检索结果-南通市图书馆

作者：韩云珍福建农林大学

学位级别：硕士

体外培养成骨细胞是研究骨代谢和成骨机制的重要手段,而将组织工程化骨用于骨缺损的修复是未来临床治疗的趋势所在。培养的成骨细胞多取材于动物的骨和骨膜组织,近些年来,利用具有成骨潜能的骨组织培养成骨细胞,越来越受到人们的关注。... 详细信息

体外培养成骨细胞是研究骨代谢和成骨机制的重要手段,而将组织工程化骨用于骨缺损的修复是未来临床治疗的趋势所在。培养的成骨细胞多取材于动物的骨和骨膜组织,近些年来,利用具有成骨潜能的骨组织培养成骨细胞,越来越受到人们的关注。成骨细胞短柱状,有突起,核圆形,细胞质强嗜碱性。在将要形成骨组织的地方,排列成单层,彼此由突起相连。成骨细胞的主要功能是生成骨组织的纤维和有机基质。在生成有机的细胞间质以后,本身被埋于其中,变为成骨细胞。本实验目的探讨正常新生大鼠颅骨中分离培养大批成骨细胞并进行功能鉴定。方法将24h肉新生大鼠处死,在无菌条件下取出颅骨,剔净后剪成泥状,加入0.25%胰蛋白酶消化30 min,碎骨块接种于培养瓶中培养,通过观察细胞形态学及钙化结节、碱性磷酸酶染色进行鉴定。结果用胰蛋白酶-胶原酶消化法分离的大鼠成骨细胞,在体外培养时可维持其在体内的功能:合成碱性磷酸酶,最终能形成矿化结节。本实验结果显示,此方法简单、实用,并可获得足够数量的成骨细胞,通过特性鉴定,观察了其在体外培养过程中形态结构的变化,建立了体外研究骨形成、骨代谢的生物学模型,并为以后采用成骨细胞移植修复骨缺损奠定了基础。

关键词：大鼠成骨细胞培养成骨细胞鉴定

氮磷营养盐条件下水源性大肠杆菌生物膜形成与耐药的相关性

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

氮磷营养盐条件下水源性大肠杆菌生物膜形成与耐药的相关性

作者：陈秀萍福建农林大学

学位级别：硕士

目的:本试验通过建立微宇宙,观察微宇宙中较低浓度的氮磷营养盐对大肠杆菌耐药表型和生物膜形成能力的影响,以及大肠杆菌生物膜形成过程中有关基因(luxS、mqsR和运动性基因flhD、fiA、motA,以及I型菌毛基因fimH)的相对表达量,确定在氮... 详细信息

目的:本试验通过建立微宇宙,观察微宇宙中较低浓度的氮磷营养盐对大肠杆菌耐药表型和生物膜形成能力的影响,以及大肠杆菌生物膜形成过程中有关基因(luxS、mqsR和运动性基因flhD、fiA、motA,以及I型菌毛基因fimH)的相对表达量,确定在氮磷营养盐条件下大肠杆菌生物膜形成与细菌耐药的相关性。方法:根据本课题组之前所获得的试验结果及微宇宙中总氮(TN)、总磷(TP)的基底值,设置了空白组和处理组(其中,处理组包括4个添加了较低浓度的氮磷营养盐的剂量组),每个组设置两个重复。测定水质指标中的TN、TP浓度及高锰酸盐指数(CODMn),观察其变化情况;采集并分离纯化大肠杆菌样本,然后用CLSI推荐的微量肉汤稀释法检测大肠杆菌对7种抗生素的耐药情况;采用定性检测(玻璃试管法)和半定量检测样品菌生物膜的形成能力,了解较低浓度氮磷营养盐对大肠杆菌生物膜形成的影响;最后利用实时荧光定量PCR检测大肠杆菌生物膜6个相关基因mRNA的表达水平,探讨其与大肠杆菌生物膜形成的相关性。结果:(1)添加较低浓度的氮磷营养盐后,微宇宙中的TN浓度总体来看变化不明显;TP浓度在加入氮磷后不久所有剂量组均降至基底值水平;各剂量组的CODMn在整个试验过程中没有规律性变化。药物敏感性试验结果显示,空白组没有分离到耐药菌株,各处理组的耐药率及多重耐药率均很高,其中中剂量组的整体耐药率最高,其次是高剂量组,最低剂量组和低剂量组的耐药率最低。各处理组主要是对头孢唑啉和氨苄西林的耐药(耐药率大部分在50%-100%的范围内),其次是头孢噻肟(耐药率大都低于50%);而最低剂量组、中剂量组和高剂量组分离获得的菌株中均被检测出对四环素的耐药,高剂量组更是出现了对氯霉素的耐药,但对这两种抗生素的耐药率都比较低。(2)在添加氮磷营养盐后,定性检测生物膜形成情况的结果显示,中剂量组形成的生物膜较其它组明显,其次是低剂量组和高剂量组,最低剂量组形成的生物膜是最不明显的。半定量试验的结果显示,中剂量组分离到的大肠杆菌的整体粘附能力最强,其次足高剂量组,再是低剂量组和最低剂量组。结合所选取样品菌的耐药情况可以发现:细菌耐药,形成的生物膜就比较明显;相反,细菌不耐药,形成的生物膜就比较不明显。(3)分别以第0 d和空白组采集的样品作为校准样品,将实时荧光定量PCR检测结果进行计算。结果均显示了各处理组在加入氮磷营养盐后的第1 d开始luxS、flhD、fliA、motA和fmH基因就出现了相应的表达,区别在于表达水平的高低以及表达持续时间的长短,而mqsR则基本不表达。此外,fhD、fliA、motA和fmH基因的表达水平变化趋势基本一致,其中fiA和motA的总体表达水平最高,其次是fimH,最后则是fhD。结论:(1)添加较低浓度的氮磷营养盐,可以导致微宇宙中分离到的大肠杆菌出现较高水平的耐药,甚至是多重耐药。中剂量组的氮磷营养盐浓度(TN和TP终浓度分别为3.5 mg/L、0.35 mg/L)对大肠杆菌耐药性的产生影响最大。(2)低浓度氮磷营养盐对微宇宙中的大肠杆菌生物膜形成有明显影响。本试验中,细菌耐药与生物膜形成能力之间有直接的相关性。(3)添加较低浓度的氮磷营养盐后,微宇宙中大肠杆菌的生物膜形成能力增强,且与luxs、flhd、fliA、mottA和fimH5个基因有关,与mqsR无关。(4)在微宇宙中添加较低浓度的氮磷营养盐后,出现的大肠杆菌耐药与多重耐药和生物膜形成能力呈正比,而与鞭毛基因及菌毛基因的表达水平和维持时间呈反比。3个鞭毛基因和菌毛基因fmH的表达水平呈正相关。

关键词：微宇宙氮磷营养盐大肠杆菌抗生素耐药生物膜生物膜基因

不同猪群副猪嗜血杆菌的分布与分型及耐药性研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

不同猪群副猪嗜血杆菌的分布与分型及耐药性研究

作者：丘建龙福建农林大学

学位级别：硕士

目的:本研究对福建省部分地区的副猪嗜血杆菌疑似病例及两具体猪场内部不同猪群的副猪嗜血杆菌进行分离鉴定、血清学分型、分子分型及药敏试验等开展研究,为我国和福建地区及猪场内部的副猪嗜血杆菌的流行、分布和临床用药提供切实的基... 详细信息

目的:本研究对福建省部分地区的副猪嗜血杆菌疑似病例及两具体猪场内部不同猪群的副猪嗜血杆菌进行分离鉴定、血清学分型、分子分型及药敏试验等开展研究,为我国和福建地区及猪场内部的副猪嗜血杆菌的流行、分布和临床用药提供切实的基础数据。方法:临床无菌采集病料及各阶段猪群鼻腔拭子样本,采用胰蛋白胨琼脂培养基(TSA)、胰蛋白胨肉汤培养基(TSB)与16SrRNAPCR进行分离鉴定。将分离到的副猪嗜血杆菌送往华中农业大学动物传染病诊断中心,通过传统的KRG琼脂扩散法,进行血清型分型鉴定。并通过ERIC-PCR分型技术对其进行基因分型。同时还利用肉汤稀释法对临床分离株进行耐药性研究。结果:从336份样品中分离出副猪嗜血杆菌57株,分离率为16.96%,其中分离率最高的部位为气管39.13%,肺脏、鼻腔、心脏、淋巴结、肾脏、脾脏和心包积液的分离率分别为 18.37%、18.25%、9.68%、3.45%、7.14%、3.45%和 11.11%;其中126份健康猪鼻拭子中分离出副猪嗜血杆菌23株,分离率为18.25%,其中分离率最高的是育肥猪群41%,哺乳仔猪、保育仔猪和后备母猪的分离率分别为25%、30%和14%;经产母猪鼻拭子中没有分离出HPS。57株临床分离菌的血清型中包括血清型1(4株)、血清型2(5株)、血清型5(1株)、血清型10(8株)、血清型11(2株)、血清型12(2株)、血清型13(1株)、血清型14(2株)和血清型15(2株);另外还有7株有交叉反应和23株不可分型的菌株。ERIC-PCR结果显示HPS基因分型具有很强的多样性,共表现出51种不同的ERIC-PCR基因型,识别率为100%。通过对ERIC-PCR谱图的聚类分析,大致可将其分为两个大的集群(A集群和B集群)共6个小集群,其中所有健康猪群鼻腔拭子分离株的ERIC-PCR图谱相似,均被归为B集群中(图3-2),而A群中除两株外均分离自疑似发病猪,可见疑似发病猪体内的HPS的基因型不同于健康猪群。同时对同一猪场健康猪群的气管和鼻腔分离株进行ERIC-PCR研究,结果显示,同一猪场不同分离部位的HPS的基因型也存在差异。药敏试验结果显示,所有临床分离的56株副猪嗜血杆菌敏感率较高的药物有阿奇霉素(56,98.3%)、氨苄西林(54,94.7%)、头孢噻肟(53,93.0%)和氯霉素(40,70.2%);另外,试验菌株对四环素的耐药率高达49.12%(28株)。副猪嗜血杆菌对环丙沙星的耐药率为12.28%,但其42.11%(24株)的菌株都处于中介值。结论:1.福建部分地区猪场的HPS主要以血清型10、1、2和不能分型的为主,血清型5、11、12、13、14和15仅有少数分离,且血清型3、4、6、7、8和9没有分离到。2.在ERIC-PCR基因分型中,发现HPS具有很强的基因多样性,而且HPS的基因型差异不仅存在于健康猪群和病猪群之间,也存在于健康猪群内的气管和鼻腔之间。3.同一猪场流行的副猪嗜血杆菌同源性具有一定相似性,不同猪场间的HPS在同源性上具有一定的差异。4.在耐药性的研究中,发现福建东南部地区的HPS对头孢噻肟、阿米卡星和氨苄西林敏感性高,而对四环素具有较强的耐药性,同时对环丙沙星也不敏感,这为该地区的临床用药的选择提供了确实的参考。

关键词：副猪嗜血杆菌基因分型 ERIC-PCR 血清型分型耐药性

低水平氮磷营养盐对水源性大肠杆菌群体感应系统的影响

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

低水平氮磷营养盐对水源性大肠杆菌群体感应系统的影响

作者：黄启发福建农林大学

学位级别：硕士

目的:通过建立模型生态系统,研究低水平氮磷营养盐对氨苄西林(AMP)、头孢唑啉(CFZ)、头孢噻肟(CTX)、庆大霉素(GM)、四环素(TE)、环丙沙星(CIP)和氯霉素(CHL)7种抗生素耐药表型产生的影响,了解大肠杆菌在不同剂量营养盐条件下耐药性的... 详细信息

目的:通过建立模型生态系统,研究低水平氮磷营养盐对氨苄西林(AMP)、头孢唑啉(CFZ)、头孢噻肟(CTX)、庆大霉素(GM)、四环素(TE)、环丙沙星(CIP)和氯霉素(CHL)7种抗生素耐药表型产生的影响,了解大肠杆菌在不同剂量营养盐条件下耐药性的维持和变化;分析得到的多重耐药大肠杆菌与群体感应系统调控相关的6个基因sdiA、lsrR、lsrADB、ftsE、ftsQ和hflX表达水平的相关性。方法:建立模型生态系统,共设4个剂量组和一个空白组,每个剂量设置2个重复,分别添加低水平的磷酸二氢钠(NaH2P04)和硝酸铵(NH4N03)营养盐使TN 和 TP 最终浓度分别为 1.50mg/L,0.15mg/L;2.50mg/L,0.25mg/L;3.50 mg/L,0.35 mg/L;4.50 mg/L,0.45 mg/L。采集第 0 d、1 d、8 d、15 d、22 d、29d、36d、54d、85d模型生态系统的水样并测定TN、TP、CODMn和Chla4个水质指标,同时分离、鉴定和保存相应时间点的大肠杆菌;用微量肉汤稀释法检测分离菌对7种抗生素的敏感性,探讨不同氮磷营养盐浓度对大肠杆菌耐药性的影响。以分离到对AMP和CFZ高水平耐药的大肠杆菌为材料,应用Real-time PCR检测调控QS的6个基因sdiA、lsrR、lsrADB、ftsE、ftsQ和hflX的表达水平。用Pearson相关性分析法分析耐药水平和6个基因的表达水平相关性。结果:(1)添加不同剂量低水平的氮磷营养盐可以引发***的耐药。对AMP和CFZ的耐药最明显,大部分表现为高水平的耐药,且二者变化相似,超低剂量组第15 d和第22 d分离到敏感菌,其它都为高水平耐药菌;低剂量组第1d和第8 d分离到对AMP敏感菌,对CFZ表现为低水平的耐药菌,其余都是高水平耐药菌;中剂量组整个过程都分离到对两种药物表现为高水平的耐药菌;高剂量组第8d和第15 d分离到敏感菌,其它都为高水平耐药菌。不同剂量组分离到少量对CTX的耐药菌,没有明显规律性变化。高剂量组的第8 d和第15 d分离到低水平的耐GM的大肠杆菌,第22 d分离到对TE的高水平耐药菌,没有分离到对CIP和CHL的耐药菌。(2)水质指标TN、TP、CODMn、Chla和大肠杆菌对7种药物耐药水平的相关性系数都比较低,但是TN与大肠杆菌对AMP、CFZ和GM耐药水平的相关系数分别为0.447、0.38和0.388,呈低度的相关性;CODMn与大肠杆菌对AMP、CFZ和CTX的相关系数分别为0.605、0.507和0.566,呈低度的相关性。(3)细菌对AMP和CFZ的耐药水平与基因ftsQ表达水平呈负相关,与另外5个基因表达水平呈正相关。超低剂量组:对AMP的耐药水平和基因lsrR、lsrADB、ftsE和hflX的表达水平呈显著的相关性;对CFZ的耐药水平和基因sdiA、lsrR、lsrADB和hflX的表达水平呈低度的相关性。低剂量组:对AMP的耐药水平和基因表达水平呈弱的相关性;对CFZ的耐药水平和基因sdiA、lsrR和hflX的表达水平呈低度的相关性。中剂量组:对AMP的耐药水平和基因lsrR、ftsE的表达水平呈显著的相关性,与基因sdiA和ftsQ的表达水平呈低度的相关性;对CFZ的耐药水平与基因lsrR的表达水平呈显著的相关性,与基因ftsQ表达水平呈低度的相关性。高剂量组:对AMP的耐药水平和基因lsrR、lsrADB和ftsE的表达水平呈显著的相关性,与基因hfX表达水平呈低度的相关性;对CFZ的耐药水平与基因ftsE和hflX的表达水平呈显著的相关性,与基因lsrR和lsrADB的表达水平呈低度的相关性。结论:(1)模型生态系统分离到对AMP和CFZ高水平耐药大肠杆菌与加入的氮磷营养盐有关,但是与加入氮磷营养盐剂量没有明显的关系。(2)模型生态系统分离到对AMP和CFZ高水平耐药与TN和CODMn有一定的相关性,但是不显著。(3)大肠杆菌对CFZ和AMP的高水平耐药与sdiA、lsrR、lsrADB、ftsE和hflX 5个基因的增量表达相关,同时与基因ftsQ的减量表达相关。(4)水源性大肠杆菌可以通过群体感应系统调控相关基因的表达水平,应对氮磷营养盐的刺激而产生高水平耐药菌。

关键词：模型生态系统大肠杆菌耐药水平群体感应系统低水平氮磷营养盐

猪增生性肠炎三种检测方法（FIRSTtest、PCR和ELISA）的比较研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

猪增生性肠炎三种检测方法（FIRSTtest、PCR和ELISA）的比较研究

作者：林婷婷福建农林大学

学位级别：硕士

猪增生性肠炎(PPE)是由胞内劳森氏菌引起的,以回肠和结肠的黏膜出现腺瘤样病变为特征,出现回肠、盲肠及结肠的高度增生变厚,主要感染生长肥育猪,临床表现为间歇性下痢、贫血、食欲下降和生长缓慢,又称为猪回肠炎。猪增生性肠炎自1931年... 详细信息

猪增生性肠炎(PPE)是由胞内劳森氏菌引起的,以回肠和结肠的黏膜出现腺瘤样病变为特征,出现回肠、盲肠及结肠的高度增生变厚,主要感染生长肥育猪,临床表现为间歇性下痢、贫血、食欲下降和生长缓慢,又称为猪回肠炎。猪增生性肠炎自1931年首次报道以来,至今已呈世界性流行,可引发重大经济损失,因此了解猪群不同年龄阶段的流行状态和感染规律,制定有效的预防和控制方案,发展研究出实际有效的检测方法,对不同猪群的流行状况和感染规律进行把握或实时观测,就显得尤为必要。本研究采用三种方法检测同一猪场不同年龄阶段(3、6、9、12、15、18、21以及24周龄)猪只增生性肠炎的感染情况,每个阶段猪采集样本数相同,并按正常、体况差和拉稀平均分配,共120样本。每头猪各采两份样品:一份为直肠采集新鲜粪便样品,另一份为前腔静脉采集血液样品。采集粪便样本分为两份,一份作现场FIRSTtest检测,一份带回实验室作PCR检测。1..FIRSTtest检测。按FIRSTtest检测试剂盒所提供的方法对所采集的新鲜粪便(24h内)进行现场操作,并根据试剂盒提供的判定标准进行结果判定。***检测。设计引物,提取样本DNA,按一定的PCR反应体系进行扩增,并对扩增产物进行电泳分析,判断结果。***检测。对采集的样本进行ELISA试剂盒检测,根据试剂盒提供的判定标准进行结果判定。检测结果表明:FIRSTtest抗原检测的结果与PCR抗原检测结果基本一致,都是在9-12周龄阳性率较高;FIRSTtest检测相对于PCR检测敏感性较高;ELISA抗体检测结果变化趋势较FIRSTtest和PCR检测结果的变化趋势滞后4周左右;FIRSTtest和PCR检测的阳性结果与猪只的下痢呈现较强的相关性。通过三种检测方法的比较研究,为养猪生产提供相关方面的参考依据。

关键词：猪增生型肠炎 FIRSTtest PCR ELISA 比较研究

福建省两个规模化猪场猪瘟和伪狂犬病净化技术应用

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

福建省两个规模化猪场猪瘟和伪狂犬病净化技术应用

作者：王晓燕福建农林大学

学位级别：硕士

为了解猪瘟及伪狂犬同步净化技术临床实用性,采用美国IDEXX动物疫病Elisa试剂盒检测猪场猪瘟免疫抗体及伪狂犬野毒抗体,通过抗体普查、筛查猪瘟免疫耐受个体、调整免疫程序、伪狂犬野毒阳性公猪淘汰、后备猪群猪瘟及伪狂犬抗体同步监测... 详细信息

为了解猪瘟及伪狂犬同步净化技术临床实用性,采用美国IDEXX动物疫病Elisa试剂盒检测猪场猪瘟免疫抗体及伪狂犬野毒抗体,通过抗体普查、筛查猪瘟免疫耐受个体、调整免疫程序、伪狂犬野毒阳性公猪淘汰、后备猪群猪瘟及伪狂犬抗体同步监测及淘汰以及常规免疫监测等系列方法,实现在两个猪场猪瘟及伪狂犬同步净化的目标。首先调查了解了福建省一些猪场现有的免疫程序,以及该免疫程序下猪瘟及伪狂犬抗体的存在问题,结果表明,按照跟胎方式进行免疫,猪瘟抗体在3个规模化猪场临产前的母猪体内的保护率只有53.3%;按照仔猪出生滴鼻进行伪狂犬免疫,不足以保护仔猪抗体水平能够维持到出栏,通常在90-110日龄,仔猪容易发生野毒感染。通过将母猪的猪瘟免疫程序调整为一年4次;仔猪的伪狂犬免疫程序调整为产后45天和90天两次免疫,能够解决以上抗体水平不足的问题。通过多次检测,确定并淘汰猪群中猪瘟免疫耐受母猪。结果表明通过该方法淘汰的母猪比例在两个猪场分别为11.16%和5.63%。之后加强对后备猪配种前检测,发现猪瘟抗体水平不足及伪狂犬野毒感染的个体,实行淘汰。以上工作坚持在两个猪场开展3年,取得母猪产活仔数增加;哺乳仔猪腹泻率下降和保育猪弱仔数下降的成绩,验证了猪瘟及伪狂犬同步净化技术的有效性。

关键词：猪瘟伪狂犬后备母猪免疫耐受净化

头孢喹肟对猪沙门氏菌的PK-PD同步模型的研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

头孢喹肟对猪沙门氏菌的PK-PD同步模型的研究

作者：李冲福建农林大学

学位级别：硕士

目的:沙门氏菌是一类重要的人畜共患病的致病菌,对养殖行业及公共卫生的安全性构成了极大的危害。新型第四代头孢菌素(头孢喹肟)以其优良的抗菌活性为特点成为临床用于治疗沙门氏菌病的理想选择。但是科学的给药方法尚未建立。本过研究... 详细信息

目的:沙门氏菌是一类重要的人畜共患病的致病菌,对养殖行业及公共卫生的安全性构成了极大的危害。新型第四代头孢菌素(头孢喹肟)以其优良的抗菌活性为特点成为临床用于治疗沙门氏菌病的理想选择。但是科学的给药方法尚未建立。本过研究头孢喹肟对猪沙门氏菌的PK/PD同步模型,得出相关的药动-药效学参数,根据这些参数确定适当的给药间隔,制定合理的给药方案,为临床合理使用头孢喹肟,减少耐药的发生提供科学依据。方法:采用微量肉汤稀释法测定头孢喹肟对沙门氏菌的最小抑菌浓度;根据CLSI的标准方法,采用试管法测定出最小杀菌浓度;根据“耐药选择窗理论”,测定防突变浓度MPCpr并计算MSW。通过人工攻毒造病建立沙门氏菌疾病模型,开展头孢喹肟对健康猪以及沙门氏菌发病模型猪的比较药代动力学的研究,采用UPLC方法来测定血清中药物的浓度值。采用Winnonlin药动药效学软件对时间-药物浓度数据进行分析处理结果:在头孢喹肟对沙门氏菌的体外抗菌活性方面,头孢喹肟对沙门氏菌的最小抑菌浓度MIC为0.05μg/mL;最小杀菌浓度为0.2μg/mL;根据“耐药选择窗理论”,初测MPCpr为0.8μg/mL,最终MPC为0.48μg/mL;MSW为0.05μg/mL～0.48μg/mL。按照 2mg/kg.b.w.头孢喹肟单次肌肉注射给健康猪获得药动学参数如下:t1/2α(0.71±0.05h),t1/2β(1.98±0.19h),Tmax(0.71±0.11h),Cmax(1.63±0.45μg/mL),AUC(5.09±2.38μg.h/mL),Vd(0.71±0.08L/kg),CL(0.36±0.08L/h/kg)。患病组的药动学参数如下:t1/2α(0.81±0.16h),t1/2β(1.62±0.43h),Tmax(0.78±0.10h),Cmax(1.31±0.25μg/mL),AUC(6.21 ±2.11μg·h/mL),Vd(0.62±0.22L/kg),CL(0.47±0.19L/h/kg),采用 SPSS 软件进行差异性分析,得出模型组和健康猪组药动学参数差异不显著(P>0.05)。肌肉注射头孢喹肟符合一级吸收二室模型,头孢喹肟在猪的体内吸收速率较快,药物的半衰期短,达峰时间短,表观分布容积小,生物利用度较高。结合头孢喹肟在猪体内药动学数据和半体内MIC,可以获得猪肌肉注射2mg/kg.b.w.下以及沙门氏菌感染后注射2mg/kg.b.w.的半体内PK/PD参数AUC/MIC分别是101.8h和124.2h。根据测得的MIC为0.05μg/mL,计算获得沙门氏菌感染的给药剂量为0.96～1.94mg/kg。以上结果表明,推荐剂量2mg/kg,可以满足治愈条件杀死致病菌且不会产生耐药性,对于正常菌量的感染可以达到有效的治疗,可以作为临床用药的参考。结论:猪人工感染沙门氏菌对头孢喹肟在猪体内的药动学参数影响不显著;头孢喹肟PK-PD同步模型能够有效应用于符合“耐药突变窗理论”的防耐药给药剂量的计算。

关键词：头孢喹肟沙门氏菌药动-药效同步模型耐药突变窗理论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

葡萄糖对水源性肠球菌抗生素耐药形成的影响

葡萄糖对水源性肠球菌抗生素耐药形成的影响

作者：杨帆福建农林大学

学位级别：硕士

目的：通过建立模型生态系统进行研究，了解葡萄糖引发系统中的肠球菌对红霉素、环丙沙星、土霉素、氨苄西林、万古霉素耐药的表型的影响，探讨葡萄糖引发系统中的肠球菌对红霉素和环丙沙星耐药产生的机理。方法：（1）土壤的采集... 详细信息

目的：通过建立模型生态系统进行研究，了解葡萄糖引发系统中的肠球菌对红霉素、环丙沙星、土霉素、氨苄西林、万古霉素耐药的表型的影响，探讨葡萄糖引发系统中的肠球菌对红霉素和环丙沙星耐药产生的机理。方法：（1）土壤的采集：作为底泥的土样采自福州市森林公园，采样点选择游人很少经过的地方。（2）分离土壤中的肠球菌并检测MIC值是否处于敏感的范围，是否可以作为底泥。（3）模型生态系统的建立：建立12个模型系统，分别为0.02g/L、0.1g/L、0.4g/L、1.6g/L、3.2g/L和0g/L，每个剂量设置两个重复加入经过高压灭菌的葡萄糖。（4）耐药表型检测：依次采取0d、1d、8d、16d、28d、40d、86d和140d模型系统中水和底泥交界处的混合物，经培养分离纯化后检测肠球菌对6种抗生素的敏感程度，了解葡萄糖对肠球菌产生抗生素耐药表型变化造成的影响;检测系统各个阶段的溶氧、pH、温度变化，了解添加葡萄糖对水源性肠球菌分离率等的影响。（5）耐药基因检测：检测分离纯化得到的肠球菌ermB、mefA、gyrA以及Esp等基因，对gyrA基因进行测序，分析83和87位点有无突变产生。结果:（1）添加不同剂量葡萄糖对肠球菌分离率的影响不同，添加量在一定范围内可以显著提高肠球菌的分离率;添加0.02g/L剂量可以使系统中的肠球菌分离率从20%提高到90%;添加0.1g/L和0.4g/L剂量组也有不同程度提高;而添加1.6g/L和3.2g/L的剂量组在16d到28d分离率有下降。（2）添加不同剂量葡萄糖没有引发肠球菌对氨苄西林和万古霉素的敏感性产生可检测到的影响。0.02g/L剂量在第8d出现了环丙沙星耐药菌株，并在28d达到最高的57.1%;到140d仅有40%菌株表现为中介，无耐药菌株。0.1g/L剂量在第8d耐药和中介菌株分离率均降到零，而后又呈上升趋势，到140d添加0.1g/L-3.2g/L葡萄糖对环丙沙星的耐药性的影响都比较明显，总的来说葡萄糖的添加剂量越大影响就越大，剂量较大的组耐环丙沙星的菌株的出现时间较早，耐药率也较大。第1d3.2g/L剂量产生的耐药率最高，为60%。0.02g/L剂量在第8d也出现了耐药菌株，并还维持在33.3%。0.4g/L和1.6g/L剂量组均在1d就产生了耐药菌株，并在16d和28d达到最高，而后又都有所下降。3.2g/L剂量组耐药菌株出现较快，第一天耐药率就达到了60%，并且维持了15d;第86d又出现了12.5%的耐药率和37.5%的中介率;到140d耐药和中介菌株均没出现。不同的添加剂量对氯霉素耐药产生的影响也不同，系统中只有0.02g/L和3.2g/L剂量组对氯霉素产生了14.3%和37.5%的耐药率。系统中分离得到的肠球菌对红霉素以及土霉素的耐药菌株出现的都比较晚，而且程度不完全与添加剂量呈正比。（3）分离得到的对红霉素耐药的44株肠球菌中，ermB基因的阳性率为63.6%（28/44），ermB基因呈阳性的菌株中，耐256μg/mL和128μg/mL浓度红霉素的肠球菌有24株，可见对红霉素耐药程度越高越容易出现ermB耐药基因;对红霉素敏感的16株肠球菌均未检测到ermB耐药基因的存在。试验中介导对红霉素耐药的mefA基因仅在中介菌株中检测到一株。肠球菌的gyrA基因试验共检测72株，其中60株显示为阳性，对其进行测序分析发现该基因的83和87位点没有突变的产生。对耐药菌株进行检测没有发现与肠球菌表面蛋白表达有关的Esp基因。结论：（1）一定浓度的葡萄糖可以引发模型中肠球菌产生红霉素、环丙沙星、氯霉素和土霉素耐药，对肠球菌万古霉素、氨苄西林耐药的产生无明显的作用。（2）模型系统中的葡萄糖浓度不同，对肠球菌对环丙沙星、红霉素、氯霉素和土霉素的影响程度不同;对氯霉素耐药的形成影响不大。（3）本试验模型生态系统中的肠球菌的对红霉素耐药与ermB基因的存在有很大关系，而基因测序结果表明gyrA基因的第83和第87位点均未发生突变，说明系统中肠球菌对环丙沙星耐药的形成的原因并不是gyrA基因突变。（4）检测表明本试验耐药菌株中没有出现Esp和mefA基因，说明模型中肠球菌耐药的形成与这两种基因引起的耐药机理无关。

关键词：葡萄糖肠球菌模型生态系统抗生素耐药表型耐药基因

氮磷营养盐对模型生态系统中粪肠球菌抗生素耐药形成的影响

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

氮磷营养盐对模型生态系统中粪肠球菌抗生素耐药形成的影响

作者：包松英福建农林大学

学位级别：硕士

目的：建立模型生态系统研究氮磷营养盐对粪肠球菌产生土霉素(OXY)、氨苄西林(AMP)、环丙沙星(CIP)、万古霉素(VAN)、氯霉素(CHL)、红霉素(ERY)耐药表型的影响，初步探讨氮磷营养盐对粪肠球菌产生土霉素、氯霉素和红霉素耐药的抗生素耐... 详细信息

目的：建立模型生态系统研究氮磷营养盐对粪肠球菌产生土霉素(OXY)、氨苄西林(AMP)、环丙沙星(CIP)、万古霉素(VAN)、氯霉素(CHL)、红霉素(ERY)耐药表型的影响，初步探讨氮磷营养盐对粪肠球菌产生土霉素、氯霉素和红霉素耐药的抗生素耐药基因(ARGs)机理。方法：从福州森林公园采集土样，分装后高压灭菌。检测实验室保存的粪肠球菌纯菌株(ATCC29212)对试验用6种抗生素敏感性，结果表明除了对红霉素中介之外，对其他抗生素菌均敏感，可以作为试验用纯菌株。将增菌后的菌液与灭菌的土样搅拌均匀放入试验用水箱并加入纯水。按照此方法建立8个水箱，共4个剂量组，分别添加含氮量为0mg/L、1.50mg/L、4.5mg/L、12.5mg/L的硝酸铵(NH4NO3)以及含磷量为0mg/L、0.15mg/L、0.45mg/L、1.25mg/L的磷酸二氢钠(NaH2PO4)营养液，每个剂量组两个重复。采集第0d、1d、7d、14d、21d、28d、40d、60d、95d系统中的水样和泥样，水样用于检测富营养化的5个相关指标TN(Total Nitrogen)、TP(TotalPhosphorus)、CODMn(Permanganate Index)、Chla(Chlorophyll-a)、SD(SecchiDepth)，了解不同水箱中水质变化情况;泥样用于检测粪肠球菌对6种抗生素的敏感性，了解氮磷营养盐对粪肠球菌产生抗生素耐药性的影响。用PCR的方法检测土霉素耐药基因tetM、tetL、tetS，红霉素耐药基因ermB、msrC和mefA，氯霉素耐药基因cat以及肠球菌表面蛋白的esp基因。结果：(1)不同剂量氮磷营养盐添加入系统之后，系统中低中高剂量组TN值出现明显梯度变化，使得TLI值在第7d时基本达到预期的轻度、中度、重度富营养化水平，第7d1d之间，由于藻类繁殖不均衡，造成同一剂量组不同水箱之间的Chla和CODMn值出现差异，TLI指数也发生明显变化，而粪肠球菌对不同抗生素耐药现象从第7d开始出现，并持续到第60d不等，暗示着TN、Chla和CODMn指标的改变造成不同程度的富营养化对系统中粪肠球菌引发和维持对6种不同抗生素耐药有十分明显的影响。 (2)添加不同剂量氮磷营养盐对粪肠球菌分离率的影响不同，由于本试验是人为添加纯菌株，因此在第0d，8个水箱的分离率均达到了100%，第18d，低剂量组两个水箱，中剂量组3号水箱和高剂量组1号水箱中粪肠球菌的分离率均高于空白组，且与剂量呈正相关，而第400d，低于空白剂量组;中剂量组5号和高剂量组8号水箱中的粪肠球菌分离率均低于或等于空白剂量组。 (3)添加不同剂量氮磷营养盐可以引发粪肠球菌产生对土霉素、氯霉素、红霉素、环丙沙星以及氨苄西林的耐药;对土霉素耐药的影响与添加剂量呈正相关，高剂量组1号和8号分别在第21d和第7d出现土霉素耐药，之后缓慢升高，到第60d均达到最高值100%，中剂量组3号和5号均在第21d出现土霉素耐药，第60d达到最高值，低剂量组分别在第21d和28d开始出现土霉素耐药，最高值分别达到66.7%和100%;对氯霉素耐药影响随剂量增加而增大，高剂量组8号和中剂量组5号均在第7d就出现氯霉素耐药，且到第60d，耐药率分别达到66.7%和40%，低剂量组仅在第28d和60d出现氯霉素耐药;对红霉素耐药也与剂量呈正相关，高剂量组8号和中剂量组5号在第7d分别出现了14.3%和16.7%的耐药率，之后缓慢上升，第60d达到最高值;低剂量组7号在第21d出现50%耐药率，之后缓慢下降;仅高剂量添加组对环丙沙星耐药性产生明显影响，高剂量组8号在第7d就产生14.3%的环丙沙星耐药率，到第40d上升为50%，之后迅速下降至0，而高剂量1号仅在第40d出现33.3%的耐药率;仅中剂量组5号和低剂量组7号水箱在第21d出现50%和16.7%的氨苄西林耐药率，其余水箱均无明显变化，系统中未分离到粪肠球菌对万古霉素产生耐药。 (4)对土霉素耐药的37株粪肠球菌中，tetM、tetL、tetS基因的阳性率分别为97.3%、62.2%、18.9%，对土霉素敏感的39株粪肠球菌中，tetM、tetL、tetS基因的阳性率分别为89.7%、7.7%、0%;对氯霉素耐药的13株粪肠球菌中，cat基因的阳性率为69.2%，对氯霉素敏感的70株粪肠球菌中，cat基因阳性率为2.9%;检测了对红霉素耐药、中介、敏感的粪肠球菌各22、31、16株，ermB基因阳性率分别为77.3%、77.4%、75.0%，检测了对红霉素耐药、中介、敏感的粪肠球菌各22、40、13株，msrC阳性率分别为18.2%、0%、0%，检测了对红霉素耐药、中介、敏感的粪肠球菌57株，未发现mefA基因，检测了92株粪肠球

关键词：氮磷营养盐粪肠球菌抗生素耐药模型生态系统抗生素耐药基因

动物源性高水平庆大霉素耐药肠球菌流行病学研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

动物源性高水平庆大霉素耐药肠球菌流行病学研究

作者：郑远鹏福建农林大学

学位级别：硕士

高水平庆大霉素耐药(HLGR)肠球菌是日益引起关注的细菌,为了解该细菌在我国兽医临床的流行病学情况,并分析影响这些耐药性形成的可能因素,采集来自福建省不同地区的3个猪场的307株肠球菌,以及来自一个鸡场不同年份的179猪肠球菌,通过筛... 详细信息

高水平庆大霉素耐药(HLGR)肠球菌是日益引起关注的细菌,为了解该细菌在我国兽医临床的流行病学情况,并分析影响这些耐药性形成的可能因素,采集来自福建省不同地区的3个猪场的307株肠球菌,以及来自一个鸡场不同年份的179猪肠球菌,通过筛选试验,分别分离出163株和78株HLGR肠球菌,采用美国临床和实验室标准协会(CLSI)推荐的微量肉汤稀释法测定这些HLGR肠球菌对六种抗生素的耐药性。结果显示：猪场来源的肠球菌中HLGR肠球菌的分离率为53.09%,这些HLGR肠球菌对土霉素、红霉素、万古霉素、氨苄西林、环丙沙星、氯霉素的耐药率分别为99.38%、100%、0%、1.23%、59.51%、79.14%;新旧猪场分离细菌耐药特性比较接近;不同猪群中以保育猪和哺乳仔猪分离的HLGR肠球菌对其它抗生素的耐药率较高,其次为哺乳母猪、怀孕母猪和育肥猪,公猪分离细菌的耐药率最低。鸡场于2007年、2008年分别分离出88株和91株肠球菌,其中HLGR肠球菌分别有35株和43株,分离率分别为39.77%和47.25%。2007年分离的HLGR肠球菌对土霉素、红霉素、万古霉素、氨苄西林、环丙沙星、氯霉素的耐药率分别为100%、100%、2.85%、8.57%、88.57%、74.29%;2007年分离的HLGR肠球菌对土霉素、红霉素、万古霉素、氨苄西林、环丙沙星、氯霉素的耐药率分别为100%、100%、4.65%、6.98%、81.40%、65.12%,同一猪场,不同年份的分离细菌的耐药特性没有发生本质的区别。以上结果表明HLGR肠球菌对常见抗生素表现出较高的耐药性,对万古霉素等也已出现中介细菌或耐药菌,兽医临床有必要采取措施控制HLGR肠球菌对其他抗生素的耐药性的增加。

关键词：高水平庆大霉素耐药肠球菌流行病学猪场鸡场