事先的学习得到了多个相机之间的颜色空间转移模型,依照此模型将同一目标多个相机中的成像差异减小,为提取目标的特征生成注意力打下良好基础。（3）通过对视觉注意力的分析,并仿照人眼视觉总能快速地找出感兴趣的目标这一特征特性,本文提出一种基于注意力特征匹配的目标再识别方法,首先提取各相机中目标图像局部的颜色纹理特征（ColorSIFT）,然后根据局部的颜色纹理特征按一定准则进行搜索,生成目标图像的注意力显著图,最后结合显著图与ColorSIFT特征进行判别。实验结果表明,由于采用注意力信息的识别,对背景噪声不敏感,可在极大程度上忽略由于目标提取过程中引入的复杂背景噪声,同时注意力的生成阶段对目标的姿态变化宽容度较高,可以有效克服姿态变化对识别的影响,实验结果表明,本算法受背景噪声以及目标姿态、光照变化的影响较小,具有较高的识别率。

关键词：视觉注意力目标识别亮度转移函数视频监控

层次化视觉Transformer目标跟踪方法研究

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层次化视觉Transformer目标跟踪方法研究

作者：魏珍西安理工大学

学位级别：硕士

在计算机视觉领域,目标跟踪一直是备受关注的热门研究课题,目标跟踪既能应用于其它计算机视觉任务,也能直接应用于自动驾驶、视频监控、军事战场等实际场景。目标跟踪的工作就是在已知视频序列第一帧图像中目标的初始位置和大小的情况下... 详细信息

在计算机视觉领域,目标跟踪一直是备受关注的热门研究课题,目标跟踪既能应用于其它计算机视觉任务,也能直接应用于自动驾驶、视频监控、军事战场等实际场景。目标跟踪的工作就是在已知视频序列第一帧图像中目标的初始位置和大小的情况下,在后续跟踪过程中自动定位运动目标的位置和大小。随着Transformer模型架构的出现,近年来目标跟踪领域发展迅速,但使用Transformer结构的目标跟踪方法仍存在着问题:未充分利用Transformer结构中注意力模块的动态和全局建模能力;未考虑不同尺度层次特征包含的不同信息等等。通过改进原始Transformer结构以应用不同尺度层次的特征解决这些问题,即设计适用于跟踪任务的特征提取融合网络以更好地使用不同尺度特征包含的信息,进而提升目标跟踪方法的性能。本文主要工作如下:(1)目前大多数基于Transformer的跟踪器都遵循特征提取和特征融合分开处理的设计范式,未充分利用Transformer结构中注意力模块的动态和全局建模能力;其次这些跟踪器未考虑不同尺度层次特征包含的不同信息。因此本文从寻求适用于目标跟踪任务的Transformer结构的角度出发,提出了层次化Transformer特征提取-融合网络,用来作为层次化视觉Transformer目标跟踪方法的主干网络。该特征提取-融合网络使特征提取更特定于相应的跟踪目标,从而更好地捕获模板和搜索区域中目标的相关性,同时在特征提取过程中还综合目标不同尺度层次下的自注意力信息,提升网络的泛化能力,从而达到提升跟踪性能的目的。(2)针对当前目标跟踪方法在获得准确目标位置和宽高方面的不足,本文提出了一个层次化视觉Transformer 目标跟踪方法。该目标跟踪方法汲取了经典分割网络的思想,同时结合了层次化Transformer特征提取-融合网络的设计,构建了一个基于编解码结构的目标跟踪框架。在这个框架中,编码器负责提取目标的准确特征,而解码器则解决了由于编码过程可能丢失部分细节信息的问题。相比于传统方法,层次化视觉Transformer目标跟踪方法不仅能够更准确地捕获目标的位置和宽高,而且还能够更好地适应目标外观的变化,从而提高了跟踪的鲁棒性和泛化能力。(3)本文提出的层次化视觉Transformer目标跟踪方法在3个跟踪基准数据集上取得了有竞争力的性能,包括GOT-10k、TrackingNet和LaSOT测试集。特别是,本文方法在GOT-10k上的平均重叠率AO得分为69%,在TrackingNet上的归一化准确率Pnorm为85.6%,在LaSOT上的准确率P得分为69.3%。本文还进行了深入的消融实验研究,以证明层次化视觉Transformer目标跟踪方法的有效性。本文在目标跟踪数据集GOT10k、TrackingNet和长时目标跟踪数据集LaSOT上评估层次化视觉Transformer目标跟踪方法的性能,实验结果表明本文提出的层次化视觉Transformer目标跟踪方法取得了较高的跟踪精度,优于多个现有跟踪方法。

关键词：目标跟踪 Transformer 特征提取融合编解码结构

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T公司LED照明中东市场营销策略优化研究

T公司LED照明中东市场营销策略优化研究

作者：陈珊珊中南财经政法大学

学位级别：硕士

近年来,随着照明技术的不断更新发展,LED在照明产业逐渐占据主导地位,世界各国越发注重环保节能的照明产品,LED照明在国际市场的占比也越来越重,经过近四十年的发展,中国已成为出口大国。另一方面得力于国家政策扶持,在国家陆续印发的... 详细信息

近年来,随着照明技术的不断更新发展,LED在照明产业逐渐占据主导地位,世界各国越发注重环保节能的照明产品,LED照明在国际市场的占比也越来越重,经过近四十年的发展,中国已成为出口大国。另一方面得力于国家政策扶持,在国家陆续印发的节能减排、科技创新、以及绿色照明等方面的政策中都对LED照明行业给予了极大的支持,促使我国LED照明出口额在近几年得到迅速发展。LED在全世界的销售量呈上升的趋势,说明全球的用户需求量增加,在技术越来越成熟和配件成本变少的双重影响下,进一步刺激了替代需求的增加,促进了LED行业的发展。大部分生产型和出口企业受到2020年的新冠疫情影响,处于停产甚至倒闭的状态降低了供给量,而在需求方消费市场需求被严重地抑制,在供给和需求两方都减少的情况下,导致LED照明市场规模急速下滑;同时随着人力成本、仓库租金、店铺租金以及海运费等各项成本的增加,LED照明企业当前面临着极大的困难,现有的营销策略已无法解决当前LED照明企业面临的业务难题。T照明公司作为一家在国内和中东均有照明业务的贸易型企业具有典型的代表性,对中小照明企业中东市场的业务发展具有重要的借鉴意义。本文首先介绍市场营销的相关理论包括6P营销组合理论、STP营销定位理论,接下来运用PEST分析法对T公司所在市场的外部环境进行分析,用波特五力模型对所处的行业环境进行分析,然后再介绍T公司的发展历史、业务规模、组织结构,分析T公司的内部环境;分析T公司的营销现状,对T公司营销现状进行评估,对中东市场照明产品及市场消费需求进行调查,选定目标市场和产品定位,最后围绕产品、价格、渠道、促销、权力和公共关系等方面的策略优化展开营销方案。通过调查和分析中东市场,本文认为T公司在中东市场的营销,首先应该考虑到中东国家的风险因素,避免在风险较大的国家直接进入投资;其次分别从六个方面提出优化策略,在产品上应该从品牌包装、产品结构、缩短交货期限等方面提升产品的竞争力;在价格上可采用按分销商差别定价和性价比定价等策略;在渠道上可采用建设新渠道,对渠道采取合适的管理政策和激励机制。在促销推广上加强人员推广和网络广告的投入。在权力上应该借助政策和加强与商会的联系为T公司在中东地区的业务开展提供便利。最后从建立销售管理系统、品牌建设等两方面制定实施步骤,为了保证其实施效果还在人员团队建设、组织架构调整、加大财务预算、技术保障等方面制定了保障措施,确保营销优化策略能够顺利实行。

关键词：中东市场 LED照明 6P营销理论 STP